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丛枝菌根特异性AsPT1与AsPT4基因启动子功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-25页
   ·丛枝菌根第10页
   ·丛枝菌根真菌第10-12页
     ·丛枝菌根真菌的分类第11-12页
   ·丛枝菌根共生体生活史第12-14页
   ·AM共生体对植物磷吸收的作用第14-16页
   ·植物磷吸收过程中磷转运蛋白的研究分析第16-18页
   ·植物磷转运基因作用分子机制第18-19页
   ·磷转运基因启动子调控元件研究分析第19-21页
   ·研究基础第21-25页
     ·紫云英中磷转运基因AsPT1 和AsPT4 基因表达模式分析第21-23页
     ·AsPT1 和AsPT4 基因启动子调控元件分析第23-25页
2 材料和方法第25-37页
   ·实验材料第25-30页
     ·供试土壤第25页
     ·供试植物及AM真菌第25-26页
     ·供试试剂第26-29页
       ·培养基及植物营养液配方第26页
       ·EMSA(Electrophoretic mobility shift assay)第26-28页
       ·抗生素母液配方第28页
       ·GUS分析相关试剂:第28-29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·方法第30-37页
     ·盆栽试验第30页
     ·TA克隆及测序分析第30-32页
       ·电转感受态细胞的制备第30-31页
       ·化转感受态细胞的制备第31页
       ·质粒化转第31页
       ·质粒电转第31-32页
     ·生物信息学分析第32页
     ·突变体系载体构建第32-33页
     ·发根农杆菌K599 介导的紫云英转化第33-34页
     ·转化根中总蛋白提取第34页
     ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量第34-35页
     ·GUS酶活测定第35-37页
3 结果与分析第37-56页
   ·AsPT1 及AsPT4 基因启动子受菌根信号调控元件分析第37-44页
     ·AsPT1 基因启动子受菌根信号调控元件分析第37-40页
       ·AsPT1 基因启动子调控元件侵染情况检测第37-39页
       ·AsPT1 基因启动子调控元件GUS酶活检测第39-40页
     ·AsPT4 基因启动子调控元件功能检测与分析第40-44页
       ·AsPT4 基因启动子调控元件侵染情况检测第40-42页
       ·AsPT4 基因启动子调控元件GUS酶活大小的检测第42-44页
   ·AsPT1 和AsPT4 基因启动子磷信号调控元件分析第44-56页
     ·AsPT1 突变体系高磷与低磷条件下侵染情况第45-49页
       ·AsPT1 基因启动子突变体系GUS染色结果第47-48页
       ·AsPT1 基因启动子突变体系GUS酶活检测第48-49页
     ·AsPT4 基因启动子磷信号调控元件分析第49-52页
       ·AsPT4 基因启动子调控元件侵染情况检测第49-52页
     ·AsPT4 基因启动子缺失突变体系GUS检测结果第52-54页
       ·AsPT4 突变体系GUS酶活检测第53-54页
     ·MYCS与P1BS元件的分析结果第54-56页
4 讨论第56-60页
   ·AsPT1 基因启动子中顺式作用元件功能分析第56-57页
   ·AsPT4 基因启动子中顺式作用元件功能分析第57-58页
   ·磷转运基因启动子上顺式作用元件第58-60页
5 参考文献第60-67页
6 附录第67-72页
7 致谢第72页

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