摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略语 | 第8-9页 |
前言 | 第9-21页 |
1.1 真核生物减数分裂简介 | 第9页 |
1.2 拟南芥减数分裂各时期划分 | 第9-11页 |
1.3 DNA双链断裂的产生 | 第11-12页 |
1.4 DNA双链断裂同源重组修复过程 | 第12-14页 |
1.5 RAD51和DMC1同源蛋白 | 第14-16页 |
1.5.1 RAD51和DMC1与减数分裂 | 第14页 |
1.5.2 芽殖酵母RAD51和DMC1在减数分裂中的作用 | 第14-15页 |
1.5.3 拟南芥RAD51和DMC1在减数分裂中的作用 | 第15-16页 |
1.6 SMC5/6复合体与DNA损伤修复 | 第16-18页 |
1.6.1 酵母SMC5/6复合体与DNA损伤修复 | 第16-18页 |
1.6.2 拟南芥SMC5/6复合体与DNA损伤修复 | 第18页 |
1.7 课题由来 | 第18-19页 |
1.8 本课题的研究目的和意义 | 第19-21页 |
1.8.1 减数分裂对于有性生殖的重要性 | 第19-20页 |
1.8.3 研究RAD51在同源重组中功能的重要意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-40页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 实验用菌株 | 第21页 |
2.1.2 实验用植物材料 | 第21页 |
2.1.3 质粒载体 | 第21页 |
2.1.4 实验试剂 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-37页 |
2.2.0 植物材料的种植 | 第22页 |
2.2.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第22-23页 |
2.2.2 农杆菌感受态的制备 | 第23页 |
2.2.3 电激法质粒转化 | 第23-24页 |
2.2.4 酵母双杂交载体构建 | 第24-26页 |
2.2.5 荧光素酶互补载体构建 | 第26-28页 |
2.2.6 启动子融合载体构建 | 第28-29页 |
2.2.7 拟南芥T-DNA突变体鉴定 | 第29-30页 |
2.2.8 拟南芥点突变鉴定 | 第30-31页 |
2.2.9 拟南芥杂交 | 第31页 |
2.2.10 Gus染色 | 第31-32页 |
2.2.11 拟南芥减数分裂染色体DAPI染色 | 第32页 |
2.2.12 酵母双杂交实验 | 第32-33页 |
2.2.13 荧光素酶互补实验 | 第33-34页 |
2.2.14 转基因拟南芥的构建 | 第34-35页 |
2.2.15 转基因阳性苗鉴定 | 第35页 |
2.2.16 核酸相关实验 | 第35-37页 |
2.3 本研究所用引物信息 | 第37-40页 |
3 结果与分析 | 第40-56页 |
3.1 asap1 rad51双突变体表型分析 | 第40-42页 |
3.1.1 ASAP1的突变可以抑制rad51的不育性 | 第40页 |
3.1.3 asap1 rad51双突变体的育性恢复情况 | 第40-42页 |
3.2 DMCI遗传上位于RAD51和ASAP1 | 第42-45页 |
3.3 DMC1、RAD51、SNI1和ASAP1之间的蛋白相互作用 | 第45-48页 |
3.3.1 ASAP1可以和DMC1与RAD51在体内相互作用 | 第45页 |
3.3.2 DMC1和RAD51可以在体内和体外相互作用 | 第45-47页 |
3.3.3 SNI1可以和DMC1与RAD51在体内相互作用 | 第47-48页 |
3.4 SNI1与ASAP1和NSE5与NSE6蛋白相互作用比较 | 第48-51页 |
3.5 突变SNI1基因不能恢复rad51的育性 | 第51-53页 |
3.6 突变ATR基因不能恢复rad51的育性 | 第53-54页 |
3.7 ASAP1和SNI1时空表达分析 | 第54页 |
3.8 asap1 rad51和asap1 rad51 dmc1减数分裂各时期对比 | 第54-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
附录 | 第68-72页 |
附图 | 第68-72页 |
致谢 | 第72页 |