致谢 | 第4-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-22页 |
1.1 Leptin及其受体的发现与结构 | 第13-15页 |
1.1.1 Leptin的发现与结构 | 第13-14页 |
1.1.2 LEPR的发现与结构 | 第14-15页 |
1.2 Leptin及其受体的分子调控机制 | 第15-18页 |
1.2.1 Leptin/LEPR介导JAK-STAT信号通路 | 第16-17页 |
1.2.2 Leptin/LEPR介导AMPK信号转导途径 | 第17-18页 |
1.3 禽类Leptin及LEPR的研究进展 | 第18-22页 |
1.3.1 禽类Leptin/LEPR基因的分子克隆 | 第18-19页 |
1.3.1.1 禽类Leptin基因的分子克隆 | 第18-19页 |
1.3.1.2 禽类LEPR基因的分子克隆 | 第19页 |
1.3.2 禽类Leptin/LEPR的组织表达模式 | 第19页 |
1.3.3 禽类“Leptin/LEPR的生理功能” | 第19-22页 |
1.3.3.1 采食与能量调控 | 第20页 |
1.3.3.2 生长发育 | 第20-21页 |
1.3.3.3 繁殖调控 | 第21页 |
1.3.3.4 小结 | 第21-22页 |
2 引言 | 第22-23页 |
3 鹌鹑Leptin及LEPR基因的分子克隆及生物信息学分析 | 第23-39页 |
3.1 试验材料 | 第23-24页 |
3.1.1 试验动物 | 第23页 |
3.1.2 试验主要试剂及配制 | 第23页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第23-24页 |
3.2 试验方法 | 第24-28页 |
3.2.1 基因组DNA的提取及检测 | 第24-25页 |
3.2.1.1 基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
3.2.1.2 基因组DNA质量检测 | 第25页 |
3.2.2 组织总RNA的提取检测及cDNA的合成 | 第25-26页 |
3.2.2.1 组织总RNA的提取 | 第25页 |
3.2.2.2 组织总RNA质量检测 | 第25-26页 |
3.2.2.3 cDNA的合成 | 第26页 |
3.2.3 鹌鹑Leptin及LEPR基因的克隆及测序 | 第26-28页 |
3.2.3.1 引物设计与合成 | 第26-27页 |
3.2.3.2 PCR反应条件 | 第27-28页 |
3.2.3.3 PCR产物检测纯化与测序 | 第28页 |
3.2.4 生物信息学和进化分析 | 第28页 |
3.3 结果与分析 | 第28-37页 |
3.3.1 基因组DNA与组织RNA质量检测 | 第28-29页 |
3.3.1.1 基因组DNA质量检测 | 第28页 |
3.3.1.2 组织RNA质量检测 | 第28-29页 |
3.3.2 鹌鹑Leptin基因的克隆及结构特点 | 第29-30页 |
3.3.3 鹌鹑LEPR基因不同剪接亚型的克隆与鉴定 | 第30-35页 |
3.3.4 Leptin及LEPR基因的分子进化分析 | 第35-37页 |
3.4 讨论 | 第37-38页 |
3.5 小结 | 第38-39页 |
4 鹌鹑Leptin/LEPR组织表达模式研究 | 第39-45页 |
4.1 试验材料 | 第39页 |
4.1.1 试验样品 | 第39页 |
4.1.2 试验主要试剂及配制 | 第39页 |
4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
4.2 试验方法 | 第39-41页 |
4.2.1 组织总RNA的提取 | 第39页 |
4.2.2 组织总RNA质量检测 | 第39页 |
4.2.3 cDNA的合成 | 第39页 |
4.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)特异性引物设计 | 第39-40页 |
4.2.5 qRT-PCR引物特异性检测 | 第40页 |
4.2.6 qRT-PCR反应 | 第40页 |
4.2.7 目的基因的计算方法选择 | 第40-41页 |
4.2.8 数据分析 | 第41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-43页 |
4.3.1 组织RNA质量检测 | 第41页 |
4.3.2 引物特异性检测 | 第41页 |
4.3.3 鹌鹑Leptin/LEPR的组织表达 | 第41-43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
4.4.1 鹌鹑Leptin/LEPR的组织表达模式 | 第43页 |
4.4.2 Leptin/LEPR在鹌鹑垂体和下丘脑中的表达 | 第43-44页 |
4.4.3 Leptin/LEPR在鹌鹑脂肪和肝脏组织中的表达 | 第44页 |
4.5 小结 | 第44-45页 |
5 Leptin/LEPR与鹌鹑繁殖调控的关系 | 第45-51页 |
5.1 试验材料 | 第45页 |
5.1.1 试验样品 | 第45页 |
5.1.2 试验主要试剂及配制 | 第45页 |
5.1.3 主要仪器 | 第45页 |
5.2 试验方法 | 第45-46页 |
5.2.1 组织总RNA的提取 | 第45页 |
5.2.2 组织总RNA质量检测 | 第45页 |
5.2.3 cDNA的合成 | 第45页 |
5.2.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)引物设计 | 第45-46页 |
5.2.5 qRT-PCR引物特异性检测 | 第46页 |
5.2.6 qRT-PCR反应 | 第46页 |
5.2.7 数据分析 | 第46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-49页 |
5.3.1 组织RNA质量检测 | 第46-47页 |
5.3.2 引物特异性检测 | 第47页 |
5.3.3 鹌鹑性腺轴上繁殖相关基因的验证 | 第47-48页 |
5.3.4 Leptin/LEPR在鹌鹑不同发育阶段的差异表达 | 第48-49页 |
5.4 讨论 | 第49-50页 |
5.4.1 鹌鹑Leptin/LEPR系统与繁殖轴的激活作用 | 第49页 |
5.4.2 鹌鹑Leptin/LEPR系统与卵泡发育的关系 | 第49页 |
5.4.3 Leptin/LEPR系统在鹌鹑高产期脂质代谢中的作用 | 第49-50页 |
5.5 小结 | 第50-51页 |
6 Leptin/LEPR与鹌鹑采食调控的关系 | 第51-58页 |
6.1 试验材料 | 第51页 |
6.1.1 试验动物 | 第51页 |
6.1.2 试验主要试剂及配制 | 第51页 |
6.1.3 主要仪器 | 第51页 |
6.2 试验方法 | 第51-53页 |
6.2.1 组织总RNA的提取 | 第51-52页 |
6.2.2 组织总RNA质量检测 | 第52页 |
6.2.3 cDNA的合成 | 第52页 |
6.2.4 qRT-PCR引物设计 | 第52页 |
6.2.5 qRT-PCR引物特异性检测 | 第52页 |
6.2.6 qRT-PCR反应 | 第52页 |
6.2.7 数据分析 | 第52-53页 |
6.3 结果与分析 | 第53-55页 |
6.3.1 组织总RNA质量检测 | 第53页 |
6.3.2 引物特异性检测 | 第53页 |
6.3.3 禁食和禁食后恢复采食对食欲因子表达影响 | 第53-54页 |
6.3.4 禁食和禁食后恢复采食对鹌鹑Leptin/LEPR表达的影响 | 第54-55页 |
6.4 讨论 | 第55-56页 |
6.5 小结 | 第56-58页 |
7 全文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
ABSTRACT | 第69-71页 |