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RAD51和ASAP1调控植物减数分裂的机理研究

摘要第6-7页
Abstract第7页
缩略语第8-9页
前言第9-21页
    1.1 真核生物减数分裂简介第9页
    1.2 拟南芥减数分裂各时期划分第9-11页
    1.3 DNA双链断裂的产生第11-12页
    1.4 DNA双链断裂同源重组修复过程第12-14页
    1.5 RAD51和DMC1同源蛋白第14-16页
        1.5.1 RAD51和DMC1与减数分裂第14页
        1.5.2 芽殖酵母RAD51和DMC1在减数分裂中的作用第14-15页
        1.5.3 拟南芥RAD51和DMC1在减数分裂中的作用第15-16页
    1.6 SMC5/6复合体与DNA损伤修复第16-18页
        1.6.1 酵母SMC5/6复合体与DNA损伤修复第16-18页
        1.6.2 拟南芥SMC5/6复合体与DNA损伤修复第18页
    1.7 课题由来第18-19页
    1.8 本课题的研究目的和意义第19-21页
        1.8.1 减数分裂对于有性生殖的重要性第19-20页
        1.8.3 研究RAD51在同源重组中功能的重要意义第20-21页
2 材料与方法第21-40页
    2.1 实验材料第21-22页
        2.1.1 实验用菌株第21页
        2.1.2 实验用植物材料第21页
        2.1.3 质粒载体第21页
        2.1.4 实验试剂第21-22页
    2.2 实验方法第22-37页
        2.2.0 植物材料的种植第22页
        2.2.1 大肠杆菌感受态的制备第22-23页
        2.2.2 农杆菌感受态的制备第23页
        2.2.3 电激法质粒转化第23-24页
        2.2.4 酵母双杂交载体构建第24-26页
        2.2.5 荧光素酶互补载体构建第26-28页
        2.2.6 启动子融合载体构建第28-29页
        2.2.7 拟南芥T-DNA突变体鉴定第29-30页
        2.2.8 拟南芥点突变鉴定第30-31页
        2.2.9 拟南芥杂交第31页
        2.2.10 Gus染色第31-32页
        2.2.11 拟南芥减数分裂染色体DAPI染色第32页
        2.2.12 酵母双杂交实验第32-33页
        2.2.13 荧光素酶互补实验第33-34页
        2.2.14 转基因拟南芥的构建第34-35页
        2.2.15 转基因阳性苗鉴定第35页
        2.2.16 核酸相关实验第35-37页
    2.3 本研究所用引物信息第37-40页
3 结果与分析第40-56页
    3.1 asap1 rad51双突变体表型分析第40-42页
        3.1.1 ASAP1的突变可以抑制rad51的不育性第40页
        3.1.3 asap1 rad51双突变体的育性恢复情况第40-42页
    3.2 DMCI遗传上位于RAD51和ASAP1第42-45页
    3.3 DMC1、RAD51、SNI1和ASAP1之间的蛋白相互作用第45-48页
        3.3.1 ASAP1可以和DMC1与RAD51在体内相互作用第45页
        3.3.2 DMC1和RAD51可以在体内和体外相互作用第45-47页
        3.3.3 SNI1可以和DMC1与RAD51在体内相互作用第47-48页
    3.4 SNI1与ASAP1和NSE5与NSE6蛋白相互作用比较第48-51页
    3.5 突变SNI1基因不能恢复rad51的育性第51-53页
    3.6 突变ATR基因不能恢复rad51的育性第53-54页
    3.7 ASAP1和SNI1时空表达分析第54页
    3.8 asap1 rad51和asap1 rad51 dmc1减数分裂各时期对比第54-56页
4 讨论第56-59页
参考文献第59-68页
附录第68-72页
    附图第68-72页
致谢第72页

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