| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1.1 PRRSV病原学特点 | 第12-13页 |
| 1.1.2 PRRSV生物学特性 | 第13页 |
| 1.1.3 PRRSV分子生物学特点 | 第13-14页 |
| 1.1.4 PRRSV非结构蛋白 | 第14页 |
| 1.1.5 PRRSV结构蛋白 | 第14-15页 |
| 1.1.6 病毒的增殖特性 | 第15页 |
| 1.1.7 流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.8 抗体依赖性增强作用 | 第16-17页 |
| 1.2 血红素加氧酶1的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.1 HO-1（血红素加氧酶 1）的生物学特点 | 第17-18页 |
| 1.2.2 HO-1 与病原感染发生发展关系 | 第18页 |
| 1.2.3 HO-1 基因表达调控的研究现状 | 第18-20页 |
| 第二章 猪HO-1 启动子区的克隆、鉴定与初步分析 | 第20-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 试验试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 试验设备和仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-28页 |
| 2.2.1 猪HO-1 启动子区的预测及其引物设计 | 第21页 |
| 2.2.2 PAM细胞的培养及其基因组的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.3 LA taq酶PCR扩增HO-1 启动子区 | 第22-23页 |
| 2.2.4 PCR产物胶回收 | 第23-24页 |
| 2.2.5 pGL4.10空载体分步酶切及酶切产物胶回收 | 第24-25页 |
| 2.2.6 双酶切产物胶回收 | 第25页 |
| 2.2.7 Infusion技术同源重组 | 第25-26页 |
| 2.2.8 连接产物的转化 | 第26页 |
| 2.2.9 阳性重组质粒pGL4.10-5′UTR的鉴定与保存 | 第26-28页 |
| 2.3 试验结果 | 第28-35页 |
| 2.3.1 猪HO-1 启动子区的预测及其引物设计 | 第28-29页 |
| 2.3.2 LA taq酶PCR扩增HO-1 启动子区 | 第29-30页 |
| 2.3.3 pGL4.10空载体分步酶切及酶切产物胶回收 | 第30页 |
| 2.3.4 菌液PCR鉴定 | 第30页 |
| 2.3.5 双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.6 猪HO-1 启动子区测序结果 | 第31-34页 |
| 2.3.7 猪HO-1 启动子区荧光素酶活性检测 | 第34-35页 |
| 2.4 分析及讨论 | 第35-36页 |
| 第三章 猪HO-1 核心启动子区域的鉴定 | 第36-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 试验试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 试验设备和仪器 | 第36页 |
| 3.2 试验方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 猪HO-1 启动子区第一次顺序截短荧光素酶报告载体的构建 | 第36-39页 |
| 3.2.2 双荧光素酶活性检测 | 第39-40页 |
| 3.2.3 猪HO-1 启动子区第二次顺序截断荧光素酶报告载体的构建 | 第40页 |
| 3.2.4 猪HO-1 启动子区第三次顺序截断荧光素酶报告载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.5 转录因子预测 | 第41页 |
| 3.3 试验结果 | 第41-46页 |
| 3.3.1 猪HO-1 启动子区第一次顺序截断荧光素酶报告载体的构建 | 第41-44页 |
| 3.3.2 猪HO-1 启动子区第二次顺序截断荧光素酶报告载体的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.3 猪HO-1 启动子区第三次顺序截断荧光素酶报告载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第46-47页 |
| 第四章 关键转录因子的预测分析和NRF2的鉴定 | 第47-54页 |
| 4.1 试验材料 | 第47页 |
| 4.1.1 试验试剂 | 第47页 |
| 4.1.2 试验设备和仪器 | 第47页 |
| 4.2 试验方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 软件预测 | 第47页 |
| 4.2.2 关键转录因子突变荧光素酶报告载体重组质粒的构建 | 第47-50页 |
| 4.3 试验结果 | 第50-52页 |
| 4.3.1 转录因子结合位点预测分析 | 第50-51页 |
| 4.3.2 突变增强子区荧光素酶活性检测 | 第51-52页 |
| 4.4 分析及讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 转录因子NRF2在HO-1 调控PRRSV感染过程中的作用初探 | 第54-61页 |
| 5.1 试验材料 | 第54-56页 |
| 5.1.1 细胞、抗体及PRRSV毒株 | 第54页 |
| 5.1.2 试验设备和仪器 | 第54页 |
| 5.1.3 试验用主要试剂 | 第54-55页 |
| 5.1.4 细胞用主要试剂及其配制 | 第55页 |
| 5.1.5 分子实验用主要试剂及其配制 | 第55-56页 |
| 5.2 试验方法 | 第56-59页 |
| 5.2.1 tBHQ诱导Nrf2调控HO-1 的转录表达 | 第56-58页 |
| 5.2.2 Nrf2调控HO-1 抵抗PRRSV感染 | 第58-59页 |
| 5.3 试验结果 | 第59-60页 |
| 5.3.1 tBHQ处理不同时间和浓度对Nrf2和HO-1 的影响 | 第59页 |
| 5.3.2 Nrf2调控HO-1 抵抗PRRSV感染 | 第59-60页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 缩略 词 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
