摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第15-16页 |
第一章 引言 | 第16-29页 |
1.1 花青素苷的结构 | 第16-17页 |
1.2 花青素苷生物合成途径及调控机制 | 第17-21页 |
1.2.1 花青素苷生物合成途径 | 第17-18页 |
1.2.2 花青素苷生物合成调控机制研究 | 第18-21页 |
1.2.3 花青素苷合成通路研究的不足 | 第21页 |
1.3 叶绿素代谢途径及调控机制 | 第21-24页 |
1.3.1 叶绿素代谢通路 | 第21-23页 |
1.3.2 叶绿素代谢通路的调控机制研究 | 第23-24页 |
1.4 双色花形成的分子机理 | 第24页 |
1.5 百合花青素苷合成途径分子机制研究 | 第24-26页 |
1.6 研究目的意义及主要内容 | 第26-29页 |
1.6.1 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
1.6.2 研究的主要内容 | 第27-28页 |
1.6.3 技术路线 | 第28-29页 |
第二章 百合双色花形成的转录组分析 | 第29-48页 |
2.1 材料与方法 | 第29-31页 |
2.1.1 试验材料 | 第29页 |
2.1.2 花青素苷和叶绿素含量测定 | 第29-30页 |
2.1.3 cDNA文库构建、测序和转录组数据组装 | 第30页 |
2.1.4 功能注释与分类 | 第30页 |
2.1.5 差异表达基因分析 | 第30页 |
2.1.6 qRT-PCR分析 | 第30-31页 |
2.1.7 转录因子鉴定 | 第31页 |
2.1.8 基因共表达网络的构建 | 第31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-45页 |
2.2.1 花被片花青素苷和叶绿素含量测定 | 第31-33页 |
2.2.2 测序与组装 | 第33页 |
2.2.3 功能注释及分类 | 第33-35页 |
2.2.4 差异基因的鉴定 | 第35-37页 |
2.2.5 花青素苷合成基因的表达模式 | 第37-40页 |
2.2.6 叶绿素代谢通路基因的表达模式 | 第40-41页 |
2.2.7 花青素苷合成通路和叶绿素代谢通路共表达模块的鉴定 | 第41-42页 |
2.2.8 共表达调控网络构建 | 第42-45页 |
2.3 讨论 | 第45-48页 |
2.3.1 百合双色花被片发育的转录组和共表达网络分析 | 第45页 |
2.3.2 百合双色花被片花青素苷合成通路的调控网络 | 第45-46页 |
2.3.3 百合双色花中叶绿素代谢调控机制 | 第46-48页 |
第三章 百合双色花被片发育过程中qRT-PCR内参基因的筛选 | 第48-57页 |
3.1 材料与方法 | 第48-50页 |
3.1.1 植物材料 | 第48-49页 |
3.1.2 RNA提取和cDNA合成 | 第49页 |
3.1.3 内参基因选择及引物设计 | 第49-50页 |
3.1.4 qRT-PCR分析 | 第50页 |
3.1.5 内参稳定性分析 | 第50页 |
3.1.6 最佳内参的稳定性验证 | 第50页 |
3.2 结果与分析 | 第50-56页 |
3.2.1 内参引物的特异性和PCR扩增效率 | 第50页 |
3.2.2 候选内参基因的Cq值 | 第50页 |
3.2.3 内参稳定性分析 | 第50-55页 |
3.2.4 最佳内参的稳定性验证 | 第55-56页 |
3.3 讨论 | 第56-57页 |
第四章 LhUFGT基因的克隆及功能研究 | 第57-68页 |
4.1 材料与方法 | 第57-61页 |
4.1.1 菌株及载体 | 第57页 |
4.1.2 试验试剂 | 第57页 |
4.1.3 LhUFGT全长扩增 | 第57-58页 |
4.1.4 基因序列的生物信息分析 | 第58页 |
4.1.5 LhUFGT在百合中的组织特异性表达分析 | 第58-59页 |
4.1.6 pCAMBIA3301-UFGT载体构建 | 第59页 |
4.1.7 农杆菌活化及感受态细胞的制备 | 第59-60页 |
4.1.8 载体转入农杆菌GV3101 | 第60页 |
4.1.9 重组农杆菌的鉴定 | 第60页 |
4.1.10 拟南芥种植 | 第60-61页 |
4.1.11 转化拟南芥 | 第61页 |
4.2 结果与分析 | 第61-66页 |
4.2.1 LhUFGT全长扩增 | 第61-62页 |
4.2.2 LhUFGT序列生物信息学分析 | 第62-63页 |
4.2.3 LhUFGT的时空表达分析 | 第63-64页 |
4.2.4 pCAMBIA3301-Lh UFGT表达载体的构建 | 第64-65页 |
4.2.5 获得含pCAMBIA3301-Lh UFGT表达载体的农杆菌 | 第65页 |
4.2.6 功能互补试验 | 第65-66页 |
4.3 讨论 | 第66-68页 |
第五章 LhSGR基因的克隆及功能研究 | 第68-76页 |
5.1 材料与方法 | 第68-69页 |
5.1.1 菌株及载体 | 第68页 |
5.1.2 试验试剂 | 第68页 |
5.1.3 LhSGR全长扩增 | 第68页 |
5.1.4 基因序列的生物信息分析 | 第68页 |
5.1.5 LhSGR在百合中的组织特异性表达分析 | 第68页 |
5.1.6 pCAMBIA3301-Lh SGR载体构建 | 第68页 |
5.1.7 农杆菌活化及感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
5.1.8 载体转入农杆菌GV3101 | 第69页 |
5.1.9 重组农杆菌的鉴定 | 第69页 |
5.1.10 农杆菌瞬时转化瞬时烟草叶片 | 第69页 |
5.2 结果与分析 | 第69-74页 |
5.2.1 LhSGR扩增 | 第69-71页 |
5.2.2 LhSGR序列生物信息学分析 | 第71页 |
5.2.3 LhSGR的时空表达分析 | 第71-72页 |
5.2.4 pCAMBIA3301-Lh SGR表达载体的构建 | 第72-73页 |
5.2.5 获得含pCAMBIA3301-Lh SGR表达载体的农杆菌 | 第73页 |
5.2.6 LhSGR在烟草中瞬时过表达 | 第73-74页 |
5.3 讨论 | 第74-76页 |
第六章 全文结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-90页 |
附录 | 第90-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简历 | 第97页 |