| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1. 生长激素(GH) | 第11-13页 |
| ·GH基因和蛋白结构 | 第11-12页 |
| ·作用机制 | 第12-13页 |
| ·生理功能 | 第13页 |
| 2. 研究生长轴机制的意义 | 第13-14页 |
| 3. 生长激素受体(GHR)和生长激素结合蛋白(GHBP) | 第14-20页 |
| ·ghr结构和mRNA种类 | 第14-15页 |
| ·GHR蛋白结构 | 第15-16页 |
| ·GHBP蛋白结构和功能概述 | 第16页 |
| ·GHR的作用机制 | 第16-17页 |
| ·ghr表达的组织特异性和时空变化 | 第17-18页 |
| ·ghr表达水平的调节 | 第18-19页 |
| ·ghr表达水平与生长的关系 | 第19-20页 |
| 4. 胰岛素样生长因子家族(IGFs) | 第20-26页 |
| ·IGFs基因和蛋白结构 | 第20-21页 |
| ·胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP) | 第21页 |
| ·胰岛素样生长因子受体(IGFR) | 第21-22页 |
| ·IGFs和IGFR的作用机制 | 第22页 |
| ·IGF1的生理作用 | 第22-23页 |
| ·igf1表达的组织特异性和时空变化 | 第23-24页 |
| ·igf1表达的调节 | 第24-25页 |
| ·igf1表达与生长的关系 | 第25-26页 |
| 5. 实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
| ·实时荧光定量PCR原理 | 第26页 |
| ·实时荧光定量PCR标记方法 | 第26-27页 |
| 6. 研究对象、意义和技术路线 | 第27-29页 |
| ·研究对象和实验意义 | 第27-28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 ghr1和igf1实时荧光定量PCR实验平台的建立 | 第29-45页 |
| 1. 试验材料 | 第29页 |
| 2 实验试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·RNA提取相关试剂 | 第29页 |
| ·目的片段回收相关试剂 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR相关试剂 | 第29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳相关试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| 3. 实验方法 | 第30-35页 |
| ·罗非鱼肝脏和肌肉组织总RNA的提取(Trizol法) | 第30-31页 |
| ·cDNA的制备 | 第31页 |
| ·标准质粒的制备 | 第31-34页 |
| ·目的片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第32-33页 |
| ·目的片段与质粒载体的连接 | 第33页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第33页 |
| ·感受态细胞的转化 | 第33-34页 |
| ·质粒抽提和鉴定 | 第34页 |
| ·荧光定量PCR实验平台的建立 | 第34-35页 |
| ·反应体系 | 第34-35页 |
| ·制备标准曲线 | 第35页 |
| ·建立熔解曲线 | 第35页 |
| ·平台的初步检测 | 第35页 |
| 4. 实验结果 | 第35-42页 |
| ·RNA的抽提和鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·cDNA样品的制备与检测 | 第36页 |
| ·质粒标准品的制备和鉴定 | 第36-38页 |
| ·扩增曲线及熔解曲线分析 | 第38-39页 |
| ·标准曲线的制作 | 第39-41页 |
| ·目的基因相对表达量的计算 | 第41页 |
| ·标准质粒的初始拷贝数 | 第41页 |
| ·目的基因相对表达量的计算 | 第41页 |
| ·平台的初步检测结果 | 第41-42页 |
| 5. 讨论 | 第42-45页 |
| 第三章 不同生长阶段尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼肝脏和肌肉中ghr1和igf1表达水平的检测 | 第45-55页 |
| 1. 实验材料和养殖管理 | 第45页 |
| 2. 试剂和仪器 | 第45页 |
| 3. 方法 | 第45页 |
| ·RNA提取和cDNA的制备 | 第45页 |
| ·各组织定量分析 | 第45页 |
| 4. 数据分析 | 第45-46页 |
| 5. 结果 | 第46-53页 |
| ·尼罗罗非鱼和奥利亚体重的变化 | 第46-47页 |
| ·尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼肝脏ghr1和igf1表达量 | 第47-50页 |
| ·尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼肌肉ghr1和igf1表达量 | 第50-53页 |
| 6. 讨论 | 第53-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 附录 实验试剂及配置 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 科研情况 | 第71页 |
