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长角血蜱HL-3和HL-4功能基因的克隆及鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-23页
   ·蜱功能分子研究的重要性第12-13页
   ·蜱功能基因的分布、类型及研究进展第13-20页
     ·唾液腺相关功能分子的研究进展第13-15页
     ·中肠相关功能分子的研究进展第15-17页
     ·卵巢相关的功能分子的研究进展第17-18页
     ·血淋巴相关的功能分子的研究进展第18-20页
     ·其他功能分子分布及研究进展第20页
   ·蜱功能分子的应用第20-22页
     ·制备新的重组混合抗蜱疫苗第20-21页
     ·研制抗病原传播疫苗第21页
     ·研制出新的药用生物制剂第21页
     ·研制与蜱耐药性相关的策略第21-22页
   ·研究的内容和方法第22-23页
第二章 材料和方法第23-34页
   ·材料第23页
     ·试验动物第23页
     ·试剂第23页
     ·仪器设备第23页
   ·方法第23-34页
     ·引物设计第23-24页
     ·长角血蜱饥饿雌蜱总RNA 提取第24-25页
     ·mRNA 的纯化第25-26页
     ·RACE cDNA 一链的合成和RACE 扩增第26-27页
     ·RACE 产物的胶回收第27页
     ·RACE PCR 扩增产物的连接、转化和测序第27-28页
     ·全序列的生物信息学分析第28-30页
     ·目的基因的克隆第30-31页
     ·重组载体的原核表达第31页
     ·MagneGST~(TM) 小量纯化蛋白第31页
     ·融合蛋白的大量纯化第31页
     ·Western blotting 检测第31-32页
     ·蜱不同发育阶段和组织中的相对定量第32页
     ·免疫和攻蜱实验第32-33页
     ·RNAi 实验第33-34页
第三章 HL-3 和HL-4 基因全长的获得及生物信息学分析第34-47页
   ·结果第34-45页
     ·长角血蜱总RNA 的提取第34页
     ·HL-3 RACE cDNA 5′端的扩增.第34-35页
     ·HL-4 RACE 5′端和3′端的扩增第35-36页
     ·HL-3 基因全长的获得及生物信息学分析第36-39页
     ·HL-4 基因全长的获得及生物信息学分析第39-42页
     ·HL-3 的遗传发育分析第42-43页
     ·HL-4 遗传发育分析.第43-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 HL-3 基因的克隆、表达及功能特性的研究第47-57页
   ·实验结果第47-55页
     ·HL-3 基因全长序列的扩增第47-48页
     ·重组表达载体的PCR 及酶切鉴定第48页
     ·表达产物的SDS-PAGE 分析第48-49页
     ·Western blotting 分析第49-50页
     ·酶活性的最适pH第50页
     ·HL-3 不同发育阶段和组织中的分布第50-52页
     ·HL-3 不同条件下的诱导表达第52-53页
     ·长角血蜱不同发育阶段中天然HL-3 蛋白的分析第53-54页
     ·动物免疫实验第54页
     ·RNAi 效果第54-55页
   ·讨论第55-57页
第五章HL-4 基因的克隆、表达及功能特性研究第57-64页
   ·结果第57-62页
     ·HL-4 基因全长序列的扩增第57-58页
     ·重组表达载体的PCR 及酶切鉴定第58页
     ·表达产物的SDS-PAGE 分析第58-59页
     ·Western blotting 分析第59-60页
     ·HL-4 不同发育阶段和组织中的分布第60-61页
     ·HL-4 的诱导表达第61-62页
   ·讨论第62-64页
第六章 全文结论第64-65页
   ·结论一第64页
   ·结论二第64页
   ·结论三第64页
   ·结论四第64-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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