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林木谷氨酸脱羧酶(GAD)基因克隆及其催化产物GABA的调控功能

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 绪论第17-30页
    1.1 研究目的和意义第17-18页
    1.2 盐胁迫下植物生长的影响第18页
    1.3 盐胁迫下植物激素调控第18-20页
        1.3.1 脱落酸的调控作用第18-19页
        1.3.2 乙烯的调控作用第19页
        1.3.3 赤霉素的调控作用第19-20页
        1.3.4 细胞分裂素的调控作用第20页
        1.3.5 生长素的调控作用第20页
    1.4 谷氨酸脱羧酶(GAD)基因研究进展第20-23页
        1.4.1 动物中GAD基因的发现第20-21页
        1.4.2 植物中GAD基因的发现第21-22页
        1.4.3 植物GAD基因抗逆研究第22-23页
    1.5 γ-氨基丁酸(GABA)研究进展第23-28页
        1.5.1 GABA研究概况第23-24页
        1.5.2 GABA生理功能第24-28页
            1.5.2.1 参与抵御逆境第24-28页
    1.6 存在的问题第28页
    1.7 研究内容第28-29页
    1.8 技术路线第29-30页
第二章 中间锦鸡儿GAD基因全长cDNA克隆第30-51页
    2.1 实验材料第30-31页
    2.2 实验方法第31-37页
        2.2.1 GAD基因序列数据库比对第31页
        2.2.2 总RNA提取与检测第31-32页
        2.2.3 ClGADs基因全长cDNA克隆第32-35页
        2.2.4 琼脂糖凝胶回收特异片段第35页
        2.2.5 载体克隆和测序鉴定第35-37页
    2.3 结果与分析第37-49页
        2.3.1 总RNA提取和鉴定第37-38页
        2.3.2 特异引物 3'-RACE和 5'-RACE扩增第38-39页
        2.3.3 特异性引物扩增第39-40页
        2.3.4 GAD全长cDNA序列分析第40-47页
        2.3.5 GAD基因系统进化树分析第47-49页
    2.4 讨论第49-51页
第三章 中间锦鸡儿GAD基因表达模式分析第51-61页
    3.1 实验材料第51页
    3.2 实验方法第51-55页
        3.2.1 GABA含量测定第51-53页
        3.2.2 总RNA提取与检测第53页
        3.2.3 反转录合成cDNA第53-54页
        3.2.4 荧光定量PCR检测基因表达情况第54-55页
    3.3 结果与分析第55-59页
        3.3.1 中间锦鸡儿ClGAD1和ClGAD2基因表达模式分析第55-57页
        3.3.2 不同处理下中间锦鸡儿GABA含量测定第57-59页
    3.4 讨论第59-61页
第四章 GAD催化产物GABA的调控作用第61-109页
    4.1 实验材料第61-62页
    4.2 实验方法第62-63页
    4.3 测定指标第63-67页
        4.3.1 H_2O_2含量测定(组织化学染色)第63页
        4.3.2 GABA含量测定第63页
        4.3.3 总RNA提取第63-64页
        4.3.4 RNA纯度及浓度检测第64页
        4.3.5 文库构建第64-65页
        4.3.6 文库检测和上机测序第65页
        4.3.7 测序数据比对分析第65-66页
        4.3.8 RT-PCR验证测序结果第66-67页
    4.4 结果和分析第67-102页
        4.4.1 H_2O_2含量检测第67-68页
        4.4.2 GABA含量分析第68-69页
        4.4.3 RNA质量分析第69页
        4.4.4 测序质量分析第69-70页
        4.4.5 测序比对分析第70-71页
        4.4.6 基因表达水平分析第71-72页
        4.4.7 RNA-Seq相关性检查第72-73页
        4.4.8 基因差异表达分析第73-75页
        4.4.9 差异表达基因分布特征第75-76页
        4.4.10 差异表达基因GO分类第76-78页
        4.4.11 差异基因代谢途径KEGG分类第78-84页
        4.4.12 活性氧ROS相关基因差异表达分析第84-88页
        4.4.13 激素合成和信号调控相关基因第88-100页
        4.4.14 荧光定量验证差异基因表达第100-102页
    4.5 讨论第102-108页
    4.6 小结第108-109页
第五章 结论与展望第109-111页
    5.1 结论第109-110页
    5.2 展望第110-111页
参考文献第111-121页
附录第121-157页
在读期间学术研究第157-158页
致谢第158页

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