摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-21页 |
1.1 问题的由来 | 第13页 |
1.2 国内外研究综述 | 第13-20页 |
1.2.1 叶色突变的类型 | 第14-15页 |
1.2.2 生理生化特性 | 第15-17页 |
1.2.3 叶色突变机理 | 第17-19页 |
1.2.4 叶色突变的应用 | 第19-20页 |
1.3 选题的目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料及技术路线 | 第21-22页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 技术路线 | 第21页 |
2.1.3 实验材料的种植及处理 | 第21-22页 |
2.1.4 实验材料的采集 | 第22页 |
2.2 遗传分析 | 第22页 |
2.3 水稻花粉的育性鉴定 | 第22页 |
2.4 生理生化指标测定 | 第22-24页 |
2.4.1 色素含量及叶绿素荧光测定 | 第22-23页 |
2.4.2 叶绿体超微结构观察 | 第23页 |
2.4.3 抗氧化酶活性测定 | 第23-24页 |
2.5 Illummina测序分析 | 第24-25页 |
2.6 双向电泳(2-DE)及质谱分析 | 第25-30页 |
2.6.1 水稻叶片蛋白样品制备 | 第25页 |
2.6.2 蛋白质样品预处理 | 第25-26页 |
2.6.3 蛋白质含量测定 | 第26页 |
2.6.4 第一向等点聚焦(IEF) | 第26-27页 |
2.6.5 第二向SDS-PAGE垂直板电泳 | 第27页 |
2.6.6 蛋白凝胶染色 | 第27-28页 |
2.6.7 凝胶扫描与图像分析 | 第28页 |
2.6.8 蛋白点的脱色与胶内酶解 | 第28-29页 |
2.6.9 MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析 | 第29页 |
2.6.10 差异表达蛋白的生物信息学分析 | 第29-30页 |
2.7 Western Blot | 第30-31页 |
2.7.1 人工合成多肽 | 第30页 |
2.7.2 蛋白样品制备 | 第30页 |
2.7.3 SDS-PAGE | 第30-31页 |
2.7.4 蛋白免疫印迹分析 | 第31页 |
2.8 荧光定量PCR(qPCR) | 第31-35页 |
2.8.1 总RNA的提取 | 第31-32页 |
2.8.2 DNaseⅠ处理及RNA质量检测 | 第32-33页 |
2.8.3 反转录及产物的PCR检测 | 第33-34页 |
2.8.4 引物设计及q PCR分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-54页 |
3.1 突变体表型 | 第35-36页 |
3.2 遗传分析 | 第36-37页 |
3.3 后代材料选育 | 第37页 |
3.4 生理指标测定 | 第37-40页 |
3.4.1 色素含量及叶绿素荧光 | 第37-39页 |
3.4.2 叶绿体超微结构 | 第39-40页 |
3.4.3 抗氧化酶活性比较分析 | 第40页 |
3.5 Illummina测序分析 | 第40-44页 |
3.5.1 Illumina测序和参考基因组对照 | 第41-43页 |
3.5.2 差异表达基因筛选 | 第43页 |
3.5.3 DEGs功能分类 | 第43-44页 |
3.6 差异表达基因qPCR分析 | 第44-47页 |
3.6.1 RNA质量及反转录检测 | 第45-46页 |
3.6.2 基因表达相对定量分析 | 第46-47页 |
3.7 双向电泳图像分析及差异蛋白点的质谱鉴定 | 第47-54页 |
3.7.1 凝胶图像分析 | 第47-51页 |
3.7.2 Western Blot验证 2-DE实验结果 | 第51-52页 |
3.7.3 差异表达蛋白qPCR分析 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-60页 |
4.1 斑马叶表型与移栽之间的关系 | 第54-55页 |
4.1.2 斑马叶表型与温度之间的关系 | 第54-55页 |
4.2 斑马叶表型对光合相关指标的影响 | 第55-56页 |
4.2.1 叶绿体超微结构变化 | 第55页 |
4.2.2 光合能力的下降 | 第55-56页 |
4.2.3 抗氧化酶活与斑马叶形成之间关系 | 第56页 |
4.3 斑马叶突变叶片转录组差异分析 | 第56-57页 |
4.4 斑马叶叶片蛋白质双向分析 | 第57-58页 |
4.5 斑马叶标记性状的应用价值 | 第58-59页 |
4.6 斑马叶的形成 | 第59页 |
4.7 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
致谢 | 第67页 |