| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 表观遗传学概述 | 第12-13页 |
| 1.2 组蛋白的修饰 | 第13-21页 |
| 1.2.1 核小体的结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 组蛋白翻译后修饰的类型 | 第14-15页 |
| 1.2.3 组蛋白乙酰化修饰 | 第15-19页 |
| 1.2.4 组蛋白巴豆酰化修饰 | 第19-21页 |
| 1.3 胚胎干细胞研究的概述 | 第21-30页 |
| 1.3.1 胚胎干细胞的简介 | 第21-24页 |
| 1.3.2 组蛋白乙酰化与胚胎干细胞干性的关系 | 第24-25页 |
| 1.3.3 非组蛋白的翻译后修饰与干性转录因子之间相互作用促进胚胎干细胞的干性 | 第25-27页 |
| 1.3.4 代谢调控蛋白的翻译后修饰与胚胎干细胞的干性的关系 | 第27-30页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第30-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-33页 |
| 2.1.1 菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 质粒 | 第30页 |
| 2.1.3 抗体 | 第30-31页 |
| 2.1.4 化学药物及抑制剂 | 第31页 |
| 2.1.5 细胞株 | 第31-32页 |
| 2.1.6 细胞的培养及转染试剂 | 第32页 |
| 2.1.7 引物序列信息 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-52页 |
| 2.2.1 克隆的构建 | 第33-37页 |
| 2.2.2 突变体的构建 | 第37-38页 |
| 2.2.3 细胞传代培养 | 第38-39页 |
| 2.2.4 细胞的转染 | 第39-40页 |
| 2.2.5 免疫染色 | 第40-41页 |
| 2.2.6 组蛋白的提取 | 第41页 |
| 2.2.7 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-46页 |
| 2.2.8 RNA的提取、反转及实时荧光定量PCR | 第46-48页 |
| 2.2.9 构建可诱导稳定表达的细胞株 | 第48-49页 |
| 2.2.10 流式细胞仪分析细胞周期 | 第49页 |
| 2.2.11 碱性磷酸酶染色 | 第49-50页 |
| 2.2.12 拟胚体分化 | 第50-52页 |
| 第三章 组蛋白巴豆酰化修饰对小鼠胚胎干细胞分化的影响 | 第52-64页 |
| 3.1 课题的目的和意义 | 第52页 |
| 3.2 实验结果 | 第52-64页 |
| 3.2.1 泛巴豆酰化修饰及泛乙酰化修饰抗体的特异性检测 | 第52-54页 |
| 3.2.2 胚胎干细胞分化后组蛋白巴豆酰化和乙酰化修饰的变化 | 第54-56页 |
| 3.2.3 HDAC1 AGG-VRPP突变体丧失了组蛋白去乙酰化的酶活但是具有组蛋白去巴豆酰化的酶活 | 第56-57页 |
| 3.2.4 碱性磷酸酶染色实验 | 第57-58页 |
| 3.2.5 构建可诱导稳定表达Vector、HDAC1-WT、HDAC1-VRPP的干细胞系 | 第58-60页 |
| 3.2.6 组蛋白去巴豆酰化酶的表达影响了干性因子的表达 | 第60-61页 |
| 3.2.7 组蛋白去巴豆酰化酶的表达影响胚胎干细胞克隆团的大小,不影响其数目 | 第61-64页 |
| 总结与展望 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
