摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第17-30页 |
1.1 研究目的和意义 | 第17-18页 |
1.2 盐胁迫下植物生长的影响 | 第18页 |
1.3 盐胁迫下植物激素调控 | 第18-20页 |
1.3.1 脱落酸的调控作用 | 第18-19页 |
1.3.2 乙烯的调控作用 | 第19页 |
1.3.3 赤霉素的调控作用 | 第19-20页 |
1.3.4 细胞分裂素的调控作用 | 第20页 |
1.3.5 生长素的调控作用 | 第20页 |
1.4 谷氨酸脱羧酶(GAD)基因研究进展 | 第20-23页 |
1.4.1 动物中GAD基因的发现 | 第20-21页 |
1.4.2 植物中GAD基因的发现 | 第21-22页 |
1.4.3 植物GAD基因抗逆研究 | 第22-23页 |
1.5 γ-氨基丁酸(GABA)研究进展 | 第23-28页 |
1.5.1 GABA研究概况 | 第23-24页 |
1.5.2 GABA生理功能 | 第24-28页 |
1.5.2.1 参与抵御逆境 | 第24-28页 |
1.6 存在的问题 | 第28页 |
1.7 研究内容 | 第28-29页 |
1.8 技术路线 | 第29-30页 |
第二章 中间锦鸡儿GAD基因全长cDNA克隆 | 第30-51页 |
2.1 实验材料 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-37页 |
2.2.1 GAD基因序列数据库比对 | 第31页 |
2.2.2 总RNA提取与检测 | 第31-32页 |
2.2.3 ClGADs基因全长cDNA克隆 | 第32-35页 |
2.2.4 琼脂糖凝胶回收特异片段 | 第35页 |
2.2.5 载体克隆和测序鉴定 | 第35-37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-49页 |
2.3.1 总RNA提取和鉴定 | 第37-38页 |
2.3.2 特异引物 3'-RACE和 5'-RACE扩增 | 第38-39页 |
2.3.3 特异性引物扩增 | 第39-40页 |
2.3.4 GAD全长cDNA序列分析 | 第40-47页 |
2.3.5 GAD基因系统进化树分析 | 第47-49页 |
2.4 讨论 | 第49-51页 |
第三章 中间锦鸡儿GAD基因表达模式分析 | 第51-61页 |
3.1 实验材料 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-55页 |
3.2.1 GABA含量测定 | 第51-53页 |
3.2.2 总RNA提取与检测 | 第53页 |
3.2.3 反转录合成cDNA | 第53-54页 |
3.2.4 荧光定量PCR检测基因表达情况 | 第54-55页 |
3.3 结果与分析 | 第55-59页 |
3.3.1 中间锦鸡儿ClGAD1和ClGAD2基因表达模式分析 | 第55-57页 |
3.3.2 不同处理下中间锦鸡儿GABA含量测定 | 第57-59页 |
3.4 讨论 | 第59-61页 |
第四章 GAD催化产物GABA的调控作用 | 第61-109页 |
4.1 实验材料 | 第61-62页 |
4.2 实验方法 | 第62-63页 |
4.3 测定指标 | 第63-67页 |
4.3.1 H_2O_2含量测定(组织化学染色) | 第63页 |
4.3.2 GABA含量测定 | 第63页 |
4.3.3 总RNA提取 | 第63-64页 |
4.3.4 RNA纯度及浓度检测 | 第64页 |
4.3.5 文库构建 | 第64-65页 |
4.3.6 文库检测和上机测序 | 第65页 |
4.3.7 测序数据比对分析 | 第65-66页 |
4.3.8 RT-PCR验证测序结果 | 第66-67页 |
4.4 结果和分析 | 第67-102页 |
4.4.1 H_2O_2含量检测 | 第67-68页 |
4.4.2 GABA含量分析 | 第68-69页 |
4.4.3 RNA质量分析 | 第69页 |
4.4.4 测序质量分析 | 第69-70页 |
4.4.5 测序比对分析 | 第70-71页 |
4.4.6 基因表达水平分析 | 第71-72页 |
4.4.7 RNA-Seq相关性检查 | 第72-73页 |
4.4.8 基因差异表达分析 | 第73-75页 |
4.4.9 差异表达基因分布特征 | 第75-76页 |
4.4.10 差异表达基因GO分类 | 第76-78页 |
4.4.11 差异基因代谢途径KEGG分类 | 第78-84页 |
4.4.12 活性氧ROS相关基因差异表达分析 | 第84-88页 |
4.4.13 激素合成和信号调控相关基因 | 第88-100页 |
4.4.14 荧光定量验证差异基因表达 | 第100-102页 |
4.5 讨论 | 第102-108页 |
4.6 小结 | 第108-109页 |
第五章 结论与展望 | 第109-111页 |
5.1 结论 | 第109-110页 |
5.2 展望 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-121页 |
附录 | 第121-157页 |
在读期间学术研究 | 第157-158页 |
致谢 | 第158页 |