| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩写词表 | 第8-11页 |
| 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 引言 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第19页 |
| 2.1.5 有关Tricine-SDS-PAGE溶液的配制 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 pGHKα-AvBD2重组质粒的构建 | 第20-23页 |
| 2.2.2 重组GS115/pGHKα-AvBD2工程菌的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.3 重组AvBD2的表达及鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.4 重组AvBD2的活性检测 | 第26页 |
| 2.2.5 重组毕赤酵母表达条件优化 | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-42页 |
| 3.1 重组GS115/pGHKα-AvBD2工程菌的构建 | 第28-29页 |
| 3.1.1 重组质粒pGHKα-AvBD2的构建 | 第28-29页 |
| 3.1.2 重组GS115/pGHKα-AvBD2工程菌的筛选与鉴定 | 第29页 |
| 3.2 重组AvBD2的组成型表达 | 第29-31页 |
| 3.2.1 蛋白浓度的测定 | 第29-30页 |
| 3.2.2 Tricine-SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| 3.2.3 Western blot蛋白鉴定 | 第31页 |
| 3.3 重组AvBD2活性分析 | 第31-33页 |
| 3.3.1 重组AvBD2体外抑菌检测 | 第31-32页 |
| 3.3.2 重组AvBD2溶血活性检测 | 第32-33页 |
| 3.4 重组毕赤酵母表达条件优化 | 第33-42页 |
| 3.4.1 重组毕赤酵母生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 3.4.2 接种量对重组毕赤酵母生长及其蛋白产量的影响 | 第34页 |
| 3.4.3 装液量对重组毕赤酵母生长及其蛋白产量的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.4 发酵温度对重组毕赤酵母生长及其蛋白产量的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.5 响应面优化重组酵母表达条件 | 第36-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 重组AvBD2工程菌的构建及组成型表达 | 第42页 |
| 4.2 重组AvBD2的活性分析 | 第42-43页 |
| 4.3 重组酵母响应面法条件优化 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |
