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表达猪抗菌肽PF1和PR39重组干酪乳杆菌的构建及其生物学活性测定

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-21页
   ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的研究进展第12-15页
     ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的结构特点第13-14页
     ·猪源抗菌肽 PR39 和 PF1 的结构特点第14-15页
   ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的生物学功能第15-18页
     ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的抗菌作用及抗菌机理第15-17页
     ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的抗肿瘤作用第17页
     ·猪源 Cathelicidin 抗菌肽的免疫调节作用第17-18页
   ·乳酸杆菌表达外源基因的研究进展第18-19页
   ·本研究的目的与意义第19-21页
2 材料与方法第21-36页
   ·材料第21-24页
     ·实验动物第21页
     ·抗体试剂第21页
     ·质粒与菌种第21页
     ·引物第21-22页
     ·实验试剂第22-23页
     ·培养基第23页
     ·仪器设备第23-24页
   ·实验方法第24-36页
     ·基因 PF1-PR39 和 PR39 的获得第24-25页
     ·表达 PR39 基因重组大肠杆菌的构建第25-27页
     ·PR39 基因在大肠杆菌中的诱导表达第27-28页
     ·重组蛋白抑菌活性检测第28-29页
     ·PR39 基因与 PF1-PR39 基因重组干酪乳杆菌的构建第29-31页
     ·重组干酪乳杆菌的诱导表达及鉴定第31-32页
     ·外源基因 PR39 和 PF1-PR39 对重组菌生长曲线的影响第32页
     ·重组干酪乳杆菌体外抑菌实验第32页
     ·口服重组干酪乳杆菌小鼠生理指标的测定第32-33页
     ·口服重组菌对小鼠外周血淋巴细胞和白细胞数量的影响第33-34页
     ·口服重组菌对小鼠肠绒毛发育形态的影响第34页
     ·应用 PCR-DGGE 分析口服重组菌后小鼠粪便菌群结构的多样性第34-35页
     ·重组干酪乳杆菌对产肠毒素大肠埃希氏菌灌服小鼠保护作用第35-36页
3 结果第36-52页
   ·基因 PF1-PR39 和 PR39 的获得第36-37页
   ·大肠杆菌重组质粒 pCold-PR39 的鉴定结果第37页
   ·PR39 基因在大肠杆菌中的诱导表达及鉴定第37-39页
     ·表达产物的 SDS-PAGE 鉴定第37-38页
     ·Western Blot 鉴定 PR39 重组蛋白第38-39页
   ·重组蛋白抑菌活性检测第39-40页
   ·PR39 基因与 PF1-PR39 基因重组干酪乳杆菌的构建第40-41页
   ·重组干酪乳杆菌的诱导表达及鉴定第41-43页
   ·外源基因 PR39 和 PF1-PR39 对重组菌生长曲线的影响第43-44页
   ·重组干酪乳杆菌体外抑菌实验结果第44-45页
   ·口服重组菌对小鼠生长性能的影响第45-46页
   ·口服重组菌对小鼠白细胞数和淋巴细胞比率和脾脏指数的影响第46-47页
   ·口服重组菌对小鼠肠绒毛发育形态的影响第47-49页
   ·应用 PCR-DGGE 分析口服重组菌后小鼠粪便菌群结构的多样性第49-51页
   ·重组菌对产肠毒素大肠埃希菌口服小鼠的保护作用第51-52页
4 讨论第52-56页
   ·PR39 与 PF1-PR39 重组蛋白的表达及其结构分析第52-53页
   ·表达 PR39 与 PF1-PR39 蛋白重组菌的抑菌作用分析第53页
   ·表达 PR39 与 PF1-PR39 蛋白的重组菌免疫调节作用分析第53-54页
   ·表达猪抗菌肽重组干酪乳杆菌的潜在应用价值第54-56页
5 结论第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-63页
附录第63-64页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第64页

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