摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-15页 |
·1,3-丙二醇特性及其应用 | 第7页 |
·1,3-丙二醇的合成 | 第7-11页 |
·1,3-丙二醇的合成方法 | 第7页 |
·发酵生产1,3-丙二醇的菌种 | 第7-8页 |
·克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇 | 第8-9页 |
·微生物合成1,3-丙二醇研究进展 | 第9-11页 |
·2,3-丁二醇研究 | 第11-13页 |
·2,3-丁二醇性质及用途 | 第11页 |
·2,3-丁二醇的合成方法 | 第11-13页 |
·2,3-丁二醇的生理意义 | 第13页 |
·反义RNA技术 | 第13-14页 |
·本论文的研究意义及研究内容 | 第14-15页 |
·研究意义 | 第14页 |
·研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
·实验材料 | 第15-16页 |
·菌种与质粒 | 第15页 |
·主要生化试剂 | 第15页 |
·实验仪器 | 第15-16页 |
·培养基 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-20页 |
·培养方法 | 第16页 |
·克雷伯氏菌基因组提取方法 | 第16页 |
·引物设计及PCR扩增 | 第16-17页 |
·酶切、连接及质粒转化方法 | 第17页 |
·测定方法 | 第17-18页 |
·细菌总RNA的提取 | 第18页 |
·内参基因和目的基因RT-PCR引物设计 | 第18页 |
·去除基因组DNA | 第18-19页 |
·逆转录获得cDNA | 第19页 |
·RT-PCR方法 | 第19-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-38页 |
·碳源对克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇的影响 | 第20-22页 |
·过表达budR对克雷伯氏菌发酵合成1,3-丙二醇的影响 | 第22-25页 |
·budR表达载体的构建 | 第22页 |
·K.pneumoniae/pEtac-budR中BudR的表达 | 第22-23页 |
·重组菌的发酵性能分析 | 第23-25页 |
·反义RNA抑制bud编码区对克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇的影响 | 第25-34页 |
·转录抑制载体的构建 | 第25-29页 |
·bud操纵子编码区转录抑制载体的构建 | 第29-30页 |
·bud编码区抑制菌株对相关基因表达的调控 | 第30-32页 |
·抑制bud编码区对克雷伯氏菌发酵合成1,3-丙二醇的影响 | 第32-34页 |
·反义RNA抑制bud非编码区对克雷伯氏菌合成1,3-丙二醇的影响 | 第34-38页 |
·bud非编码区抑制载体的构建 | 第34页 |
·抑制bud非编码区对2,3-丁二醇合成关键基因表达的调控 | 第34-36页 |
·抑制bud非编码区对克雷伯氏菌发酵产1,3-丙二醇的影响 | 第36-38页 |
主要结论与展望 | 第38-40页 |
主要结论 | 第38-39页 |
展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附录一:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45-46页 |
附录二:发卡结构序列 | 第46页 |