| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| ·TTV 的发现及概况 | 第17-19页 |
| ·人TTV 的研究进展 | 第19-25页 |
| ·人TTV 流行情况的调查 | 第19页 |
| ·人TTV 的分子生物学特征 | 第19-24页 |
| ·人TTV 的致病性 | 第24页 |
| ·人TTV 感染的诊断 | 第24-25页 |
| ·猪源TTV 研究现状 | 第25-27页 |
| ·猪源TTV 的流行病学调查 | 第25页 |
| ·猪源TTV 的基因型 | 第25-26页 |
| ·猪源TTV 的分子生物学特征 | 第26页 |
| ·猪源TTV 的致病性 | 第26-27页 |
| ·猪源TTV 的检测方法 | 第27页 |
| ·TTV 研究的前景展望 | 第27页 |
| ·目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 猪源TTV 转录本的鉴定 | 第29-47页 |
| ·材料与方法 | 第29-37页 |
| ·质粒、菌株和细胞 | 第29页 |
| ·试验试剂和主要仪器设备 | 第29-30页 |
| ·CaCl_2 法制备大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞 | 第30页 |
| ·阳性质粒转化至DH5α感受态细胞 | 第30页 |
| ·小量制备阳性质粒 | 第30-31页 |
| ·阳性质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
| ·大量制备阳性质粒 | 第31-33页 |
| ·阳性质粒转染至张氏肝细胞系 | 第33-34页 |
| ·提取总RNA | 第34-35页 |
| ·总RNA 中残余DNA 的检测 | 第35页 |
| ·反转录 | 第35-36页 |
| ·PCR 扩增目的基因片段 | 第36页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第36-37页 |
| ·目的基因片段的克隆与测序 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-45页 |
| ·含TTV2 FJ2 基因组不同拷贝数的三种质粒的酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| ·含TTV2 FJ2 基因组不同拷贝数的三种质粒的大量抽提结果 | 第38-39页 |
| ·总RNA 反转录后目的基因的扩增结果 | 第39-41页 |
| ·测序结果分析 | 第41-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 猪源TTV2 ORF1 和ORF2 的多克隆抗体制备 | 第47-61页 |
| ·材料与方法 | 第47-54页 |
| ·质粒、菌株与载体 | 第47页 |
| ·试剂与仪器 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47-48页 |
| ·TSS 法制备BL21(DE3)pLysS 感受态细胞 | 第48页 |
| ·ORF1 全长的体外表达 | 第48-49页 |
| ·ORF1 的B 细胞表位富集区和ORF2 全长的体外表达 | 第49-53页 |
| ·ORF1a 和ORF2 的多克隆抗体的制备 | 第53-54页 |
| ·ORF1a 和ORF2 多克隆抗体的ELISA 效价测定 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-59页 |
| ·ORF1 的抗原性分析结果 | 第54-55页 |
| ·ORF1a 和ORF2 基因的PCR 扩增 | 第55页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第55-56页 |
| ·ORF1a 和ORF2 重组蛋白的表达与纯化 | 第56-59页 |
| ·ORF1a 和ORF2 多克隆抗体的ELISA 效价测定 | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 猪源TTV 荧光定量PCR 检测方法的建立 | 第61-69页 |
| ·材料与方法 | 第61-64页 |
| ·病料与核酸样品 | 第61页 |
| ·试剂和仪器 | 第61-62页 |
| ·引物和探针设计 | 第62页 |
| ·病毒基因组DNA 的提取 | 第62页 |
| ·阳性标准模板的制备 | 第62-63页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第63页 |
| ·特异性试验 | 第63页 |
| ·敏感性试验 | 第63页 |
| ·重复性试验 | 第63-64页 |
| ·病料的的检测 | 第64页 |
| ·结果 | 第64-68页 |
| ·标准曲线的建立 | 第64-65页 |
| ·特异性试验结果 | 第65-67页 |
| ·敏感性试验结果 | 第67页 |
| ·重复性试验结果 | 第67页 |
| ·样品检测结果 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| 第五章 全文结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简历 | 第81页 |
