| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-21页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 miRNA | 第12-17页 |
| 1.2.1 miRNA的发现、现状以及研究热点 | 第12-13页 |
| 1.2.2 miRNA的生成、剪切和作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.3 miRNA的转录调控机制 | 第14-16页 |
| 1.2.4 miRNA转录调控的研究方法 | 第16-17页 |
| 1.3 肺癌 | 第17页 |
| 1.3.1 肺癌的研究现状 | 第17页 |
| 1.3.2 肺癌的诊断及治疗手段 | 第17页 |
| 1.4 miRNA参与肺癌的发生、转移、及预后 | 第17-19页 |
| 1.5 miR-199a-5p的研究现状 | 第19页 |
| 1.6 miR-10a的研究现状 | 第19-20页 |
| 1.7 本研究拟解决的关键科学问题 | 第20-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-45页 |
| 2.1 细胞来源 | 第21页 |
| 2.2 试剂及其配置 | 第21-24页 |
| 2.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.4 实验方法 | 第25-45页 |
| 2.4.1 构建目的基因到载体 | 第25-27页 |
| 2.4.2 克隆形成分析（colony assay） | 第27-28页 |
| 2.4.3 细胞凋亡检测 | 第28-29页 |
| 2.4.4 细胞周期检测（Cell cycle analysis） | 第29-31页 |
| 2.4.5 定点突变（Site Directed Mutagenesis） | 第31-33页 |
| 2.4.6 细胞培养（cell culture） | 第33-35页 |
| 2.4.7 蛋白质免疫印迹（Western blot） | 第35-37页 |
| 2.4.8 染色质免疫共沉淀（Chromatin Immunoprecipitation） | 第37-39页 |
| 2.4.9 RNA提取 | 第39-40页 |
| 2.4.10 细胞转染 | 第40-41页 |
| 2.4.11 反转录和荧光定量PCR | 第41-42页 |
| 2.4.12 慢病毒包装和感染细胞 | 第42-44页 |
| 2.4.13 动物模型 | 第44-45页 |
| 第3章 小鼠NSCLC组织模型高通量测序与数据分析 | 第45-56页 |
| 3.1 NSCLC小鼠动物模型的构建以及solexa测序样品的制备 | 第45页 |
| 3.2 solexa测序原始数据及数据整理 | 第45页 |
| 3.3 计算差异表达miRNA | 第45-46页 |
| 3.4 差异表达miRNA聚类分析 | 第46页 |
| 3.5 miRNA靶基因预测及功能分析 | 第46-53页 |
| 3.6 靶基因的蛋白互作网络分析 | 第53-56页 |
| 第4章 miR-199a-5p通过调控MAPK信号通路抑制NSCLC细胞的增殖 | 第56-65页 |
| 4.1 miR-199a-5p的表达水平在NSCLC小鼠模型和人临床病例组织中显著降低 | 第56-57页 |
| 4.2 NSCLC中稳定高表达miR-199a-5p细胞系的构建 | 第57-58页 |
| 4.3 miR-199a-5p抑制NSCLC的增殖 | 第58-60页 |
| 4.4 miR-199a-5p负调控MAPK信号通路 | 第60-62页 |
| 4.5 miR-199a-5p在动物体内抑制肿瘤的生长 | 第62-64页 |
| 4.6 miR-199a-5p在NSCLC内靶向MAP3K11调控MAPK信号通路 | 第64-65页 |
| 第5章 miR-10a通过靶向MAP3K7，WNK3基因抑制NSCLC生长并被P53转录调控 | 第65-74页 |
| 5.1 在肺腺癌中miR-10a的表达水平显著降低 | 第65-66页 |
| 5.2 miR-10a抑制NSCLC的增殖 | 第66页 |
| 5.3 miR-10a促进NSCLC的凋亡 | 第66-68页 |
| 5.4 miR-10a靶向MAP3K7和WNK33′-UTR区域 | 第68-70页 |
| 5.5 miR-10a的靶基因MAP3K7和WNK3具有抗凋亡的作用 | 第70-72页 |
| 5.6 P53调控miR-10a的转录 | 第72-74页 |
| 第6章 miR-150，P53和相关miRNA组成调控网络的研究 | 第74-80页 |
| 6.1 miR-150直接靶向P53 | 第74-75页 |
| 6.2 miR-150通过靶向P53调控细胞周期 | 第75-77页 |
| 6.3 P53影响了miRNA的表达 | 第77页 |
| 6.4 miR-34a、miR-184的表达与P53相关 | 第77-78页 |
| 6.5 miR-150，P53和相关miRNA组成调控网络 | 第78-80页 |
| 第7章 结果讨论与展望 | 第80-84页 |
| 7.1 小鼠NSCLC组织模型高通量测序与数据分析 | 第80页 |
| 7.2 miR-199a-5p通过调控MAPK信号通路抑制NSCLC细胞的增殖 | 第80-81页 |
| 7.3 miR-10a通过靶向MAP3K7，WNK3基因抑制 NSCLC 生长并 | 第81-82页 |
| 7.4 在NSCLC中P53和相关miRNA 组成调控网络 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-89页 |
| 附录 | 第89-111页 |
| 个人简历 | 第111-112页 |
| 作者在攻读博士学位期间所参与的项目 | 第112-113页 |
| 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
