摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1 国内外十字花科霜霉病的研究进展 | 第14-16页 |
1.1 霜霉病侵染症状 | 第14页 |
1.2 病原菌 | 第14页 |
1.3 传播途径 | 第14页 |
1.4 防治办法 | 第14-15页 |
1.4.1 选育抗霜霉病品种 | 第15页 |
1.4.2 农业防治 | 第15页 |
1.4.3 生物防治 | 第15页 |
1.4.4 化学防治 | 第15页 |
1.5 十字花科霜霉病抗性遗传规律研究 | 第15-16页 |
1.6 十字花科抗霜霉病机理研究 | 第16页 |
2 cDNA-AFLP技术在植物科学研究中的应用 | 第16-17页 |
2.1 cDNA-AFLP技术的基本原理 | 第16-17页 |
2.2 cDNA-AFLP方法的技术特点 | 第17页 |
2.3 cDNA-AFLP方法在科学研究中的应用 | 第17页 |
3 Brc2-Cys Prx基因研究进展 | 第17-18页 |
4 研究的内容、目的及意义 | 第18-20页 |
4.1 实验研究内容 | 第18页 |
4.2 研究目的及意义 | 第18-20页 |
参考文献 | 第20-26页 |
第二章 不结球白菜与霜霉病菌的基因互作 | 第26-50页 |
1 材料 | 第28-29页 |
1.1 实验材料 | 第28-29页 |
2 实验方法 | 第29-37页 |
2.1 植物材料的准备 | 第29页 |
2.2 接种液制备及接种方法 | 第29页 |
2.3 不结球白菜叶片总RNA的提取与检测 | 第29-30页 |
2.3.1 不结球白菜叶片总RNA的提取 | 第29-30页 |
2.3.2 样品总RNA的检测 | 第30页 |
2.4 双链cDNA的合成与纯化 | 第30-31页 |
2.4.1 第一链cDNA的合成 | 第30页 |
2.4.2 第二链cDNA的合成 | 第30-31页 |
2.4.3 双链cDNA的纯化和检测 | 第31页 |
2.5 cDNA-AFLP方法实验流程 | 第31-33页 |
2.5.1 用到的接头和引物 | 第31-32页 |
2.5.2 双链cDNA的酶切反应和酶切片段与特定人工接头的连接 | 第32页 |
2.5.3 酶切片段的预扩增和选择性扩增 | 第32-33页 |
2.6 PCR扩增产物聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-35页 |
2.6.1 电泳玻璃板的准备及组装 | 第33-34页 |
2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶的制备和灌胶 | 第34页 |
2.6.3 扩增产物的凝胶电泳 | 第34页 |
2.6.4 银染显色 | 第34-35页 |
2.7 差异条带序列分析 | 第35页 |
2.8 cDNA-AFLP结果可靠性分析 | 第35-37页 |
2.9 抗病基因在抗/感病植株上的表达模式比较 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-42页 |
3.1 霜霉病菌侵染叶片情况 | 第37-38页 |
3.2 差异表达基因的分离与获得 | 第38-39页 |
3.3 分离基因序列分析 | 第39页 |
3.4 利用qRT-PCR方法验证cDNA-AFLP技术所得结果的可靠性 | 第39-41页 |
3.5 抗病基因在抗/感病植株上的表达量比较 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
第三章 不结球白菜过氧化还原蛋白基因Brc2-Cys Prx的克隆和表达分析 | 第50-68页 |
1 材料与方法 | 第53-54页 |
1.1 实验材料 | 第53页 |
1.2 实验方法 | 第53-54页 |
1.2.1 植物材料的准备 | 第53页 |
1.2.2 接种液制备及接种方法 | 第53页 |
1.2.3 非生物胁迫处理 | 第53页 |
1.2.4 叶片中总RNA提取及cDNA合成 | 第53页 |
1.2.5 不结球白菜Brc2-Cys Prx基因全长cDNA获得 | 第53-54页 |
1.2.6 生物信息学分析 | 第54页 |
1.2.7 不结球白菜Brc2-Cys Prx基因实时定量表达分析 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-63页 |
2.1 不结球白菜Brc2-Cys Prx蛋白的理化性质分析 | 第54-55页 |
2.2 不结球白菜Brc2-Cys Prx蛋白的序列分析 | 第55-58页 |
2.3 不结球白菜Brc2-Cys Prx蛋白的高级结构预测及分析 | 第58页 |
2.4 不结球白菜Brc2-Cys Prx蛋白的分子进化分析 | 第58-59页 |
2.5 不结球白菜Brc2-Cys Prx基因在霜霉菌侵染条件下的表达分析 | 第59-60页 |
2.6 不结球白菜Brc2-Cys Prx基因在非生物胁迫条件下的表达分析 | 第60-63页 |
2.6.1 非生物胁迫处理苏州青幼苗情况 | 第60-62页 |
2.6.2 不结球白菜Brc2-Cys Prx基因在非生物胁迫条件下的表达分析 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-68页 |
全文结论 | 第68-70页 |
附录 | 第70-86页 |
论文发表情况 | 第86-88页 |
致谢 | 第88页 |