| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 转基因动物国内外研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2 MYF6基因 | 第13页 |
| 1.3 FAT-1 基因 | 第13-14页 |
| 1.4 外源基因整合位点的检测技术 | 第14-19页 |
| 1.4.1 荧光原位杂交 | 第14-15页 |
| 1.4.2 个体基因组文库筛选法 | 第15页 |
| 1.4.3 反向PCR | 第15页 |
| 1.4.4 接头PCR | 第15-16页 |
| 1.4.5 锚定PCR | 第16-17页 |
| 1.4.6 随机引物PCR | 第17-19页 |
| 1.5 基因组测序技术 | 第19-22页 |
| 1.5.1 第一代测序技术 | 第19页 |
| 1.5.2 第二代测序技术 | 第19-21页 |
| 1.5.3 第三代测序技术 | 第21-22页 |
| 1.6 荧光定量PCR技术 | 第22-23页 |
| 1.7 本试验研究的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-38页 |
| 2.1 材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第25页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 分析软件 | 第26页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-38页 |
| 2.2.1 外源基因整合位点的检测 | 第26-35页 |
| 2.2.2 整合位点附近宿主基因表达量检测 | 第35-37页 |
| 2.2.3 数据分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.1 外源基因整合位点检测结果 | 第38-53页 |
| 3.1.1 整合过程中重组质粒连接情况 | 第38页 |
| 3.1.2 整合过程中同源重组情况 | 第38-41页 |
| 3.1.3 整合过程中重组质粒断裂情况 | 第41-42页 |
| 3.1.4 在重组质粒酶切位点下游设计特异性引物扩增结果 | 第42-44页 |
| 3.1.5 非特异性扩增的情况 | 第44-46页 |
| 3.1.6 扩增到宿主染色体、未知片段及重组质粒序列的情况 | 第46-48页 |
| 3.1.7 只扩增到重组质粒及未知序列的情况 | 第48页 |
| 3.1.8 只扩增到重组质粒序列的情况 | 第48-50页 |
| 3.1.9 只扩增到未知序列的情况 | 第50页 |
| 3.1.10 造成宿主基因组断裂的情况 | 第50-53页 |
| 3.2 荧光定量PCR检测IMMP2L表达结果 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-61页 |
| 4.1 检测方法的调整 | 第55页 |
| 4.2 外源基因整合位点检测 | 第55-59页 |
| 4.2.1 整合过程中重组质粒的连接 | 第55-56页 |
| 4.2.2 整合过程中发生的同源重组 | 第56页 |
| 4.2.3 整合过程中重组质粒的断裂 | 第56页 |
| 4.2.4 在重组质粒酶切位点下游设计特异性引物扩增 | 第56-57页 |
| 4.2.5 非特异性扩增 | 第57页 |
| 4.2.6 扩增到宿主染色体、未知片段及重组质粒序列 | 第57页 |
| 4.2.7 只扩增到重组质粒和未知序列 | 第57-58页 |
| 4.2.8 只扩增到重组质粒序列 | 第58页 |
| 4.2.9 只扩增到未知序列 | 第58页 |
| 4.2.10 宿主基因组的断裂 | 第58-59页 |
| 4.3 对整合位点检测的认识 | 第59-60页 |
| 4.4 荧光定量PCR检测IMMP2L表达研究 | 第60-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第69页 |
