| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言及文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 果蝇研究概述 | 第10-11页 |
| 1.2 果蝇血液发育简介 | 第11-18页 |
| 1.2.1 果蝇血细胞结构和功能特征 | 第12页 |
| 1.2.2 果蝇的造血场所 | 第12-14页 |
| 1.2.3 影响血液发育的关键基因 | 第14-15页 |
| 1.2.4 影响血细胞生成的重要途径 | 第15-18页 |
| 1.3 转基因果蝇概述 | 第18-23页 |
| 1.3.1 构建转座载体 | 第19页 |
| 1.3.2 显微注射 | 第19页 |
| 1.3.3 转基因果蝇的筛选 | 第19-21页 |
| 1.3.4 转基因果蝇体内靶基因的激活 | 第21-23页 |
| 1.4 本课题的研究意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第25页 |
| 2.1.2 酶类和试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.1.4 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.6 果蝇品系 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.2 反转录 | 第28-29页 |
| 2.2.3 PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.4 PCR产物的纯化回收 | 第29-30页 |
| 2.2.5 感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 2.2.6 PCR产物与T-载体的连接 | 第30-31页 |
| 2.2.7 转化(热休克法) | 第31页 |
| 2.2.8 质粒的提取 | 第31页 |
| 2.2.9 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.10 多克隆抗体的制备 | 第32页 |
| 2.2.11 Western-blot技术 | 第32-37页 |
| 3、结果 | 第37-48页 |
| 3.1 CG8419转基因果蝇品系的建立 | 第37页 |
| 3.2 CG8419转基因果蝇纯合子的建立以及染色体定位 | 第37-38页 |
| 3.3 CG8419转基因果蝇蛋白表达检测 | 第38-40页 |
| 3.4 转基因果蝇血细胞表型观察 | 第40-42页 |
| 3.5 果蝇血液标记基因mrj多克隆抗体的制备 | 第42-45页 |
| 3.5.1 mrj基因克隆至表达载体 | 第42-43页 |
| 3.5.2 mrj融合蛋白诱导表达及纯化 | 第43页 |
| 3.5.3 mrj融合蛋白的表达及纯化 | 第43-44页 |
| 3.5.4 mrj多克隆抗体Western Blot鉴定 | 第44页 |
| 3.5.5 mrj在转基因果蝇及各突变品系中的表达 | 第44-45页 |
| 3.6 其他工作—果蝇心脏标记基因Hand多克隆抗体的制备 | 第45-48页 |
| 3.6.1 Hand基因克隆至表达载体 | 第45页 |
| 3.6.2 Hand融合蛋白诱导表达及纯化 | 第45-46页 |
| 3.6.3 Hand多克隆抗体的Western blotting的鉴定 | 第46-48页 |
| 4 结论 | 第48-49页 |
| 5 讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
