| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-37页 |
| 1.1 绿色生物制造领域的微生物表面展示技术 | 第17-22页 |
| 1.1.1 微生物表面展示技术简介 | 第17-18页 |
| 1.1.2 革兰氏阴性菌表面展示系统 | 第18-19页 |
| 1.1.3 革兰氏阳性菌表面展示系统 | 第19-20页 |
| 1.1.4 内孢子表面展示系统 | 第20页 |
| 1.1.5 酵母表面展示系统 | 第20-22页 |
| 1.1.6 丝状真菌表面展示系统及其全细胞催化剂 | 第22页 |
| 1.2 丝状真菌和黑曲霉细胞工厂 | 第22-29页 |
| 1.2.1 丝状真菌生产的工业酶 | 第22-24页 |
| 1.2.2 黑曲霉细胞工厂 | 第24-25页 |
| 1.2.3 黑曲霉高效表达系统的构建策略 | 第25-27页 |
| 1.2.4 黑曲霉液体深层发酵工艺优化策略 | 第27-29页 |
| 1.3 脂肪酶 | 第29-35页 |
| 1.3.1 脂肪酶简介 | 第29页 |
| 1.3.2 脂肪酶的工业应用 | 第29-31页 |
| 1.3.3 南极假丝酵母脂肪酶B | 第31-33页 |
| 1.3.4 微生物表面展示脂肪酶 | 第33页 |
| 1.3.5 酶法制备脂肪酸酯 | 第33-34页 |
| 1.3.6 酶法制备甘油磷脂酰胆碱 | 第34-35页 |
| 1.4 本课题的研究意义及主要研究内容 | 第35-37页 |
| 1.4.1 选题背景和研究意义 | 第35-36页 |
| 1.4.2 本课题的主要研究内容 | 第36-37页 |
| 第二章 黑曲霉细胞表面展示体系的构建 | 第37-87页 |
| 2.1 引言 | 第37-39页 |
| 2.2 材料与设备 | 第39-46页 |
| 2.2.1 菌株、质粒和引物 | 第39-41页 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 | 第41-42页 |
| 2.2.3 主要试剂和试剂盒 | 第42-43页 |
| 2.2.4 培养基和溶液 | 第43-46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-66页 |
| 2.3.1 pUAGA黑曲霉表面展示基础载体的从头构建 | 第46-53页 |
| 2.3.2 pCALB-CwpA展示载体的构建 | 第53-56页 |
| 2.3.3 重组菌Aspergillus niger/CALB-CwpA的构建 | 第56-60页 |
| 2.3.4 pCALB-SED1展示载体的构建 | 第60-63页 |
| 2.3.5 重组菌Aspergillus niger/CALB-SED1的构建 | 第63-64页 |
| 2.3.6 脂肪酶活力测定方法 | 第64-65页 |
| 2.3.7 菌丝表面展示脂肪酶免疫荧光显微镜检测 | 第65-66页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第66-85页 |
| 2.4.1 黑曲霉细胞表面展示系统基础质粒的从头构建 | 第66-68页 |
| 2.4.2 基于内源锚定蛋白CwpA的黑曲霉表面展示系统的构建 | 第68-73页 |
| 2.4.3 重组菌Aspergillus niger/CALB-CwpA发酵和展示脂肪酶免疫荧光检测 | 第73-76页 |
| 2.4.4 基于异源锚定蛋白SED1的黑曲霉表面展示系统的构建 | 第76-79页 |
| 2.4.5 重组菌Aspergillus niger/CALB-Sed1发酵和展示脂肪酶免疫荧光检测 | 第79-82页 |
| 2.4.6 重组菌Aspergillus niger/CALB-CwpA混合碳源补料发酵 | 第82-85页 |
| 2.5 本章小结 | 第85-87页 |
| 第三章 黑曲霉细胞表面展示CALB在酯化反应中的催化特性表征 | 第87-102页 |
| 3.1 引言 | 第87-88页 |
| 3.2 材料与设备 | 第88-89页 |
| 3.2.1 菌株 | 第88页 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 | 第88页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第88-89页 |
| 3.2.4 培养基 | 第89页 |
| 3.3 实验方法 | 第89-90页 |
| 3.3.1 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂的制备 | 第89页 |
| 3.3.2 Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂的制备 | 第89页 |
| 3.3.3 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂合成脂肪酸乙酯 | 第89-90页 |
| 3.3.4 Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂合成脂肪酸异丙酯 | 第90页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第90-100页 |
| 3.4.1 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂合成脂肪酸乙酯 | 第90-93页 |
| 3.4.2 初始水添加量对Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂酯化特性的影响 | 第93-94页 |
| 3.4.3 底物摩尔比对Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂酯化特性的影响 | 第94-95页 |
| 3.4.4 反应温度对Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂酯化特性的影响 | 第95-96页 |
| 3.4.5 Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂用量对酯化特性的影响 | 第96-97页 |
| 3.4.6 合成不同脂肪酸碳链长度的异丙酯 | 第97-98页 |
| 3.4.7 Aspergillus niger/CALB-SED1全细胞催化剂的操作稳定性 | 第98-100页 |
| 3.5 本章小结 | 第100-102页 |
| 第四章 黑曲霉细胞表面展示CALB在转酯反应中的催化特性表征 | 第102-119页 |
| 4.1 引言 | 第102-103页 |
| 4.2 材料与设备 | 第103-104页 |
| 4.2.1 菌株 | 第103页 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 | 第103页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第103-104页 |
| 4.2.4 培养基 | 第104页 |
| 4.3 实验方法 | 第104-105页 |
| 4.3.1 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂的制备 | 第104页 |
| 4.3.2 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂醇解PC | 第104页 |
| 4.3.3 薄层色谱法检测分析 | 第104页 |
| 4.3.4 液相色谱法检测分析 | 第104-105页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第105-118页 |
| 4.4.1 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂催化PC醇解 | 第105-107页 |
| 4.4.2 反应介质对Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的影响 | 第107-108页 |
| 4.4.3 底物浓度对Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的 影响 | 第108-109页 |
| 4.4.4 底物摩尔比对Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的影响 | 第109-111页 |
| 4.4.5 反应温度对Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的影响 | 第111-112页 |
| 4.4.6 水添加量对Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的影响 | 第112-113页 |
| 4.4.7 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂用量对转酯反应的影响 | 第113-114页 |
| 4.4.8 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂转酯反应的时间进程 | 第114-116页 |
| 4.4.9 Aspergillus niger/CALB-CwpA全细胞催化剂在转酯反应中的操作稳定性 | 第116-118页 |
| 4.5 本章小结 | 第118-119页 |
| 结论与展望 | 第119-122页 |
| 结论 | 第119-120页 |
| 本论文的创新点 | 第120页 |
| 展望 | 第120-122页 |
| 参考文献 | 第122-142页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 附表 | 第144页 |
