| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-14页 |
| 1.1 类胡萝卜素概述 | 第8-9页 |
| 1.1.1 类胡萝卜素的结构 | 第8-9页 |
| 1.1.2 类胡萝卜素的性质 | 第9页 |
| 1.1.3 类胡萝卜素的作用 | 第9页 |
| 1.2 类胡萝卜素的生物合成途径 | 第9-10页 |
| 1.3 类胡萝卜素降解的途径 | 第10-11页 |
| 1.3.1 物理降解 | 第10页 |
| 1.3.2 化学降解 | 第10-11页 |
| 1.3.3 生物降解 | 第11页 |
| 1.4 类胡萝卜素的降解相关基因 | 第11-13页 |
| 1.4.1 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCEDs）基因 | 第11-12页 |
| 1.4.2 9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCEDs）基因研究进展 | 第12页 |
| 1.4.3 ABA及其合成途径 | 第12-13页 |
| 1.5 NCED基因对烟叶生长的影响 | 第13页 |
| 1.6 讨论与展望 | 第13-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-20页 |
| 3.1 烟草类胡萝卜素降解关键基因NCED3的克隆与生物信息学分析 | 第15页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第15页 |
| 3.1.2 NCED3全长基因的克隆 | 第15页 |
| 3.1.3 序列分析 | 第15页 |
| 3.2 NCED3基因的表达分析 | 第15-16页 |
| 3.2.1 NCED3基因胁迫表达分析 | 第15-16页 |
| 3.2.2 ABA含量测定 | 第16页 |
| 3.3 NCED3基因过表达及抑制表达载体的构建及转化 | 第16-19页 |
| 3.3.1 过表达载体构建及检测 | 第17-18页 |
| 3.3.2 RNAi表达载体构建及检测 | 第18-19页 |
| 3.4 转基因阳性植株的获得 | 第19-20页 |
| 3.4.1 K326无菌苗的诱导 | 第19页 |
| 3.4.2 菌株活化 | 第19页 |
| 3.4.3 转化方案及转化植株的筛选 | 第19-20页 |
| 4 结果与分析 | 第20-29页 |
| 4.1 NCED3基因的克隆与序列分析 | 第20-24页 |
| 4.1.1 K326总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 4.1.2 NCED3全长基因的克隆 | 第21页 |
| 4.1.3 NCED3基因序列分析 | 第21-24页 |
| 4.1.3.1 NCED3氨基酸序列同源性分析 | 第21-22页 |
| 4.1.3.2 NCED3蛋白质结构域分析 | 第22页 |
| 4.1.3.3 NCED3蛋白质疏水性分析和跨膜区预测 | 第22-24页 |
| 4.1.3.4 NCED3蛋白质信号肽与导肽分析 | 第24页 |
| 4.1.3.5 NCED3蛋白质二级结构分析 | 第24页 |
| 4.1.3.6 NCED3蛋白质三级结构预测 | 第24页 |
| 4.2 NCED3基因的胁迫表达分析 | 第24-26页 |
| 4.2.1 PEG6000胁迫下NCED3基因表达分析 | 第24-25页 |
| 4.2.2 ABA含量分析 | 第25-26页 |
| 4.3 NCED3基因表达载体的构建、转化与转基因阳性植株的获得 | 第26-29页 |
| 4.3.1 转NCED3基因过表达载体的获得 | 第26页 |
| 4.3.2 RNAi表达载体构建 | 第26-27页 |
| 4.3.3 表达载体转化农杆菌 | 第27-28页 |
| 4.3.4 转基因植株的获得 | 第28-29页 |
| 5 结论与讨论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-33页 |
| ABSTRACT | 第33-34页 |
