摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
符号说明 | 第10-13页 |
第1章 引言 | 第13-19页 |
1.1 NAFLD简述 | 第13-14页 |
1.2 脂质代谢与NAD+代谢通路的关系 | 第14-15页 |
1.3 NAMPT与细胞NAD+水平的调节 | 第15-16页 |
1.4 NAMPT与SIRT1/SREBP1/AMPKα 信号通路的相互作用 | 第16-19页 |
1.4.1 Sirt1信号通路 | 第16-17页 |
1.4.2 SREBP1信号通路 | 第17-18页 |
1.4.3 SREBP1与AMPKα 之间信号通路 | 第18-19页 |
第2章 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 仪器设备与试剂 | 第19-23页 |
2.1.1 实验仪器设备 | 第19-20页 |
2.1.2 实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 实验试剂配制 | 第21-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-34页 |
2.2.1 细胞培养及油酸模型的建立 | 第23-25页 |
2.2.2 动物高脂模型的建立及实验分组 | 第25页 |
2.2.3 蛋白印记实验 | 第25-27页 |
2.2.4 定量PCR(Q-PCR) | 第27-30页 |
2.2.5 油红染色 | 第30-31页 |
2.2.6 肝脏组织HE染色 | 第31页 |
2.2.7 细胞中甘油三酯(TG)含量测定 | 第31-32页 |
2.2.8 胞浆胞核蛋白分离 | 第32页 |
2.2.9 质粒小量提取 | 第32-33页 |
2.2.10 Lipofectamine3000转染 | 第33页 |
2.2.11 统计学分析 | 第33-34页 |
第3章 实验结果 | 第34-54页 |
3.1 抑制NAMPT增加高脂饮食喂养的小鼠肝脏脂质积累 | 第34-37页 |
3.1.1 NAMPT在高脂饮食喂养小鼠肝脏中低表达 | 第34-35页 |
3.1.2 NAMPT抑制剂FK866对高脂饮食条件下肝脏脂质合成的影响 | 第35-37页 |
3.2 抑制NAMPT增加HepG2细胞脂质合成 | 第37-43页 |
3.2.1 HepG2细胞上最佳油酸模型的建立 | 第37-38页 |
3.2.2 确定HepG2细胞上NAMPT抑制剂FK866最适给药浓度 | 第38-40页 |
3.2.3 NAMPT抑制剂FK866增加脂质合成,NAD+及NMN对其有恢复作用 | 第40-43页 |
3.3 过表达NAMPT减少HepG2细胞中油酸诱导的脂质积累 | 第43-47页 |
3.3.1 确定NAMPT质粒顺利转染到HepG2细胞 | 第43-44页 |
3.3.2 过表达NAMPT对HepG2细胞中脂质积累的影响 | 第44-47页 |
3.4 过表达NAMPT减少Hep1-6 细胞中油酸诱导的脂质积累 | 第47-49页 |
3.4.1 确定NAMPT质粒顺利转染到Hep1-6 细胞 | 第47-48页 |
3.4.2 过表达NAMPT对Hep1-6 细胞中脂质积累的影响 | 第48-49页 |
3.5 NAMPT抑制通过Sirt1/ SREBP1/AMPKα 信号通路影响肝脏脂质积累 | 第49-52页 |
3.5.1 NAMPT 抑制剂 FK866 对体内 Sirt1/AMPKα 信号通路的影响 | 第49-50页 |
3.5.2 NAMPT抑制剂FK866对肝细胞胰岛素信号通路的作用 | 第50-51页 |
3.5.3 NAMPT抑制剂FK866通过Sirt1影响肝脂质合成 | 第51-52页 |
3.6 结论 | 第52-54页 |
第4章 讨论 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第63-64页 |
综述 | 第64-70页 |
参考文献 | 第67-70页 |