| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| ·鸡胚胎的发育 | 第10-11页 |
| ·禽类胚胎的培养 | 第11-12页 |
| ·开窗术 | 第12页 |
| ·代用蛋壳培养体系 | 第12页 |
| ·制备转基因鸡的方法 | 第12-15页 |
| ·DNA 显微注射 | 第12-13页 |
| ·胚胎干细胞法 | 第13页 |
| ·原始生殖细胞PGCs 法 | 第13-14页 |
| ·利用逆转录病毒载体法 | 第14-15页 |
| ·转基因鸡的应用 | 第15-18页 |
| ·利用转基因鸡做生物反应器 | 第15-17页 |
| ·在发育生物学中的应用 | 第17页 |
| ·抗病育种 | 第17-18页 |
| ·利用慢病毒载体制备转基因鸡的研究现状 | 第18页 |
| ·本研究的目的、意义和主要内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·材料 | 第19-23页 |
| ·病毒和细胞系 | 第19-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要设备 | 第21-22页 |
| ·PCR 引物合成 | 第22页 |
| ·分析工具软件 | 第22页 |
| ·试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-36页 |
| ·筛选不同鸡场来源的种蛋 | 第23页 |
| ·鸡胚胎开窗术培养 | 第23-24页 |
| ·制备显微注射针 | 第24-26页 |
| ·显微注射机械损伤对胚胎存活率影响研究 | 第26页 |
| ·293FT 细胞的复苏,传代和冻存 | 第26-27页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第27-28页 |
| ·向胚下腔中注射慢病毒悬液 | 第28页 |
| ·原代鸡的饲养与疾病免疫 | 第28-29页 |
| ·鸡血基因组提取 | 第29-30页 |
| ·鸡血基因组DNA 的 OD 值测定 | 第30页 |
| ·鸡血基因组DNA 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30-31页 |
| ·原代鸡血液基因组PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·公鸡精液基因组 DNA 的提取与琼脂糖检测 | 第32-33页 |
| ·鸡精液基因组DNA 的OD 值测定,琼脂糖凝胶电泳检测及 PCR 扩增 | 第33页 |
| ·PCR 产物的回收与克隆 | 第33-35页 |
| ·序列测定与分析 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-44页 |
| ·不同鸡场来源种蛋的孵化率 | 第36页 |
| ·不同封口方式的孵化率 | 第36-37页 |
| ·显微注射机械损伤对种蛋孵化率的研究 | 第37页 |
| ·慢病毒悬液滴度的荧光照片 | 第37-39页 |
| ·病毒滴度的计算结果 | 第39页 |
| ·转基因原代鸡的制备 | 第39页 |
| ·原代阳性鸡部分组织的荧光图像 | 第39-40页 |
| ·转基因原代鸡血液基因组 DNA 检测 | 第40-41页 |
| ·转基因原代鸡血液基因 DNA 的 PCR 扩增 | 第41-42页 |
| ·精液基因组DNA 提取结果 | 第42-43页 |
| ·精液基因组DNA 的PCR 扩增 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| ·种蛋质量成功制备转基因鸡的影响 | 第44页 |
| ·不同封口方式对种蛋孵化率的影响 | 第44页 |
| ·显微注射对孵化率的影响 | 第44页 |
| ·利用病毒载体成功制备转基因鸡的关键因素 | 第44-45页 |
| ·影响注射病毒载体种蛋的孵化率 | 第45页 |
| ·原代鸡的嵌合率及性腺整合率 | 第45页 |
| ·下一步的研究工作 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 在读期间发表的论文 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |