| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.1 植物抗病研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1.1 棉花黄萎病及其危害 | 第11页 |
| 1.1.2 棉花黄萎病的防治途径 | 第11-13页 |
| 1.1.3 植物免疫系统 | 第13-14页 |
| 1.1.4 依赖R基因的信号传导路径 | 第14-15页 |
| 1.1.5 植物免疫系统中的激素信号路径 | 第15-16页 |
| 1.2 棉花黄萎病的抗病机制研究 | 第16-18页 |
| 1.2.1 棉花对黄萎病的组织结构抗性 | 第16-17页 |
| 1.2.2 棉花对黄萎病的生理生化抗性 | 第17页 |
| 1.2.3 Ve1介导的抗性 | 第17-18页 |
| 1.3 WAK家族的简介 | 第18-21页 |
| 1.3.1 WAK和WAKL的发现 | 第18页 |
| 1.3.2 WAK的结构特点及分类 | 第18-19页 |
| 1.3.3 WAK的表达模式 | 第19页 |
| 1.3.4 WAK的生物学功能 | 第19-20页 |
| 1.3.5 WAK的作用机制 | 第20-21页 |
| 1.4 本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料方法 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要菌株和载体 | 第22页 |
| 2.1.3 主要酶类和试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 GbWAK3的克隆及序列分析 | 第23页 |
| 2.2.2 GbWAK3表达模式分析 | 第23页 |
| 2.2.3 棉花根系RNA的提取及浓度测定 | 第23-24页 |
| 2.2.4 反转录总RNA合成cDNA | 第24页 |
| 2.2.5 VIGS载体构建 | 第24-25页 |
| 2.2.6 棉花幼苗培育 | 第25-26页 |
| 2.2.7 棉花幼苗的VIGS处理 | 第26页 |
| 2.2.8 激素含量测定 | 第26-27页 |
| 2.2.9 棉花黄萎病病原菌的活化及培养 | 第27页 |
| 2.2.10 棉花黄萎病菌的接种 | 第27-28页 |
| 2.2.11 棉花幼苗接菌后发病率及病指统计 | 第28页 |
| 2.2.12 接菌后对棉株剖秆观察及茎段恢复培养 | 第28页 |
| 2.2.13 棉花及拟南芥总木质素含量的测定 | 第28-30页 |
| 2.2.14 棉花茎木质素组织化学染色 | 第30页 |
| 2.2.15 棉花、拟南芥木质素合成相关基因、病程相关基因转录分析 | 第30-31页 |
| 2.2.16 棉花幼苗病原菌接种处理和激素处理 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-45页 |
| 3.1 类受体蛋白激酶GbWAK在棉花中的序列分析 | 第32页 |
| 3.2 GbWAK3在不同物种中的进化分析 | 第32-33页 |
| 3.3 GbWAK3表达模式分析 | 第33-35页 |
| 3.3.1 GbWAK3在海岛棉不同组织中的表达分析 | 第33-34页 |
| 3.3.2 棉花WAK3同源基因组织表达模式及受黄萎病诱导表达模式分析 | 第34页 |
| 3.3.3 相关激素诱导后GbWAK3的表达模式分析 | 第34-35页 |
| 3.4 抑制GbWAK3表达后降低棉花对黄萎病菌的抗性 | 第35-37页 |
| 3.5 抑制GbWAK3表达接种黄萎病菌后激素信号路径的检测 | 第37-38页 |
| 3.6 抑制GbWAK3表达后棉花植株中激素含量检测 | 第38-39页 |
| 3.7 GbWAK抑制表达植株中木质素含量的定性分析 | 第39-40页 |
| 3.8 抑制GbWAK3表达后棉花木质素含量测定 | 第40-41页 |
| 3.9 抑制GbWAK3表达后木质素合成相关基因的表达量检测 | 第41页 |
| 3.10 拟南芥wak3突变体对黄萎病菌抗性 | 第41-42页 |
| 3.11 拟南芥JA相关基因表达量分析 | 第42-43页 |
| 3.12 拟南芥中木质素合成相关基因的表达量分析 | 第43页 |
| 3.13 拟南芥wak3突变体木质素含量测定 | 第43-44页 |
| 3.14 GbWAK3抑制表达后棉株对灰霉的抗性研究 | 第44-45页 |
| 4 讨论与结论 | 第45-48页 |
| 4.1 GbWAK3通过感知细胞壁结构变化参与对病原菌抗性的调控 | 第45-46页 |
| 4.2 GbWAK3通过JA信号途径调控其对病原菌的抗性 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 附录 | 第57-63页 |
| 附录A．主要缓冲液的配制 | 第57-58页 |
| 附录B．培养基配方 | 第58-59页 |
| 附录C．棉花基因组DNA抽提方法 | 第59-60页 |
| 附录D．棉花基因组RNA抽提方法（异硫氰酸胍法） | 第60-61页 |
| 附录E．实验中用到的引物序列 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
