摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略词及英汉对照表 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-38页 |
1 植物非生物胁迫 | 第14-17页 |
1.1 植物对非生物胁迫的响应机制 | 第14-15页 |
1.2 植物非生物胁迫的信号调控模式 | 第15-17页 |
2 泛素蛋白酶体途径与植物非生物胁迫响应 | 第17-36页 |
2.1 泛素蛋白酶体途径 | 第17-23页 |
2.2 UPS在植物响应非生物胁迫中的功能 | 第23-36页 |
3 小结 | 第36-38页 |
第二章 水稻E3泛素连接酶基因ZFIP1的功能分析 | 第38-84页 |
1 材料与方法 | 第39-52页 |
1.1 植物材料及处理 | 第39-40页 |
1.2 菌株、质粒和试剂盒 | 第40页 |
1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第40页 |
1.4 实时定量PCR分析 | 第40页 |
1.5 GUS组织化学染色 | 第40-41页 |
1.6 序列分析 | 第41页 |
1.7 亚细胞定位分析 | 第41-42页 |
1.8 酵母菌感受态制备和少量转化 | 第42-43页 |
1.9 酵母转录自激活实验 | 第43页 |
1.10 原生质体瞬时转录激活检测分析 | 第43页 |
1.11 体外泛素化活性分析 | 第43-47页 |
1.12 水稻转基因植株的获得及鉴定 | 第47-49页 |
1.13 转基因水稻的耐逆性鉴定 | 第49页 |
1.14 脯氨酸含量测定 | 第49-50页 |
1.15 抗氧化酶活性测定 | 第50页 |
1.16 原位组织化学定位O_2~-和H_2O_2 | 第50页 |
1.17 烟草注射实验 | 第50-51页 |
1.18 ZFIP1过表达转基因和野生型水稻幼苗冷处理前后的芯片分析 | 第51-52页 |
2 结果和分析 | 第52-80页 |
2.1 水稻ZFIP1的分子生物学鉴定 | 第52-60页 |
2.2 水稻ZFIP1的生物学功能分析 | 第60-74页 |
2.3 基因芯片结果分析 | 第74-80页 |
3 讨论 | 第80-84页 |
3.1 ZFIP1是一个胁迫响应的转录激活因子 | 第80页 |
3.2 非生物胁迫诱导的ZFIP1编码RING环型E3泛素连接酶 | 第80-81页 |
3.3 ZFIP1负调控水稻对冷胁迫的耐性 | 第81-82页 |
3.4 ZFIP1参与对水稻的冷和氧化胁迫响应过程调控 | 第82-84页 |
第三章 水稻E3泛素连接酶基因ZFRG1的功能分析 | 第84-112页 |
1 材料和方法 | 第85-92页 |
1.1 植物材料及处理 | 第85页 |
1.2 菌株、质粒和试剂盒 | 第85页 |
1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第85页 |
1.4 Quantitative Real-time PCR分析 | 第85页 |
1.5 亚细胞定位分析 | 第85页 |
1.6 水稻转基因植株的获得及鉴定 | 第85-87页 |
1.7 转基因水稻的耐逆性分析 | 第87-88页 |
1.8 酵母双杂交方法筛选互作蛋白 | 第88-90页 |
1.9 ZFRG1的原核表达分析 | 第90-91页 |
1.10 ZFRG1的E3泛素连接酶活性分析 | 第91页 |
1.11 GST Pull-Down体外分析蛋白互作 | 第91页 |
1.12 Western blot验证Pull-Down捕获的互作蛋白 | 第91-92页 |
2 结果和分析 | 第92-109页 |
2.1 ZFRG1在水稻中的表达特性 | 第92-93页 |
2.2 ZFRG1的亚细胞定位分析 | 第93-95页 |
2.3 ZFRG1的体外E3泛素连接酶活性分析 | 第95-96页 |
2.4 ZFRG1互作蛋白的筛选 | 第96-100页 |
2.5 ZFRG1与NAC2互作特性分析 | 第100-103页 |
2.6 ZFRG1转基因水稻植株的阳性检测 | 第103-105页 |
2.7 ZFRG1转基因水稻耐逆性鉴定 | 第105-108页 |
2.8 ZFRG1与ZFP252的互作分析 | 第108-109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
3.1 非生物胁迫诱导的ZFRG1基因编码RING E3泛素连接酶 | 第109-110页 |
3.2 ZFRG1负调控水稻对干旱的耐性 | 第110-111页 |
3.3 ZFRG1与NAC2之间的互作 | 第111-112页 |
全文结论 | 第112-114页 |
全文创新点 | 第114-116页 |
参考文献 | 第116-130页 |
附录Ⅰ 载体图谱 | 第130-134页 |
附录Ⅱ 主要培养基及化学试剂配方 | 第134-140页 |
致谢 | 第140页 |