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H7N9反向遗传操作系统及H7N9和H5N2亚型禽流感病毒候选疫苗株的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
   ·禽流感分子生物学概述第12-14页
     ·结构、基因和蛋白第12-13页
     ·传播性第13-14页
   ·H7N9流行现状第14-15页
   ·致病性第15-18页
     ·血凝素HA基因第15-17页
     ·聚合酶PB2基因第17-18页
   ·疫苗研究进展第18-19页
     ·灭活疫苗第18页
     ·DNA疫苗第18-19页
     ·重组病毒载体疫苗第19页
   ·反向遗传学第19-20页
   ·本研究目的与意义第20-21页
第二章 H7N9反向遗传操作系统的构建和生物学特性的初步研究及其候选疫苗株的构建第21-32页
   ·实验材料和方法第21-27页
     ·毒株、细胞和质粒第21页
     ·主要试剂和仪器第21页
     ·CK/53和AH1序列测定比较第21-22页
     ·CK/53和AH1在不同温度、不同细胞上生长曲线的比较第22页
     ·引物设计第22-23页
     ·CK/53重组质粒的构建与鉴定第23-24页
     ·重组病毒拯救及反向遗传操作系统的验证第24页
     ·通过反向遗传系统对HA进行修饰第24-26页
     ·HA位点突变的重组病毒的制备第26页
     ·rCK/53及HA突变重组病毒的受体特异性分析第26页
     ·rCK/53病毒的生长适应性分析第26-27页
     ·疫苗株PR8-CK53的构建与评估第27页
   ·结果第27-31页
     ·CK/53和AH1的序列比较第27页
     ·CK/53和AH1在不同温度、不同细胞上生长曲线的比较第27-28页
     ·CK/53八质粒反向遗传操作系统的构建第28页
     ·重组病毒rCK/53的拯救第28-29页
     ·点突变病毒的鉴定第29页
     ·rCK/53及其他5株重组病毒受体特异性分析第29页
     ·细胞半数感染量(TCID_(50))及细胞宿主适应性分析第29-30页
     ·候选疫苗株的构建及TCID_(50)测定结果第30页
     ·rCK/53和PR8-CK53生长曲线结果第30-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 H5N2候选疫苗株的构建第32-37页
   ·实验材料和方法第32-33页
     ·毒株与质粒第32页
     ·主要试剂第32页
     ·引物设计第32-33页
     ·RNA提取及表面基因序列测定及分析第33页
     ·三株病毒表面重组质粒的构建第33页
     ·三株H5N2候选疫苗株的构建第33页
   ·结果第33-36页
     ·病毒基因序列测定及分析第33-35页
     ·重组质粒的鉴定第35-36页
     ·三株候选疫苗的拯救第36页
   ·讨论第36-37页
第四章 全文总结第37-38页
参考文献第38-44页
附录第44-47页
致谢第47-48页
作者简历第48页

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