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两个E3泛素连接酶基因在水稻耐非生物逆境胁迫中的作用研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略词及英汉对照表第12-14页
第一章 文献综述第14-38页
    1 植物非生物胁迫第14-17页
        1.1 植物对非生物胁迫的响应机制第14-15页
        1.2 植物非生物胁迫的信号调控模式第15-17页
    2 泛素蛋白酶体途径与植物非生物胁迫响应第17-36页
        2.1 泛素蛋白酶体途径第17-23页
        2.2 UPS在植物响应非生物胁迫中的功能第23-36页
    3 小结第36-38页
第二章 水稻E3泛素连接酶基因ZFIP1的功能分析第38-84页
    1 材料与方法第39-52页
        1.1 植物材料及处理第39-40页
        1.2 菌株、质粒和试剂盒第40页
        1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成第40页
        1.4 实时定量PCR分析第40页
        1.5 GUS组织化学染色第40-41页
        1.6 序列分析第41页
        1.7 亚细胞定位分析第41-42页
        1.8 酵母菌感受态制备和少量转化第42-43页
        1.9 酵母转录自激活实验第43页
        1.10 原生质体瞬时转录激活检测分析第43页
        1.11 体外泛素化活性分析第43-47页
        1.12 水稻转基因植株的获得及鉴定第47-49页
        1.13 转基因水稻的耐逆性鉴定第49页
        1.14 脯氨酸含量测定第49-50页
        1.15 抗氧化酶活性测定第50页
        1.16 原位组织化学定位O_2~-和H_2O_2第50页
        1.17 烟草注射实验第50-51页
        1.18 ZFIP1过表达转基因和野生型水稻幼苗冷处理前后的芯片分析第51-52页
    2 结果和分析第52-80页
        2.1 水稻ZFIP1的分子生物学鉴定第52-60页
        2.2 水稻ZFIP1的生物学功能分析第60-74页
        2.3 基因芯片结果分析第74-80页
    3 讨论第80-84页
        3.1 ZFIP1是一个胁迫响应的转录激活因子第80页
        3.2 非生物胁迫诱导的ZFIP1编码RING环型E3泛素连接酶第80-81页
        3.3 ZFIP1负调控水稻对冷胁迫的耐性第81-82页
        3.4 ZFIP1参与对水稻的冷和氧化胁迫响应过程调控第82-84页
第三章 水稻E3泛素连接酶基因ZFRG1的功能分析第84-112页
    1 材料和方法第85-92页
        1.1 植物材料及处理第85页
        1.2 菌株、质粒和试剂盒第85页
        1.3 总RNA的提取及cDNA第一链的合成第85页
        1.4 Quantitative Real-time PCR分析第85页
        1.5 亚细胞定位分析第85页
        1.6 水稻转基因植株的获得及鉴定第85-87页
        1.7 转基因水稻的耐逆性分析第87-88页
        1.8 酵母双杂交方法筛选互作蛋白第88-90页
        1.9 ZFRG1的原核表达分析第90-91页
        1.10 ZFRG1的E3泛素连接酶活性分析第91页
        1.11 GST Pull-Down体外分析蛋白互作第91页
        1.12 Western blot验证Pull-Down捕获的互作蛋白第91-92页
    2 结果和分析第92-109页
        2.1 ZFRG1在水稻中的表达特性第92-93页
        2.2 ZFRG1的亚细胞定位分析第93-95页
        2.3 ZFRG1的体外E3泛素连接酶活性分析第95-96页
        2.4 ZFRG1互作蛋白的筛选第96-100页
        2.5 ZFRG1与NAC2互作特性分析第100-103页
        2.6 ZFRG1转基因水稻植株的阳性检测第103-105页
        2.7 ZFRG1转基因水稻耐逆性鉴定第105-108页
        2.8 ZFRG1与ZFP252的互作分析第108-109页
    3 讨论第109-112页
        3.1 非生物胁迫诱导的ZFRG1基因编码RING E3泛素连接酶第109-110页
        3.2 ZFRG1负调控水稻对干旱的耐性第110-111页
        3.3 ZFRG1与NAC2之间的互作第111-112页
全文结论第112-114页
全文创新点第114-116页
参考文献第116-130页
附录Ⅰ 载体图谱第130-134页
附录Ⅱ 主要培养基及化学试剂配方第134-140页
致谢第140页

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