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OsHK3参与ABA诱导的抗氧化防护信号通路的转录调控及ROS的产生

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略语词汇表第10-12页
第一章 文献综述第12-30页
 1 植物体中ABA响应干旱胁迫参与抗氧化防护第12-21页
   ·干旱胁迫下ABA的积累第12-13页
   ·ABA信号途径第13-21页
   ·ABA诱导的植物抗氧化防护第21页
 2 双组分信号系统第21-26页
   ·简单与复杂的双组份系统第22-23页
   ·高等植物中的双组份系统信号转导途径第23-26页
 3 HKs在干旱胁迫下ABA信号通路中的作用第26-28页
 4 研究目的及意义第28-30页
第二章 OsHK3参与水稻幼苗中ABA对OsDMI3,MAPK,OsHsfA2,ZFP36的转录调控第30-46页
 前言第31-32页
 1 材料与方法第32-40页
   ·实验材料第32-33页
   ·水稻原生质体提取第33页
   ·高浓度质粒载体提取第33-34页
   ·OsHK3基因的dsRNA体外合成第34-36页
   ·40% PEG介导转化原生质体第36页
   ·原生质体ABA处理第36-37页
   ·总RNA的提取及cDNA的合成第37-38页
   ·荧光定量RT-PCR测定基因转录水平第38-40页
 2 结果分析第40-44页
   ·植物总RNA的提取及检测第40页
   ·原生质体中OsHK3的过表达的定量检测第40-41页
   ·瞬时过表达OsHK3上调ABA信号通路的一些重要成员(OsDMI3、OsMPK1、OsMPK5、OsHsfA2、ZFP36)的基因表达第41-42页
   ·OsHK3的dsRNA的沉默效果检测第42-43页
   ·瞬时沉默OsHK3下调ABA信号通路中OsDMI3、OsMPK1、OsMPK5、OsHsfA2、ZFP36的基因表达第43-44页
 3 讨论第44-46页
第三章 OsDMI3、MAPK对ABA诱导OsHK3的信号通路的转录调控影响第46-54页
 前言第47-48页
 1 材料与方法第48-50页
   ·实验材料第48页
   ·水稻原生质体提取第48页
   ·高浓度质粒载体提取第48-49页
   ·40% PEG介导瞬时过表达载体转化原生质体第49页
   ·原生质体ABA处理第49页
   ·原生质体RNA的提取及cDNA反转第49页
   ·水稻突变体材料处理第49页
   ·叶片RNA的提取及cDNA的反转录第49-50页
   ·荧光定量PCR测定基因表达水平第50页
 2 结果与分析第50-53页
   ·植物叶片总RNA的提取及检测第50-51页
   ·瞬时过表达OsDMI3、OsMPK1、OsMPK5对OsHK3的基因表达影响第51-52页
   ·OsDMI3、OsMPK1突变体对OsHK3基因表达的影响第52-53页
 3 讨论第53-54页
第四章 ABA诱导的抗氧化防护中OsHK3在OsDMI3、OsMPK1的上游表达调控第54-64页
 前言第55-56页
 1 材料与方法第56-59页
   ·实验试材第56页
   ·水稻原生质体提取第56页
   ·高浓度质粒载体提取第56页
   ·水稻突变体提取的原生质体的ABA处理第56-57页
   ·40% PEG介导转化原生质体第57页
   ·原生质体RNA提取与cDNA反转录第57页
   ·荧光定量PCR测定抗氧化防护基因的表达水平第57页
   ·抗氧化防护酶活性的测定第57-58页
   ·数据统计分析第58-59页
 2 结果与分析第59-62页
   ·荧光定量PCR测定抗氧化防护基因的表达水平第59-60页
   ·OsDMI3、OsMPK1突变体中瞬时过表达OsHK3对SOD酶活的影响第60-61页
   ·OsDMI3、OsMPK1突变体中瞬时过表达OsHK3对APX酶活的影响第61-62页
 3 讨论第62-64页
第五章 OsHK3参与ABA信号途径中诱导H_2O_2的产生第64-76页
 前言第65-67页
 1 材料与方法第67-70页
   ·实验材料第67页
   ·水稻原生质体提取第67页
   ·高浓度质粒载体提取第67-68页
   ·OsHK3基因的dsRNA体外合成及40% PEG介导转化原生质体第68页
   ·原生质体ABA处理第68页
   ·总RNA的提取及cDNA的合成第68页
   ·荧光定量PCR测定NADPH的基因表达水平第68页
   ·水稻原生质体中H_2O_2的染色第68-69页
   ·数据统计分析第69-70页
 2 结果与分析第70-74页
   ·ABA诱导下OsHK3对原生质体中H_2O_2的影响第70-72页
   ·瞬时表达OsHK3对ABA诱导的OsrbohB、OsrbohE的转录影响第72页
   ·瞬时沉默OsHK3对ABA诱导的OsrbohB、OsrbohE的转录影响第72-74页
 3 讨论第74-76页
第六章 全文结论第76-80页
 1 研究小结第76-77页
   ·OsHK3调节ABA信号通路中多种重要信号组分的表达第76页
   ·ABA信号通路中OsHK3调控CCaMK、MAPK是单线性无反馈调节第76页
   ·OsHK3在OsDMI3、OsMPK1上游参与调节ABA诱导的抗氧化防护途径第76-77页
   ·OsHK3参与RBOH介导的ABA信号通路中的ROS放大的正反馈机制第77页
 2 本文创新第77页
 3 问题与展望第77-80页
参考文献第80-92页
攻读硕士期间发表与投送的论文第92-94页
致谢第94页

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