| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| ·蓝舌病概述 | 第12页 |
| ·病原学特点 | 第12-13页 |
| ·理化学特性 | 第13页 |
| ·BTV的流行病学特征 | 第13页 |
| ·基因组结构和功能 | 第13-16页 |
| ·外层结构蛋白：VP2和VP5 | 第13-14页 |
| ·主要核心蛋白：VP3和VP7 | 第14-15页 |
| ·三个次要核心蛋白：VP1、VP4和VP6 | 第15页 |
| ·非结构蛋白：NS1、NS2、NS3/NS3a和NS4 | 第15-16页 |
| ·BTV的复制过程 | 第16页 |
| ·发病机理 | 第16-17页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第17页 |
| ·BT的诊断 | 第17页 |
| ·BT的防控 | 第17-18页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 BTV3 VP2蛋白的原核表达和抗原性检测 | 第19-25页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·病毒、细胞、感受态、表达载体 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要培养基及溶液的配制 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-23页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·BTV3病毒RNA的提取及反转录 | 第20页 |
| ·BTV3 L2基因的扩增、鉴定 | 第20-21页 |
| ·VP2蛋白原核表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·VP2蛋白的原核表达和western-blot分析 | 第22页 |
| ·原核表达重组VP2蛋白的纯化 | 第22-23页 |
| ·Western-Blot检测纯化原核表达重组VP2蛋白 | 第23页 |
| ·结果 | 第23-24页 |
| ·L2基因的RT-PCR鉴定结果 | 第23页 |
| ·重组质粒pMal-vp2的双酶切鉴定结果 | 第23-24页 |
| ·纯化的重组原核表达蛋白MBP-VP2的western-blot分析 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 BTV3 VP2蛋白的真核表达和抗原性检测 | 第25-31页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·细胞、感受态、表达载体 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要溶液的配制 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-29页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·L2基因的PCR扩增和鉴定 | 第26页 |
| ·VP2蛋白真核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·昆虫细胞sf21中重组杆状病毒的获得 | 第28页 |
| ·重组杆状病毒BACV-VP2在昆虫细胞中的表达和SDS分析 | 第28页 |
| ·真核重组VP2蛋白的纯化和western-blot分析 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-30页 |
| ·L2基因的PCR扩增结果 | 第29页 |
| ·重组质粒pFast-vp2的双酶切鉴定结果 | 第29页 |
| ·纯化的重组真核表达蛋白His-VP2的western-blot分析 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 BTV3 VP2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·细胞、病毒及实验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·动物免疫 | 第31页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第31-32页 |
| ·细胞融合 | 第32-33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆、冻存 | 第33页 |
| ·MAb腹水的制备及其效价的测定 | 第33-34页 |
| ·MAb的鉴定 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-36页 |
| ·间接ELISA方法的建立 | 第34页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的获得 | 第34-35页 |
| ·MAb亚类的鉴定 | 第35页 |
| ·MAb的western-blot鉴定 | 第35页 |
| ·MAb的IFA鉴定 | 第35-36页 |
| ·腹水效价和杂交瘤细胞株抗体分泌稳定性的测定 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 第五章 BTV3 VP2蛋白抗原表位的鉴定 | 第37-43页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-38页 |
| ·BTV3 VP2蛋白的截短表达 | 第37页 |
| ·2F8和4E8抗原表位的初步鉴定 | 第37页 |
| ·2F8和4E8抗原表位的进一步鉴定 | 第37页 |
| ·2F8和4E8抗原保守性分析 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-41页 |
| ·基因L2-(1～14)的PCR扩增 | 第38页 |
| ·2F8和4E8抗原表位的初步鉴定和精确鉴定 | 第38-39页 |
| ·2F8和4E8抗原保守性分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第六章 全文结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简历 | 第50页 |
