英文缩略词表 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 小鼠精原干细胞的分离、纯化、培养及初步鉴定 | 第13-14页 |
材料与方法 | 第14-42页 |
1 材料 | 第14-17页 |
1.1 实验动物 | 第14页 |
1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
1.3 主要试剂与溶液 | 第15-17页 |
2 方法 | 第17-22页 |
2.1 mSSC的体外分离 | 第17-18页 |
2.2 MEF饲养层的制备 | 第18-21页 |
2.3 mSSC的形态学筛选及其在支持细胞上的培养 | 第21页 |
2.4 支持细胞饲养层的制备 | 第21-22页 |
3 mSSC的检测 | 第22-27页 |
3.1 mSSC的形态学及生长状况观察 | 第22页 |
3.2 mSSC的碱性磷酸酶染色(AKP) | 第22页 |
3.3 RT-PCR检测mSSC特异性基因及分化相关基因的表达 | 第22-26页 |
3.4 mSSC免疫荧光的检测 | 第26-27页 |
4 结果 | 第27-38页 |
4.1 饲养层细胞的制备 | 第27-28页 |
4.2 共培养法分离培养昆明小鼠来源的mSSC | 第28-29页 |
4.3 共培养法分离培养C57BL/6 小鼠(GFP转基因)品系来源的mSSC细胞 | 第29-31页 |
4.4 mSSC细胞的传代培养及形态学观察 | 第31-35页 |
4.5 碱性磷酸酶(AKP)染色鉴定mSSC细胞 | 第35-36页 |
4.6 mSSC特异性基因及分化相关基因表达的RT-PCR检测 | 第36页 |
4.7 细胞免疫荧光技术检测mSSC标志性蛋白的表达 | 第36-38页 |
5 讨论 | 第38-42页 |
第二部分 小鼠精原干细胞的体外诱导分化及鉴定 | 第42-43页 |
材料与方法 | 第43-52页 |
1 材料 | 第43-44页 |
1.1 实验动物 | 第43页 |
1.2 主要仪器 | 第43页 |
1.3 主要试剂与溶液 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-46页 |
2.1 mSSC分离纯化及体外培养 | 第44页 |
2.2 mSSC体外诱导 | 第44页 |
2.3 单倍体生殖细胞的鉴定 | 第44-46页 |
3 结果 | 第46-50页 |
3.1 诱导后mSSC的形态学鉴定 | 第46-47页 |
3.2 mSSC特异性基因及分化相关基因表达的RT-PCR检测单倍体生殖细胞 | 第47页 |
3.3 细胞免疫荧光技术检测单倍体生殖细胞 | 第47-48页 |
3.4 流式细胞术鉴定单倍体生殖细胞 | 第48-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
全文小结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
综述 | 第60-76页 |
【参考文献】 | 第68-76页 |
在读期间发表(待发表、投稿中)论文目录 | 第76页 |