| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| 1.1 GlcNAc概述 | 第7-11页 |
| 1.1.1 GlcNAc的性质 | 第7页 |
| 1.1.2 GlcNAc的应用 | 第7-8页 |
| 1.1.3 GlcNAc的生产方法 | 第8-9页 |
| 1.1.4 GlcNAc和GlcN国内外研究现状 | 第9-11页 |
| 1.2 氨基葡萄糖6磷酸合成酶(GlmS)的概述 | 第11-12页 |
| 1.2.1 GlmS的性质 | 第11页 |
| 1.2.2 GlmS的催化反应机制 | 第11页 |
| 1.2.3 GlmS的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶(Gna1)的概述 | 第12-13页 |
| 1.3.1 Gna1的性质 | 第12页 |
| 1.3.2 Gna1的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 1.4.1 立题依据和研究意义 | 第13-14页 |
| 1.4.2 本论文主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1 材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第15-17页 |
| 2.1.2 试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基 | 第17-18页 |
| 2.1.4 仪器 | 第18页 |
| 2.2 操作方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 分子生物学操作方法 | 第18-19页 |
| 2.2.2 培养方法 | 第19页 |
| 2.2.3 检测方法 | 第19-20页 |
| 2.2.4 蛋白纯化分析操作方法 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-42页 |
| 3.1 氨基葡萄糖6磷酸合成酶GlmS的筛选 | 第22-28页 |
| 3.1.1 不同来源GlmS在重组B. subtilis中的表达 | 第22-25页 |
| 3.1.2 表达不同来源GlmS对B. subtilis重组菌生产GlcNAc的影响 | 第25-26页 |
| 3.1.3 不同来源GlmS的分离纯化及动力学分析 | 第26-28页 |
| 3.1.4 最优氨基葡萄糖6磷酸合成酶GlmS的选择 | 第28页 |
| 3.2 氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶Gna1的筛选 | 第28-36页 |
| 3.2.1 不同来源Gna1在重组B. subtilis中的表达 | 第28-30页 |
| 3.2.2 表达不同来源Gna1对B. subtilis重组菌生产GlcNAc的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.3 表达不同来源Gna1的B. subtilis重组菌残糖和生长状况分析 | 第31-33页 |
| 3.2.4 不同来源Gna1的分离纯化及动力学分析 | 第33-34页 |
| 3.2.5 最优氨基葡萄糖6磷酸乙酰转移酶Gna1的选择 | 第34-35页 |
| 3.2.6 重组菌株CeBSGN目标产物GlcNAc产量的 3 L发酵罐验证 | 第35-36页 |
| 3.3 重组Bsglm S和Cegna1酶学性质 | 第36-42页 |
| 3.3.1 温度对重组Bsglm S和Cegna1反应的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.2 pH对重组BsglmS和Cegna1反应的影响 | 第37页 |
| 3.3.3 重组BsglmS和Cegna1热稳定性分析 | 第37-38页 |
| 3.3.4 金属离子对Bsglm S和Cegna1活力的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.5 重组BsglmS和Cegna1的反应动力学的研究 | 第39-40页 |
| 3.3.6 底物与产物对重组Bsglm S和Cegna1抑制分析 | 第40-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-44页 |
| 主要结论 | 第42页 |
| 展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录I: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
| 附录II: Gna1不同来源基因B. subtilis密码子优化序列 | 第50-51页 |
