摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1 油菜素内酯 | 第13-17页 |
·BR的生物合成 | 第13-15页 |
·BR的信号途径研究进展 | 第15-16页 |
·BR的生理功能 | 第16-17页 |
2 Ca~(2+)/CaM | 第17-19页 |
·Ca~(2+)信号的传递过程 | 第18页 |
·Ca~(2+)/CaM在植物中的生理功能 | 第18-19页 |
3 植物中CCaMK的研究进展 | 第19-22页 |
·CCaMKs发现 | 第19页 |
·植物细胞中的CCaMKs | 第19-22页 |
4 本研究内容和目的 | 第22-25页 |
第二章 ZmCCaMK参与BR诱导的抗氧化防护 | 第25-43页 |
1 材料与方法 | 第26-35页 |
·实验材料 | 第26-28页 |
·植物总RNA提取 | 第28-29页 |
·RNA纯度检测 | 第29页 |
·cDNA第一链合成 | 第29页 |
·质粒的大量提取 | 第29-31页 |
·dsRNA体外合成 | 第31-33页 |
·原生质体的提取 | 第33页 |
·40%PEG介导转化 | 第33-34页 |
·原生质体总RNA提取 | 第34页 |
·荧光定量PCR | 第34-35页 |
·用转化后的玉米原生质体,提取粗酶液测活性 | 第35页 |
2 结果与分析 | 第35-41页 |
·RNA质量检测结果 | 第35-36页 |
·外源BR诱导下玉米ZmCCaMK基因表达的时间进程分析 | 第36-38页 |
·内源BR对ZmCCaMK基因表达的影响 | 第38-40页 |
·瞬时表达及瞬时沉默ZmCCaMK对BR诱导的抗氧化防护酶活性的影响 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
第三章 Ca~(2+)/CaM参与BR诱导的抗氧化防护 | 第43-53页 |
1 材料与方法 | 第44-45页 |
·材料培养与处理 | 第44页 |
·菌株及载体 | 第44页 |
·酶及主要分子生物学和生物化学试剂 | 第44-45页 |
·主要仪器设备 | 第45页 |
2 实验方法 | 第45-47页 |
·原生质体的提取 | 第45页 |
·用LSCM测定Ca~(2+)的操作步骤 | 第45-46页 |
·酶联免疫法(ELISA)测定CaM总量操作步骤 | 第46-47页 |
·玉米叶片的抗氧化酶活测定 | 第47页 |
·dsRNA的制备 | 第47页 |
·玉米原生质体分离 | 第47页 |
3 结果与分析 | 第47-50页 |
·BR提高了玉米原生质体细胞溶质中Ca~(2+)浓度 | 第47-49页 |
·BR提高了玉米原生质体CaM含量 | 第49-50页 |
·Ca~(2+)/CaM参与BR诱导的抗氧化防护 | 第50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
第四章 BR诱导的抗氧化防护过程中Ca~(2+)/CaM与ZmCCaMK的交叉对话 | 第53-61页 |
1 材料与方法 | 第54-55页 |
·材料培养与处理 | 第54页 |
·玉米叶片RNA的提取 | 第54页 |
·荧光定量PCR | 第54页 |
·大提质粒步骤 | 第54页 |
·dsRNA的制备 | 第54页 |
·玉米原生质体的分离和转化 | 第54-55页 |
·用LSCM测定Ca的操作步骤 | 第55页 |
·酶联免疫法(ELISA)测定CaM总量操作步骤 | 第55页 |
2 结果分析 | 第55-59页 |
·钙离子和钙调素抑制剂对BR诱导的ZmCCaMK表达量的影响 | 第55-56页 |
·瞬时表达ZmCCaMK基因对于原生质体中Ca~(2+)浓度的影响 | 第56页 |
·瞬时沉默ZmCCaMK基因对于原生质体中Ca~(2+)浓度的影响 | 第56-57页 |
·瞬时表达ZmCCaMK基因对于原生质体中CaM含量的影响 | 第57-58页 |
·瞬时沉默ZmCCaMK基因对于原生质体中CaM含量的影响 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
第五章 全文结论 | 第61-63页 |
1 全文小结 | 第61页 |
2 创新之处 | 第61-62页 |
3 存在问题 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |