| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-31页 |
| 第一章 大豆异黄酮的研究概况 | 第14-19页 |
| ·大豆异黄酮的生物功效 | 第14-16页 |
| ·大豆异黄酮的弱雌激素样活性 | 第14-15页 |
| ·大豆异黄酮治疗心血管病 | 第15页 |
| ·大豆异黄酮的抗肿瘤作用 | 第15-16页 |
| ·大豆异黄酮的生物合成和物化性质 | 第16-19页 |
| ·大豆异黄酮的生物合成 | 第16-17页 |
| ·大豆异黄酮的物化性质[5] | 第17-19页 |
| 第二章 合成大豆异黄酮的基因工程研究进展 | 第19-25页 |
| ·通过基因工程在植物中合成genistein | 第19-20页 |
| ·MYB 转录因子在异黄酮代谢工程中的应用 | 第20-21页 |
| ·查尔酮合酶的研究进展 | 第21-22页 |
| ·查尔酮合酶基因结构 | 第21-22页 |
| ·CHS 的基因工程进展 | 第22页 |
| ·查尔酮异构酶的研究进展 | 第22-25页 |
| ·查尔酮异构酶基因特征 | 第22-23页 |
| ·CHI 的基因工程进展 | 第23-25页 |
| 第三章 融合基因在转基因植物中的应用研究 | 第25-28页 |
| ·多基因转化策略 | 第25-26页 |
| ·2A 肽和GS-rich 小肽的优点 | 第26-28页 |
| 第四章 大豆遗传转化体系的研究进展 | 第28-31页 |
| ·大豆遗传转化方法 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化分子机理 | 第28-29页 |
| ·大豆遗传转化的外植体比较 | 第29页 |
| ·农杆菌介导大豆遗传转化系统的改进 | 第29-31页 |
| 第二篇 研究内容 | 第31-62页 |
| 第一章 CHSK、CHIK 及其融合基因的真核表达载体构建 | 第31-45页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·大豆材料 | 第31页 |
| ·质粒和菌种 | 第31页 |
| ·酶和其它试剂 | 第31-32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-40页 |
| ·模板制备 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增CHSK 基因和CHIK 基因 | 第33-34页 |
| ·SOE-PCR 扩增SAI 和SI 融合基因 | 第34-36页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第36页 |
| ·在质粒载体中进行DNA 克隆 | 第36-38页 |
| ·目的片段与植物表达载体pBI121的连接及鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-44页 |
| ·CHSK 基因和CHIK 基因扩增产物电泳分析 | 第40-41页 |
| ·SOE-PCR 扩增融合基因扩增产物电泳分析 | 第41页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·真核表达载体构建图 | 第42页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组质粒转化根癌农杆菌的鉴定分析 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第二章 CHS、CHI 及其融合基因原核表达载体的构建及表达 | 第45-54页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·质粒和菌种 | 第45页 |
| ·酶和其它试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·目的基因的扩增 | 第45-47页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第47页 |
| ·限制性双酶切 | 第47-48页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第48页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的鉴定和测序 | 第49页 |
| ·IPTG 诱导重组蛋白的表达 | 第49页 |
| ·蛋白质SDS-PAGE 电泳分析 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-53页 |
| ·原核载体构建的电泳图分析 | 第50-52页 |
| ·原核表达的SDS-PAGE 分析 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第三章 农杆菌介导的大豆子叶节转化 | 第54-62页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·大豆材料 | 第54页 |
| ·质粒和菌种 | 第54页 |
| ·酶和其它试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·农杆菌菌液的制备 | 第55页 |
| ·大豆子叶节外植体的制备 | 第55-56页 |
| ·根癌农杆菌转化大豆子叶节 | 第56页 |
| ·丛生芽的诱导及抗性筛选 | 第56页 |
| ·不定芽的伸长及生根培养 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-61页 |
| ·大豆基因型的筛选 | 第57页 |
| ·农杆菌菌液浓度的确定 | 第57-58页 |
| ·不同侵染方式对大豆转化效率的影响 | 第58-59页 |
| ·潮霉素（hyg）筛选浓度的确定 | 第59-60页 |
| ·农杆菌转化大豆子叶节 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 培养基及缓冲液附录 | 第71-74页 |
| 附录一 培养基配方 | 第71-72页 |
| 附录二 缓冲液配方 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |