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乙酰氨基葡萄糖合成关键酶GlmS和Gna1的筛选及催化动力学分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第7-15页
    1.1 GlcNAc概述第7-11页
        1.1.1 GlcNAc的性质第7页
        1.1.2 GlcNAc的应用第7-8页
        1.1.3 GlcNAc的生产方法第8-9页
        1.1.4 GlcNAc和GlcN国内外研究现状第9-11页
    1.2 氨基葡萄糖6磷酸合成酶(GlmS)的概述第11-12页
        1.2.1 GlmS的性质第11页
        1.2.2 GlmS的催化反应机制第11页
        1.2.3 GlmS的研究进展第11-12页
    1.3 氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶(Gna1)的概述第12-13页
        1.3.1 Gna1的性质第12页
        1.3.2 Gna1的研究进展第12-13页
    1.4 本论文主要研究内容第13-15页
        1.4.1 立题依据和研究意义第13-14页
        1.4.2 本论文主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-22页
    2.1 材料第15-18页
        2.1.1 菌株与质粒第15-17页
        2.1.2 试剂第17页
        2.1.3 培养基第17-18页
        2.1.4 仪器第18页
    2.2 操作方法第18-22页
        2.2.1 分子生物学操作方法第18-19页
        2.2.2 培养方法第19页
        2.2.3 检测方法第19-20页
        2.2.4 蛋白纯化分析操作方法第20-22页
第三章 结果与讨论第22-42页
    3.1 氨基葡萄糖6磷酸合成酶GlmS的筛选第22-28页
        3.1.1 不同来源GlmS在重组B. subtilis中的表达第22-25页
        3.1.2 表达不同来源GlmS对B. subtilis重组菌生产GlcNAc的影响第25-26页
        3.1.3 不同来源GlmS的分离纯化及动力学分析第26-28页
        3.1.4 最优氨基葡萄糖6磷酸合成酶GlmS的选择第28页
    3.2 氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶Gna1的筛选第28-36页
        3.2.1 不同来源Gna1在重组B. subtilis中的表达第28-30页
        3.2.2 表达不同来源Gna1对B. subtilis重组菌生产GlcNAc的影响第30-31页
        3.2.3 表达不同来源Gna1的B. subtilis重组菌残糖和生长状况分析第31-33页
        3.2.4 不同来源Gna1的分离纯化及动力学分析第33-34页
        3.2.5 最优氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶Gna1的选择第34-35页
        3.2.6 重组菌株CeBSGN目标产物GlcNAc产量的 3 L发酵罐验证第35-36页
    3.3 重组Bsglm S和Cegna1酶学性质第36-42页
        3.3.1 温度对重组Bsglm S和Cegna1反应的影响第36-37页
        3.3.2 pH对重组BsglmS和Cegna1反应的影响第37页
        3.3.3 重组BsglmS和Cegna1热稳定性分析第37-38页
        3.3.4 金属离子对Bsglm S和Cegna1活力的影响第38-39页
        3.3.5 重组BsglmS和Cegna1的反应动力学的研究第39-40页
        3.3.6 底物与产物对重组Bsglm S和Cegna1抑制分析第40-42页
主要结论与展望第42-44页
    主要结论第42页
    展望第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-49页
附录I: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第49-50页
附录II: Gna1不同来源基因B. subtilis密码子优化序列第50-51页

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