致谢 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
1 引言 | 第17-20页 |
2 材料和方法 | 第20-37页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 细胞系及小鼠原代巨噬细胞 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂 | 第20-22页 |
2.1.4 载体及其构建 | 第22页 |
2.1.5 主要设备和软件 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-37页 |
2.2.1 NDR1基因表达载体的构建 | 第22-25页 |
2.2.2 PEP330x-human NDR1-Cas9载体构建及基因敲除HEK293细胞筛选 | 第25-26页 |
2.2.3 NDR1基因敲除小鼠的鉴定 | 第26页 |
2.2.4 小鼠腹腔巨噬细胞的分离和培养 | 第26-27页 |
2.2.5 细胞总RNA的制备及RT-QPCR(Quantitative PCR)检测 | 第27-30页 |
2.2.6 细胞因子的测定 | 第30页 |
2.2.7 细胞转染和干扰 | 第30-31页 |
2.2.8 Western blot免疫印迹检测和免疫共沉淀 | 第31页 |
2.2.9 细胞质蛋白和细胞核蛋白分离 | 第31-32页 |
2.2.10 双荧光素酶报道基因分析 | 第32页 |
2.2.11 染色质免疫沉淀实验(ChIP) | 第32-34页 |
2.2.12 病毒扩增和滴度测定 | 第34-35页 |
2.2.13 小鼠病毒感染模型的构建 | 第35页 |
2.2.14 新生蛋白质合成检测 | 第35-36页 |
2.2.15 统计学处理 | 第36-37页 |
3 实验结果 | 第37-76页 |
3.1 NDR1在体外正向调控抗病毒天然免疫反应 | 第37-44页 |
3.2 NDR1在体内正向调控抗病毒天然免疫应答 | 第44-47页 |
3.3 NDR1通过靶向STAT1特异性调控干扰素信号通路 | 第47-55页 |
3.4 NDR1正向调控STAT1蛋白质翻译 | 第55-60页 |
3.5 NDR1负向调控miRNA146a的表达 | 第60-62页 |
3.6 NDR1在细胞核内发挥抗病毒天然免疫应答效应 | 第62-67页 |
3.7 NDR1结合miRNA146a启动子区并抑制NF-κB与miRNA146a启动子区结合 | 第67-76页 |
4 讨论 | 第76-79页 |
5 小结 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-84页 |
综述 | 第84-94页 |
参考文献 | 第90-94页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第94-95页 |