| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-36页 |
| 1.1 小鼠附植前胚胎发育 | 第8-10页 |
| 1.2 小鼠胚胎干细胞（Embryonic stem cells） | 第10-19页 |
| 1.2.1 胚胎干细胞的生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.2.2 胚胎干细胞系的建立 | 第12页 |
| 1.2.3 胚胎干细胞分离培养常规方式 | 第12-14页 |
| 1.2.4 维持胚胎干细胞自我复制的分子基础 | 第14-15页 |
| 1.2.5 影响ES细胞分离效率的方法 | 第15-16页 |
| 1.2.6 胚胎干细胞的鉴定 | 第16-18页 |
| 1.2.7 ES细胞的研究意义 | 第18-19页 |
| 1.3 重编程技术及诱导多能干细胞 | 第19-30页 |
| 1.3.1 重编程技术的发展 | 第19-23页 |
| 1.3.2 iPS （Induced Pluripotent Stem Cells）细胞技术的发展与应用 | 第23-29页 |
| 1.3.3 iPS细胞多能性的鉴定及研究 | 第29-30页 |
| 1.4 雌性多能干细胞的表观重编程机制 | 第30-33页 |
| 1.4.1 小鼠ES细胞X染色体调节 | 第31-33页 |
| 1.4.2 小鼠诱导多能干细胞X染色体调节 | 第33页 |
| 1.4.3 小鼠上胚层干细胞X染色体调节 | 第33页 |
| 1.5 课题的目的和意义 | 第33-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-53页 |
| 2.1 试验材料 | 第36-39页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第36页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第37-38页 |
| 2.1.4 主要溶液配制方法 | 第38-39页 |
| 2.2 试验方法 | 第39-53页 |
| 2.2.1 试验动物处理 | 第39-40页 |
| 2.2.2 小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）以及饲养层的制备 | 第40-41页 |
| 2.2.3 囊胚收集和胚胎的早期培养 | 第41页 |
| 2.2.4 小鼠ES/iPS细胞系的建立与培养 | 第41-43页 |
| 2.2.5 2-细胞胚胎收集及四倍体胚胎的制备 | 第43页 |
| 2.2.6 ES/iPS细胞与胚胎聚合 | 第43-44页 |
| 2.2.7 输卵管内胚胎移植 | 第44页 |
| 2.2.8 子宫内胚胎移植 | 第44页 |
| 2.2.9 荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization, FISH) | 第44-45页 |
| 2.2.10 RT-PCR | 第45-47页 |
| 2.2.11 甲基化检测 | 第47-49页 |
| 2.2.12 AKP染色 | 第49页 |
| 2.2.13 免疫组化染色 | 第49-50页 |
| 2.2.14 核型显带分析 | 第50-51页 |
| 2.2.15 All-iPSC小鼠鉴定 | 第51-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-66页 |
| 3.1 混合诱导XX、XY细胞造成性别比例失衡 | 第53-57页 |
| 3.1.1 试验思路的提出 | 第53-55页 |
| 3.1.2 iPS细胞的诱导过程 | 第55-56页 |
| 3.1.3 混合性别比例诱导试验结果 | 第56-57页 |
| 3.2 雌性iPS细胞具有和正常ES细胞完全一致的多能性 | 第57-64页 |
| 3.2.1 形态学鉴定 | 第57-59页 |
| 3.2.2 碱性磷酸酶活性(AKP) | 第59页 |
| 3.2.3 RT-PCR检测iPS细胞多能基因的表达 | 第59-60页 |
| 3.2.4 胚胎阶段特异性表面抗原(Stage Specific Embryonic Antigen，SSEA) | 第60-61页 |
| 3.2.5 多能因子启动子区域甲基化检测 | 第61-62页 |
| 3.2.6 体内分化试验 | 第62-63页 |
| 3.2.7 体外分化实验 | 第63页 |
| 3.2.8 嵌合体实验 | 第63-64页 |
| 3.3 通过四倍体胚胎补偿技术的金标准获得了雌性iPS小鼠 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 5 结论 | 第68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 作者简介 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
