| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| 1.1 黄萎病与黄萎病菌的概述 | 第11-12页 |
| 1.2 植物免疫反应 | 第12-17页 |
| 1.2.1 先天性植物免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.2.2 依赖于R基因的免疫反应 | 第13-14页 |
| 1.2.3 激素信号路径介导的抗病反应 | 第14-15页 |
| 1.2.4 依赖于钙离子的蛋白激酶在植物免疫系统中的作用 | 第15-17页 |
| 1.3 植物启动子的研究现状 | 第17-19页 |
| 1.3.1 启动子的分类 | 第17-18页 |
| 1.3.2 组织特异型启动子的应用及研究现状 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料方法 | 第20-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 基因来源 | 第20页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.3 主要菌株和载体 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要酶类和试剂 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 根中优势表达启动子和GhCPK33的序列分析 | 第21页 |
| 2.2.2 GhCPK33表达模式分析 | 第21-22页 |
| 2.2.3 棉花根系RNA的提取及浓度测定 | 第22页 |
| 2.2.4 反转录总RNA合成cDNA | 第22页 |
| 2.2.5 RT-PCR和qRT-PCR分析 | 第22-23页 |
| 2.2.6 启动子连接GUS报告基因的载体构建 | 第23-25页 |
| 2.2.7 VIGS载体构建 | 第25-26页 |
| 2.2.8 棉花幼苗培育 | 第26页 |
| 2.2.9 棉花幼苗的VIGS处理 | 第26-27页 |
| 2.2.10 激素含量测定 | 第27页 |
| 2.2.11 棉花黄萎病病原菌的活化及培养 | 第27-28页 |
| 2.2.12 棉花黄萎病菌的接种 | 第28页 |
| 2.2.13 棉花幼苗接种黄萎病菌后发病率及病指统计 | 第28页 |
| 2.2.14 接菌后对棉株剖秆观察及茎段恢复培养及菌量检测 | 第28-29页 |
| 2.2.15 GhCPK33表达被抑制后的对灰霉菌的抗性鉴定 | 第29页 |
| 2.2.16 转基因拟南芥及转基因鉴定 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-39页 |
| 3.1 根中优势表达启动子的结果 | 第30-33页 |
| 3.1.1 根中优势表达启动子的来源 | 第30-31页 |
| 3.1.2 根中优势表达基因在棉花各个组织中RT-PCR结果 | 第31页 |
| 3.1.3 根中优势表达基因的启动子（Gbscaffold12396.4P和Gbscaffold4369.10P）的克隆及结构特点 | 第31-33页 |
| 3.2 GhCPK33在棉花抗黄萎病方面的功能研究 | 第33-39页 |
| 3.2.1 GhCPK33的基因来源 | 第33-34页 |
| 3.2.2 GhCPK33的结构特点及进化树的构建 | 第34页 |
| 3.2.3 GhCPK33的表达模式分析 | 第34-35页 |
| 3.2.4 激素处理后GhCPK33的表达模式 | 第35-36页 |
| 3.2.5 VIGS沉默目标基因后海岛棉棉株表型 | 第36-39页 |
| 4 讨论与结论 | 第39-42页 |
| 4.1 根中优势表达启动子的选择 | 第39-40页 |
| 4.2 GhCPK33在棉花抗黄萎病菌中的作用 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录 | 第48-54页 |
| 附录A．主要缓冲液的配制 | 第48页 |
| 附录B．培养基配方 | 第48-49页 |
| 附录C．棉花基因组DNA抽提方法 | 第49-50页 |
| 附录D．棉花基因组RNA抽提方法(异硫氰酸胍法) | 第50-51页 |
| 附录E. 拟南芥遗传转化的步骤 | 第51页 |
| 附录F．拟南芥种植步骤 | 第51-52页 |
| 附录G．实验中用到的引物序列 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
