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猪四倍体胚胎制作和4 N-2 N胚胎嵌合制作

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-22页
   ·嵌合体第12页
     ·嵌合体定义第12页
     ·嵌合体的研究意义第12页
   ·嵌合体的研究进展第12-13页
   ·嵌合体的制作技术与检测第13-14页
     ·嵌合体的制作方法第13-14页
     ·哺乳动物嵌合体制作原理第14页
     ·嵌合体的鉴定第14页
   ·四倍体胚胎制作与四倍体嵌合研究进展第14-20页
     ·四倍体的定义第14页
     ·四倍体嵌合研究意义第14-15页
     ·哺乳动物四倍体胚胎制作方法第15-16页
     ·电融合法第16-18页
     ·四倍体胚胎的发育及 4 N/2 N 嵌合研究进展第18-20页
   ·猪嵌合体制作与研究现状第20页
   ·本研究目的和意义第20-22页
2 材料与方法第22-29页
   ·试验材料第22页
   ·主要仪器和设备第22页
   ·主要试剂和液体配制第22页
   ·卵母细胞-卵丘复合体(COCs)的获取第22-23页
   ·COCs 的体外成熟培养第23页
   ·卵丘细胞的去除和成熟卵母细胞的分选第23-24页
     ·透明质酸酶的配制和储存第23页
     ·卵丘细胞的去除和成熟卵母细胞的分选第23-24页
   ·体外受精(In vitro fertilization,IVF)第24页
   ·慢病毒(LV)注射制作转基因(GFP)绿色胚胎第24页
   ·猪 IVF 2-Cell 胚胎的挑选第24页
   ·四倍体胚胎的制作第24-25页
   ·胚胎去透明带第25页
   ·WOW(Well of the Well)培养体系第25-26页
   ·不同发育时期胚胎的聚合第26页
   ·囊胚中显微注射 IPS 细胞第26-27页
   ·囊胚率的观察第27-28页
   ·FISH 检测 4 N 胚胎倍性第28页
   ·试验数据统计分析第28-29页
3 结果与分析第29-41页
   ·四倍体胚胎制作体系的优化第29-30页
   ·荧光原位杂交技术(FISH)检测四倍体倍性第30-31页
   ·猪胚胎(2 N 和 4 N)体外培养发育时程第31-35页
   ·4 N-2 N 聚合嵌合最佳时期探索第35页
   ·4 N-2 N 胚胎嵌合后不同倍性细胞分布特征第35-38页
   ·四倍体胚胎与 IPS 细胞嵌合研究第38-41页
     ·夹心法聚合嵌合第38-39页
     ·4 N 囊胚中注射 IPS 细胞第39-41页
4 讨论第41-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-49页
附录第49-54页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第54页

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