| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·卵丘细胞对卵母细胞发育能力的影响 | 第11-12页 |
| ·组织蛋白酶调控细胞发育的作用 | 第12-13页 |
| ·组织蛋白酶的特性 | 第12页 |
| ·组织蛋白酶在凋亡过程中发挥的作用 | 第12页 |
| ·组织蛋白酶在胚胎发育中的作用 | 第12-13页 |
| ·成年动物与幼年动物卵母细胞间的结构性及功能性差异 | 第13-14页 |
| ·成熟促进因子（MPF）活性 | 第13页 |
| ·减数分裂能力 | 第13-14页 |
| ·基因表达与蛋白质合成 | 第14页 |
| ·卵母细胞体外成熟、体外受精及胚胎体外发育的研究 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞体外培养成熟研究概况 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞的体外受精 | 第15页 |
| ·胚胎的体外发育 | 第15页 |
| ·REAL-TIME PCR 技术进展 | 第15-17页 |
| ·REAL-TIME PCR 的概念 | 第15页 |
| ·REAL-TIME PCR 的原理 | 第15-17页 |
| ·CT 值的确定以及与起始模板拷贝数的关系 | 第17页 |
| ·拟解决的关键技术问题及应用前景 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-30页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·实验的主要仪器与设备 | 第19页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第19-20页 |
| ·主要操作液配方 | 第20页 |
| ·卵母细胞体外处理方法 | 第20-22页 |
| ·幼羔选择及超排方法 | 第20页 |
| ·成年绵羊卵巢的来源与运输 | 第20页 |
| ·卵母细胞收集及卵丘细胞的收集 | 第20-21页 |
| ·卵母细胞的体外成熟及评定 | 第21页 |
| ·卵母细胞核成熟状态的标准与评定 | 第21页 |
| ·卵母细胞核的荧光染色 | 第21-22页 |
| ·精子的制备 | 第22页 |
| ·体外受精 | 第22页 |
| ·胚胎的体外发育 | 第22页 |
| ·分子检测方法 | 第22-27页 |
| ·RNA 提取 | 第22-23页 |
| ·RNA 的反转录 | 第23-24页 |
| ·PCR 引物设计 | 第24页 |
| ·PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·REAL-TIME PCR 标准品的制备 | 第25-27页 |
| ·REAL-TIME PCR | 第27页 |
| ·实验设计 | 第27-29页 |
| ·REAL-TIME PCR 标准品的检测 | 第27-28页 |
| ·组织蛋白酶（CTSB、CTSS）MRNA 在成年绵羊和羔绵羊卵丘细胞中的表达规律及差异 | 第28页 |
| ·成熟液中添加E-64 对卵丘母细胞体外成熟24H后CTSB、CTSS MRNA 表达的影响 | 第28页 |
| ·羔绵羊和成年绵羊卵母细胞体外培养不同时间的核状态 | 第28页 |
| ·成熟液中添加E-64 对不同成熟时间的卵丘细胞扩散变化的影响 | 第28页 |
| ·成熟液中添加不同浓度E-64 对成年绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第28-29页 |
| ·成熟液中添加不同浓度 E-64 对成年绵羊卵母细胞体外受精及胚胎发育能力的影响 | 第29页 |
| ·成熟液中添加E-64 对羔绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精能力的影响 | 第29页 |
| ·统计分析 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-37页 |
| ·REAL-TIME PCR 标准品的检测 | 第30-32页 |
| ·组织蛋白酶（CTSB、CTSS）MRNA 在卵丘细胞中的表达规律 | 第32页 |
| ·成熟液中添加E-64 对卵丘母细胞体外成熟24H 后CTSB、CTSS MRNA 表达的影响 | 第32-33页 |
| ·羔绵羊和成年绵羊卵母细胞体外培养不同时间的核状态 | 第33-34页 |
| ·成熟液中添加E-64 对不同成熟时间的卵丘细胞扩散变化的影响 | 第34-35页 |
| ·成熟液中添加不同浓度E-64 对成年绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第35页 |
| ·成熟液中添加不同浓度E-64 对成年绵羊卵母细胞体外受精及胚胎发育能力的影响 | 第35-36页 |
| ·成熟液中添加E-64 对羔绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精能力的影响 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·REAL-TIME PCR 标准品的检测 | 第37页 |
| ·组织蛋白酶（CTSB、CTSS）MRNA 在成年绵羊和羔绵羊卵丘细胞中的表达规律及差异. | 第37页 |
| ·成熟液中添加E-64 对卵丘母细胞体外成熟24H 后CTSB、CTSS MRNA 表达的影响 | 第37-38页 |
| ·羔绵羊和成年绵羊卵母细胞体外培养不同时间的核状态 | 第38页 |
| ·成熟液中添加E-64 对不同成熟时间的卵丘细胞扩散变化的影响 | 第38-39页 |
| ·成熟液中添加不同浓度E-64 对成年绵羊卵母细胞体外成熟的影响 | 第39页 |
| ·成熟液中添加不同浓度E-64 对成年绵羊卵母细胞体外受精及胚胎发育能力的影响 | 第39页 |
| ·成熟液中添加E-64 对羔绵羊卵母细胞体外成熟和体外受精能力的影响 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附图 | 第46-48页 |
| 在读期间发表学术论文 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
