| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 肝再生的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.1.1 细胞因子信号转导 | 第14-16页 |
| 1.1.2 生长因子介导的信号通路 | 第16页 |
| 1.1.3 代谢途径 | 第16-17页 |
| 1.2 肝细胞在肝再生中的作用 | 第17页 |
| 1.3 SPINK3的研究进展 | 第17-22页 |
| 1.3.1 SPINK1/SPINK3的结构与功能 | 第17-18页 |
| 1.3.2 SPINK1/SPINK3与胰腺炎 | 第18-20页 |
| 1.3.3 SPINK1/SPINK3与结肠直肠癌 | 第20页 |
| 1.3.4 SPINK3与自噬 | 第20-21页 |
| 1.3.5 SPINK3的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 SPINK3与肝脏的相关性 | 第22-23页 |
| 1.5 SPINK3调控肝再生的可能机制 | 第23-24页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第24页 |
| 1.7 研究方案 | 第24-28页 |
| 第二章 从转录组水平分析大鼠肝再生中SPINK3调控肝细胞增殖的分子机理 | 第28-40页 |
| 2.1 引言 | 第28-29页 |
| 2.2 材料与方法 | 第29-30页 |
| 2.2.1 主要实验仪器 | 第29页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第29页 |
| 2.2.3 大鼠肝再生模型的制备 | 第29页 |
| 2.2.4 Rat Genome 2302.0 芯片检测及数据整理 | 第29页 |
| 2.2.5 SPINK3基因在大鼠再生肝中的qRT-PCR检测 | 第29-30页 |
| 2.2.6 SPINK3在大鼠再生肝中的蛋白免疫印迹（Western Blot）检测 | 第30页 |
| 2.2.7 SPINK3信号通路的构建 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
| 2.3.1 SPINK家族成员芯片检测结果 | 第30-31页 |
| 2.3.2 qRT-PCR检测SPINK3在大鼠再生肝中的表达情况 | 第31页 |
| 2.3.3 Western Blot检测SPINK3在大鼠再生肝中的表达情况 | 第31-32页 |
| 2.3.4 SPINK3/EGFR信号通路相关基因在大鼠再生肝中的表达变化 | 第32-34页 |
| 2.3.5 转录因子调控的靶基因对细胞增殖的调控作用 | 第34-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 SPINK3调节BRL-3A细胞增殖的分子机理研究 | 第40-66页 |
| 3.1 引言 | 第40-41页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第41-51页 |
| 3.2.1 主要实验仪器 | 第41页 |
| 3.2.2 主要试剂与配制 | 第41-42页 |
| 3.2.3 菌株和细胞系来源 | 第42-43页 |
| 3.2.4 构建SPINK3过表达质粒pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-SPINK3 | 第43-44页 |
| 3.2.5 慢病毒包装与收集 | 第44页 |
| 3.2.6 慢病毒侵染BRL-3A细胞 | 第44-45页 |
| 3.2.7 阳性单克隆筛选以及扩大培养 | 第45页 |
| 3.2.8 SPINK3 siRNA的设计、合成与筛选 | 第45-46页 |
| 3.2.9 MTT法检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞活力的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.10 Brdu法检测干涉SPINK3基因对BRL-3A细胞增殖的影响 | 第47页 |
| 3.2.11 qRT-PCR检测SPINK3相关通路基因的表达情况 | 第47-48页 |
| 3.2.12 Western Blot分析SPINK3相关通路蛋白的表达情况 | 第48页 |
| 3.2.13 流式细胞术检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞周期的影响 | 第48-49页 |
| 3.2.14 流式细胞术检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.15 统计学分析 | 第50-51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-62页 |
| 3.3.1 pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP-SPINK3载体构建鉴定 | 第51-53页 |
| 3.3.2 三种质粒共转染HEK293T细胞 | 第53页 |
| 3.3.3 3A-GFP、3A-SPINK3单克隆筛选以及扩大培养 | 第53-54页 |
| 3.3.4 qRT-PCR筛选SPINK3的最佳干涉片段 | 第54-55页 |
| 3.3.5 MTT法检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞活力的影响 | 第55-56页 |
| 3.3.6 BrdU法检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞增殖的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.7 流式细胞术检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞周期的影响 | 第57-59页 |
| 3.3.8 流式细胞术检测SPINK3表达变化对BRL-3A细胞凋亡的影响 | 第59-61页 |
| 3.3.9 SPINK3信号通路相关基因/蛋白表达变化 | 第61-62页 |
| 3.4 讨论 | 第62-66页 |
| 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
