| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-32页 |
| 1.1 二硫吡咯酮类化合物的概述 | 第13-19页 |
| 1.1.1 二硫吡咯酮类化合物的结构特点与分离 | 第13-17页 |
| 1.1.2 二硫吡咯酮类化合物的生物活性 | 第17-19页 |
| 1.2 二硫吡咯酮类化合物的合成机制 | 第19-28页 |
| 1.2.1 非核糖体多肽的合成机制 | 第19-20页 |
| 1.2.2 Holomycin的生物合成研究 | 第20-25页 |
| 1.2.3 Thiomarinol的生物合成研究 | 第25页 |
| 1.2.4 定向前体合成二硫吡咯酮类化合物 | 第25-27页 |
| 1.2.5 二硫吡咯酮类化合物的化学合成机制 | 第27-28页 |
| 1.3 二硫吡咯酮类化合物的作用机制 | 第28-30页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-46页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第32-38页 |
| 2.1.2 实验所用的引物 | 第38-41页 |
| 2.1.3 实验所用的培养基 | 第41-43页 |
| 2.1.4 生化试剂 | 第43-45页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第45-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-54页 |
| 2.2.1 菌种培养及保藏 | 第46页 |
| 2.2.2 链霉菌总DNA的提取—醋酸钾法 | 第46页 |
| 2.2.3 链霉菌质粒DNA的少量提取 | 第46-47页 |
| 2.2.4 PCR扩增基因片段 | 第47页 |
| 2.2.5 DNA片段回收(Axygen DNA凝胶回收试剂盒) | 第47-48页 |
| 2.2.6 醋酸钠纯化DNA | 第48页 |
| 2.2.7 酶连反应 | 第48页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞制备及DNA转化 | 第48-49页 |
| 2.2.9 大肠杆菌质粒的小量抽提 | 第49页 |
| 2.2.10 大肠杆菌和链霉菌的两亲本属间接合转移 | 第49页 |
| 2.2.11 Southern杂交 | 第49-51页 |
| 2.2.12 提取RNA及反转录 | 第51-53页 |
| 2.2.13 PCR-tageting中大肠杆菌电转化感受态的制备及电转化 | 第53页 |
| 2.2.14 菌株的固体发酵及萃取检测 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-101页 |
| 3.1 二硫吡咯酮类化合物基因簇的比较与分析 | 第54-55页 |
| 3.2 Holomycin生物合成基因簇中部分基因功能的研究 | 第55-67页 |
| 3.2.1 酰基转移酶基因的相关研究 | 第55-60页 |
| 3.2.2 硫酯酶基因的相关研究 | 第60-66页 |
| 3.2.3 酰胺合成酶基因的相关研究 | 第66-67页 |
| 3.3 Aureothricin生物合成基因簇(aut)的初步研究 | 第67-84页 |
| 3.3.1 aut基因簇异源表达产物的分析 | 第67-68页 |
| 3.3.2 异源硫酯酶基因hlmK的共表达有效促进aut基因簇异源表达产物的高产 | 第68-74页 |
| 3.3.3 甲基转移酶基因orf2和orf7的功能研究 | 第74-80页 |
| 3.3.4 酰基转移酶基因autA的功能研究 | 第80-84页 |
| 3.4 Thiolutin生物合成基因簇(thi)的初步研究 | 第84-101页 |
| 3.4.1 thi基因簇异源表达产物的鉴定 | 第84-85页 |
| 3.4.2 硫氧还蛋白还原酶的相关研究 | 第85-87页 |
| 3.4.3 thi基因簇边界的确定 | 第87-101页 |
| 4 讨论 | 第101-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 附录1 | 第113-116页 |
| 附录2 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
