| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-21页 |
| ·禽流感分子生物学概述 | 第12-14页 |
| ·结构、基因和蛋白 | 第12-13页 |
| ·传播性 | 第13-14页 |
| ·H7N9流行现状 | 第14-15页 |
| ·致病性 | 第15-18页 |
| ·血凝素HA基因 | 第15-17页 |
| ·聚合酶PB2基因 | 第17-18页 |
| ·疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| ·灭活疫苗 | 第18页 |
| ·DNA疫苗 | 第18-19页 |
| ·重组病毒载体疫苗 | 第19页 |
| ·反向遗传学 | 第19-20页 |
| ·本研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 H7N9反向遗传操作系统的构建和生物学特性的初步研究及其候选疫苗株的构建 | 第21-32页 |
| ·实验材料和方法 | 第21-27页 |
| ·毒株、细胞和质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第21页 |
| ·CK/53和AH1序列测定比较 | 第21-22页 |
| ·CK/53和AH1在不同温度、不同细胞上生长曲线的比较 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·CK/53重组质粒的构建与鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组病毒拯救及反向遗传操作系统的验证 | 第24页 |
| ·通过反向遗传系统对HA进行修饰 | 第24-26页 |
| ·HA位点突变的重组病毒的制备 | 第26页 |
| ·rCK/53及HA突变重组病毒的受体特异性分析 | 第26页 |
| ·rCK/53病毒的生长适应性分析 | 第26-27页 |
| ·疫苗株PR8-CK53的构建与评估 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·CK/53和AH1的序列比较 | 第27页 |
| ·CK/53和AH1在不同温度、不同细胞上生长曲线的比较 | 第27-28页 |
| ·CK/53八质粒反向遗传操作系统的构建 | 第28页 |
| ·重组病毒rCK/53的拯救 | 第28-29页 |
| ·点突变病毒的鉴定 | 第29页 |
| ·rCK/53及其他5株重组病毒受体特异性分析 | 第29页 |
| ·细胞半数感染量(TCID_(50))及细胞宿主适应性分析 | 第29-30页 |
| ·候选疫苗株的构建及TCID_(50)测定结果 | 第30页 |
| ·rCK/53和PR8-CK53生长曲线结果 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 H5N2候选疫苗株的构建 | 第32-37页 |
| ·实验材料和方法 | 第32-33页 |
| ·毒株与质粒 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·RNA提取及表面基因序列测定及分析 | 第33页 |
| ·三株病毒表面重组质粒的构建 | 第33页 |
| ·三株H5N2候选疫苗株的构建 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-36页 |
| ·病毒基因序列测定及分析 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·三株候选疫苗的拯救 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 全文总结 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 附录 | 第44-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简历 | 第48页 |