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斑马鱼心脏发育候选基因HPRG1突变表型分析

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
1 引言和文献综述第9-22页
    1.1 斑马鱼胚胎及心脏的发育图式第9-14页
        1.1.1 斑马鱼模式生物简述第9-10页
        1.1.2 斑马鱼胚胎发育阶段第10-13页
        1.1.3 斑马鱼胚胎发育原基命运第13-14页
    1.2 斑马鱼胚胎的心脂发育第14-19页
        1.2.1 斑马鱼胚胎的心脏发育图式第15-16页
        1.2.2 心内膜细胞的分化第16-18页
        1.2.3 心脏瓣膜的建成第18-19页
    1.3 Morpholinos在斑马鱼研究中的应用第19-20页
    1.4 本文研究的意义第20-22页
2 材料和方法第22-36页
    2.1 材料第22-25页
        2.1.1 酶类和试剂盒第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22-23页
        2.1.3 其它试剂第23页
        2.1.4 主要实验仪器和耗材第23-24页
        2.1.5 生物信息学软件第24-25页
    2.2 方法第25-36页
3 实验结果及其分析第36-55页
    3.1 HPRG1在原核细胞中的表达及多克隆抗体的制备第36-38页
    3.2 利用morpholino技术沉默HPRG1后斑马鱼的表型分析第38-42页
        3.2.1 HPRG1蛋白表达后心脏出现不能正常环化、心律减慢、围心腔变大等表型第38-42页
    3.3 利用morpholino技术沉默HPRG1蛋白表达后分析HPRG1在斑马鱼心脏中的功能第42-45页
        3.3.1 利用心脏剥离技术研究HPRG1在斑马鱼胚胎心脏中的功能第42-43页
        3.3.2 沉默HPRG1蛋白将引起心脏瓣膜的缺陷第43-45页
            3.3.2.1 利用切片技术HE染色研究心脏的突变表型第43页
            3.3.2.2 斑马鱼心脏切片免疫组化研究HPRG1参与瓣膜发育第43-45页
    3.4 HPRG1通过调控斑马鱼心脏标志基因Nkx2.5、isl1、gata4、MF20、S46等的表达从而参与心脏的调控第45-48页
    3.5 HPRG1在斑马鱼胚胎发育的早期表达,并在斑马鱼心脏前体细胞行驶功能第48-52页
    3.6 质粒的构建第52-55页
4 讨论第55-57页
结语第57-58页
参考文献第58-62页
附录1第62-64页
附录2第64-65页
致谢第65-66页

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