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盖他病毒E2蛋白的表达、纯化以及RT-PCR检测方法的初步建立

摘要第4-5页
abstract第5页
第一章 文献综述第10-18页
    1.1 病毒的病原学特征第10-12页
        1.1.1 GETV的分类及全长序列参考株型第10-11页
        1.1.2 病毒分子生物学特征第11-12页
    1.2 GETV流行病学研究情况第12-14页
        1.2.1 GETV的自然宿主第12-13页
        1.2.2 GETV的传播途径第13页
        1.2.3 GETV的流行情况第13-14页
        1.2.4 流行特征第14页
    1.3 临床症状以及病理变化第14-15页
        1.3.1 临床症状第14-15页
        1.3.2 病理变化第15页
    1.4 实验室检测技术的研究第15-17页
        1.4.1 病毒分离法第15页
        1.4.2 血清学检验第15-17页
        1.4.3 聚合酶链反应技术第17页
    1.5 GETV的治疗及疫苗的相关研究第17-18页
第二章 盖他病毒E2蛋白的原核表达以及蛋白纯化第18-39页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 菌株以及载体第18页
        2.1.2 主要试剂第18-19页
        2.1.3 实验主要所用溶液以及配置方法第19-20页
        2.1.4 实验仪器设备第20-21页
    2.2 实验方法第21-31页
        2.2.1 重组质粒pCold Ⅰ-E2的构建第21-25页
        2.2.2 连接产物的转化第25-26页
        2.2.3 阳性克隆质粒的酶切鉴定第26页
        2.2.4 重组质粒pCold Ⅰ-E2的原核表达第26-29页
        2.2.5 E2蛋白的纯化第29-30页
        2.2.6 Western Blot分析第30-31页
    2.3 实验结果第31-37页
        2.3.1 重组质粒pCold Ⅰ-E2的构建第31-34页
        2.3.2 重组质粒pCold Ⅰ-E2的诱导表达鉴定第34-35页
        2.3.3 E2蛋白的纯化第35-36页
        2.3.4 Western Blot分析鉴定第36-37页
    2.4 讨论第37-38页
    2.5 小结第38-39页
第三章 盖他病毒E2蛋白多克隆抗体的制备第39-43页
    3.1 实验材料第39页
        3.1.1 实验动物第39页
        3.1.2 主要试剂第39页
        3.1.3 主要仪器第39页
    3.2 实验方法第39-41页
        3.2.1 免疫抗原的制备第39-40页
        3.2.2 动物免疫第40页
        3.2.3 多克隆抗体的Wertrn Blot分析鉴定第40-41页
    3.3 结果第41页
        3.3.1 多克隆抗体的Wertern Blot鉴定结果第41页
    3.4 讨论第41-42页
    3.5 小结第42-43页
第四章 盖他病毒RT-PCR检测方法的初步建立第43-57页
    4.1 实验材料第43-44页
        4.1.1 主要试剂第43-44页
        4.1.2 实验试剂以及配方第44页
        4.1.3 主要仪器设备第44页
    4.2 实验方法第44-50页
        4.2.1 引物的合成第44页
        4.2.2 敏感性试验第44-45页
        4.2.3 特异性试验第45页
        4.2.4 RT-PCR方法对样品的检测第45-50页
    4.3 结果第50-55页
        4.3.1 引物筛选结果第50页
        4.3.2 敏感性试验结果第50-51页
        4.3.3 特异性试验结果第51-52页
        4.3.4 蚊虫分类结果第52-53页
        4.3.5 蚊虫研磨液的检测结果第53-55页
    4.4 讨论第55-56页
    4.5 小结第56-57页
参考文献第57-60页
英文缩略词表第60-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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