| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 抗体 | 第11-13页 |
| 1.2 单克隆抗体的色谱分离纯化及其现状 | 第13-20页 |
| 1.2.1 Protein-A亲和色谱 | 第13-14页 |
| 1.2.2 离子交换色谱 | 第14-15页 |
| 1.2.3 疏水相互作用色谱 | 第15-17页 |
| 1.2.4 混合模式色谱 | 第17-20页 |
| 1.3 环糊精 | 第20-24页 |
| 1.3.1 环糊精的结构 | 第20-21页 |
| 1.3.2 环糊精在生物技术领域的应用 | 第21-24页 |
| 1.4 置换色谱 | 第24-27页 |
| 1.4.1 置换色谱的基本原理 | 第24-25页 |
| 1.4.2 置换剂 | 第25-27页 |
| 1.4.3 置换色谱在生物技术范围中应用 | 第27页 |
| 1.5 本文的研究目的与意义 | 第27-29页 |
| 2 MEP-HCIC的超分子置换色谱模式的设计 | 第29-44页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.3.1 疏水电荷诱导配基(MEP)与环糊精相互作用的分子模拟 | 第30-31页 |
| 2.3.2 疏水电荷诱导色谱介质(HCIC-MEP)的制备 | 第31-32页 |
| 2.3.3 MEP偶联密度的滴定法检测 | 第32-33页 |
| 2.3.4 环糊精洗脱能力的验证 | 第33页 |
| 2.3.5 重复使用性评价 | 第33-34页 |
| 2.3.6 从人血清中分离IgG效果评价 | 第34页 |
| 2.3.7 SDS-聚丙烯酰胺电泳 | 第34页 |
| 2.3.8 离子强度对洗脱影响效果评价 | 第34页 |
| 2.3.9 溶液pH对洗脱影响效果评价 | 第34页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第34-43页 |
| 2.4.1 环糊精与MEP的分子对接分析 | 第34-36页 |
| 2.4.2 环糊精从MEP-HCIC吸附柱洗脱IgG的效果 | 第36-38页 |
| 2.4.3 溶液条件的优化分析 | 第38-40页 |
| 2.4.4 重复使用效果 | 第40-41页 |
| 2.4.5 洗脱选择性 | 第41-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 3 基于环糊精置换洗脱的非盐依赖型疏水色谱方法 | 第44-57页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第44-45页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第45页 |
| 3.3 实验方法 | 第45-49页 |
| 3.3.1 环糊精与苯甲酸结合常数的测定 | 第45-46页 |
| 3.3.2 吸附剂的合成 | 第46-47页 |
| 3.3.3 吸附剂对蛋白动态吸附容量的评价 | 第47-48页 |
| 3.3.4 离子强度对吸附剂蛋白吸附容量的影响评价 | 第48页 |
| 3.3.5 pH值对吸附剂蛋白容量的影响评价 | 第48页 |
| 3.3.6 环糊精对四种介质的洗脱效果评价 | 第48-49页 |
| 3.3.7 重复使用性评价 | 第49页 |
| 3.3.8 复杂成分中IgG分离效果评价 | 第49页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第49-56页 |
| 3.4.1 环糊精与苯甲酸的等温滴定(ITC)结果 | 第49-51页 |
| 3.4.2 介质对IgG与HSA的动态结合量 | 第51-52页 |
| 3.4.3 溶液条件对介质蛋白吸附量的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.4 β-环糊精对各介质的洗脱效果 | 第53-54页 |
| 3.4.5 从复杂体系中分离IgG的效果 | 第54-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-57页 |
| 4 环糊精置换色谱新型配基的开发与性能评价 | 第57-67页 |
| 4.1 引言 | 第57页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第57-58页 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 | 第57-58页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-60页 |
| 4.3.1 游离配基与环糊精相互作用的等温滴定量热实验 | 第58页 |
| 4.3.2 吸附剂的制备 | 第58-59页 |
| 4.3.3 吸附动力学测定 | 第59页 |
| 4.3.4 吸附等温线测定 | 第59-60页 |
| 4.3.5 离子强度对吸附剂吸附蛋白的影响 | 第60页 |
| 4.3.6 洗脱效果评价 | 第60页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第60-65页 |
| 4.4.1 游离配基与环糊精的等温滴定结果 | 第60-62页 |
| 4.4.2 吸附动力学 | 第62页 |
| 4.4.3 吸附等温线 | 第62-63页 |
| 4.4.4 离子强度对吸附效果的影响 | 第63-64页 |
| 4.4.5 洗脱效果 | 第64-65页 |
| 4.5 小结 | 第65-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
