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百合双色花形成的转录组分析及基因LhUFGT和LhSGR的功能研究

摘要第6-8页
abstract第8-9页
英文缩略表第15-16页
第一章 引言第16-29页
    1.1 花青素苷的结构第16-17页
    1.2 花青素苷生物合成途径及调控机制第17-21页
        1.2.1 花青素苷生物合成途径第17-18页
        1.2.2 花青素苷生物合成调控机制研究第18-21页
        1.2.3 花青素苷合成通路研究的不足第21页
    1.3 叶绿素代谢途径及调控机制第21-24页
        1.3.1 叶绿素代谢通路第21-23页
        1.3.2 叶绿素代谢通路的调控机制研究第23-24页
    1.4 双色花形成的分子机理第24页
    1.5 百合花青素苷合成途径分子机制研究第24-26页
    1.6 研究目的意义及主要内容第26-29页
        1.6.1 研究的目的和意义第26-27页
        1.6.2 研究的主要内容第27-28页
        1.6.3 技术路线第28-29页
第二章 百合双色花形成的转录组分析第29-48页
    2.1 材料与方法第29-31页
        2.1.1 试验材料第29页
        2.1.2 花青素苷和叶绿素含量测定第29-30页
        2.1.3 cDNA文库构建、测序和转录组数据组装第30页
        2.1.4 功能注释与分类第30页
        2.1.5 差异表达基因分析第30页
        2.1.6 qRT-PCR分析第30-31页
        2.1.7 转录因子鉴定第31页
        2.1.8 基因共表达网络的构建第31页
    2.2 结果与分析第31-45页
        2.2.1 花被片花青素苷和叶绿素含量测定第31-33页
        2.2.2 测序与组装第33页
        2.2.3 功能注释及分类第33-35页
        2.2.4 差异基因的鉴定第35-37页
        2.2.5 花青素苷合成基因的表达模式第37-40页
        2.2.6 叶绿素代谢通路基因的表达模式第40-41页
        2.2.7 花青素苷合成通路和叶绿素代谢通路共表达模块的鉴定第41-42页
        2.2.8 共表达调控网络构建第42-45页
    2.3 讨论第45-48页
        2.3.1 百合双色花被片发育的转录组和共表达网络分析第45页
        2.3.2 百合双色花被片花青素苷合成通路的调控网络第45-46页
        2.3.3 百合双色花中叶绿素代谢调控机制第46-48页
第三章 百合双色花被片发育过程中qRT-PCR内参基因的筛选第48-57页
    3.1 材料与方法第48-50页
        3.1.1 植物材料第48-49页
        3.1.2 RNA提取和cDNA合成第49页
        3.1.3 内参基因选择及引物设计第49-50页
        3.1.4 qRT-PCR分析第50页
        3.1.5 内参稳定性分析第50页
        3.1.6 最佳内参的稳定性验证第50页
    3.2 结果与分析第50-56页
        3.2.1 内参引物的特异性和PCR扩增效率第50页
        3.2.2 候选内参基因的Cq值第50页
        3.2.3 内参稳定性分析第50-55页
        3.2.4 最佳内参的稳定性验证第55-56页
    3.3 讨论第56-57页
第四章 LhUFGT基因的克隆及功能研究第57-68页
    4.1 材料与方法第57-61页
        4.1.1 菌株及载体第57页
        4.1.2 试验试剂第57页
        4.1.3 LhUFGT全长扩增第57-58页
        4.1.4 基因序列的生物信息分析第58页
        4.1.5 LhUFGT在百合中的组织特异性表达分析第58-59页
        4.1.6 pCAMBIA3301-UFGT载体构建第59页
        4.1.7 农杆菌活化及感受态细胞的制备第59-60页
        4.1.8 载体转入农杆菌GV3101第60页
        4.1.9 重组农杆菌的鉴定第60页
        4.1.10 拟南芥种植第60-61页
        4.1.11 转化拟南芥第61页
    4.2 结果与分析第61-66页
        4.2.1 LhUFGT全长扩增第61-62页
        4.2.2 LhUFGT序列生物信息学分析第62-63页
        4.2.3 LhUFGT的时空表达分析第63-64页
        4.2.4 pCAMBIA3301-Lh UFGT表达载体的构建第64-65页
        4.2.5 获得含pCAMBIA3301-Lh UFGT表达载体的农杆菌第65页
        4.2.6 功能互补试验第65-66页
    4.3 讨论第66-68页
第五章 LhSGR基因的克隆及功能研究第68-76页
    5.1 材料与方法第68-69页
        5.1.1 菌株及载体第68页
        5.1.2 试验试剂第68页
        5.1.3 LhSGR全长扩增第68页
        5.1.4 基因序列的生物信息分析第68页
        5.1.5 LhSGR在百合中的组织特异性表达分析第68页
        5.1.6 pCAMBIA3301-Lh SGR载体构建第68页
        5.1.7 农杆菌活化及感受态细胞的制备第68-69页
        5.1.8 载体转入农杆菌GV3101第69页
        5.1.9 重组农杆菌的鉴定第69页
        5.1.10 农杆菌瞬时转化瞬时烟草叶片第69页
    5.2 结果与分析第69-74页
        5.2.1 LhSGR扩增第69-71页
        5.2.2 LhSGR序列生物信息学分析第71页
        5.2.3 LhSGR的时空表达分析第71-72页
        5.2.4 pCAMBIA3301-Lh SGR表达载体的构建第72-73页
        5.2.5 获得含pCAMBIA3301-Lh SGR表达载体的农杆菌第73页
        5.2.6 LhSGR在烟草中瞬时过表达第73-74页
    5.3 讨论第74-76页
第六章 全文结论第76-77页
参考文献第77-90页
附录第90-96页
致谢第96-97页
作者简历第97页

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