| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 目录 | 第14-17页 |
| 缩略词表 | 第17-18页 |
| 第一部分 实验研究 | 第18-63页 |
| 第一章 毛囊细胞特异性表达载体的构建 | 第18-40页 |
| 摘要 | 第18-20页 |
| 1 实验材料 | 第20-21页 |
| ·质粒和菌株 | 第20页 |
| ·主要试剂和实验材料 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-30页 |
| ·载体pcDNA4的改造 | 第21-22页 |
| ·LEF1基因和KAP6-1基因启动子的分子克隆以及表达载体pcDNA4-KL的构建 | 第22-30页 |
| 3 结果 | 第30-37页 |
| ·原表达载体pcDNA4的改造 | 第30-32页 |
| ·PCR扩增产物的回收以及限制性内切酶酶切 | 第32-34页 |
| ·KAP6.1基因启动子片段代替pcDNA4载体中的CMV启动子 | 第34-35页 |
| ·表达载体pcDNA-KL的构建 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第二章 胎儿成纤维细胞的体外培养及共转染 | 第40-55页 |
| 摘要 | 第40-41页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| ·实验仪器设备 | 第41页 |
| ·实验试剂 | 第41-42页 |
| 2 方法 | 第42-47页 |
| ·原代胎儿皮肤成纤维细胞的分离及体外培养 | 第42页 |
| ·胎儿皮肤成纤维细胞的冷冻保存 | 第42页 |
| ·胎儿皮肤成纤维细胞的解冻复苏培养 | 第42-43页 |
| ·双载体共转染胎儿成纤维细胞 | 第43-45页 |
| ·转基因绒山羊胎儿成纤维细胞克隆的PCR鉴定 | 第45-47页 |
| 3 结果 | 第47-52页 |
| ·双载体共转染成纤维细胞 | 第47-48页 |
| ·转基因胎儿成纤维细胞克隆的体外筛选 | 第48-50页 |
| ·转基因细胞克隆的PCR鉴定 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 第三章 四环素诱导基因LEF1在成纤维细胞中的表达 | 第55-63页 |
| 摘要 | 第55页 |
| 1 材料 | 第55-56页 |
| ·实验试剂和材料 | 第55页 |
| ·实验仪器设备 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-58页 |
| ·转基因细胞复苏及培养 | 第56页 |
| ·四环素诱导转基因细胞 | 第56-57页 |
| ·转基因细胞总RNA的提取及cDNA的合成 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第二部分 文献综述 | 第63-73页 |
| 1 四环素诱导的基因表达系统的研究进展 | 第63-68页 |
| 2 促毛囊生长发育相关生长因子的研究进展 | 第68-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第80页 |
