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富硒大蒜含硒蛋白提取分离、初步纯化及抗氧化活性的研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 前言第14-31页
 1 文献综述第14-29页
   ·微量元素硒的概况第14-17页
     ·硒的存在形式第14-15页
     ·硒的生物学功能第15-16页
     ·硒的缺乏及科学补硒的重要性第16-17页
     ·关于硒定量分析的方法第17页
   ·富硒大蒜的研究进展第17-22页
     ·富硒大蒜中硒的分布及含硒生物大分子的研究第18-19页
     ·富硒大蒜生物活性的研究第19-22页
   ·硒蛋白的研究进展第22-29页
     ·硒蛋白的分类第22-24页
     ·硒蛋白的提取分离、纯化与分析的研究第24-29页
 2 研究目的及意义第29-31页
第二章 大蒜中硒含量测定方法的研究第31-41页
 1 材料与方法第31-35页
   ·材料、试剂与仪器第31-33页
     ·实验材料第31-32页
     ·试剂及标准溶液的配制第32-33页
     ·仪器设备第33页
   ·实验方法第33-35页
     ·样品的消化及处理研究第33页
     ·荧光物质生成条件的研究第33-34页
     ·荧光分光光度仪测定条件的研究第34页
     ·线性范围及方法检出限第34页
     ·精密度试验第34页
     ·加标回收率试验第34-35页
     ·样品的测定第35页
 2 结果与分析第35-40页
   ·样品消化条件的优化第35-36页
     ·消化温度的确定第35-36页
     ·消化时间的确定第36页
   ·荧光物质生成条件的确定第36-37页
   ·荧光分光光度仪仪器条件的优化第37-38页
     ·激发波长和发射波长的确定第37-38页
     ·激发光谱和发射光谱狭缝宽度的确定第38页
   ·线性范围及方法检出限第38页
   ·精密度及加标回收率第38-39页
   ·样品的测定第39-40页
 3 讨论第40-41页
第三章 富硒大蒜含硒蛋白的提取分离第41-64页
 1 材料与方法第41-49页
   ·材料、试剂与仪器第41-43页
     ·实验材料第41-42页
     ·试剂第42页
     ·仪器设备第42-43页
   ·实验方法第43-49页
     ·大蒜粉主要成分分析第43-44页
     ·富硒大蒜蛋白质的分级第44-45页
     ·水溶性含硒蛋白提取工艺的优化第45-46页
     ·大蒜水溶性蛋白理化成分分析第46-49页
 2 结果与分析第49-62页
   ·大蒜粉的主要成分及矿物元素分析第49-50页
     ·主要成分分析第49页
     ·矿物元素分析第49-50页
   ·富硒蒜粉蛋白质的分级及分析第50-51页
   ·水溶性含硒蛋白提取工艺的优化第51-56页
     ·提取溶剂的确定第51-52页
     ·单因素试验第52-55页
     ·正交试验确定蛋白的最佳提取条件第55-56页
     ·硫酸铵沉淀水溶性蛋白最佳饱和度的确定第56页
   ·大蒜水溶性蛋白理化特性分析第56-62页
     ·化学成分分析第56-57页
     ·氨基酸组成分析第57-58页
     ·等电点的测定第58页
     ·蛋白质电泳分析第58-59页
     ·傅里叶红外光谱(FT-IR)分析第59-61页
     ·差示扫描量热仪(DSC)分析第61-62页
 3 讨论第62-64页
第四章 富硒大蒜水溶性含硒蛋白的分离纯化第64-77页
 1 材料与方法第65-69页
   ·材料、试剂与仪器第65-66页
     ·实验材料第65页
     ·试剂第65-66页
     ·仪器设备第66页
   ·实验方法第66-69页
     ·富硒大蒜水溶性含硒粗蛋白的制备第66页
     ·DEAE-52纤维素离子交换层析纯化含硒蛋白第66-67页
     ·葡聚糖凝胶层析纯化含硒蛋白第67-68页
     ·SDS-PAGE电泳分析第68页
     ·蛋白峰蛋白含量和硒含量的测定第68页
     ·蛋白峰抗氧化活性测定第68-69页
 2 结果与分析第69-75页
   ·DEAE-52纤维素离子交换层析纯化含硒蛋白第69-71页
     ·溶液pH的选择第69页
     ·洗脱条件的确定第69-70页
     ·DEAE-52纤维素纯化含硒蛋白第70-71页
   ·葡聚糖凝胶纯化含硒蛋白第71-72页
     ·Sephadex G-100纯化含硒蛋白第71页
     ·DEAE-52结合葡聚糖凝胶纯化含硒蛋白第71-72页
   ·SDS-PAGE电泳分析第72-73页
   ·不同蛋白层析峰中蛋白质含量及硒含量测定第73-74页
   ·蛋白层析峰抗氧化活性测定第74-75页
 3 讨论第75-77页
第五章 富硒大蒜含硒蛋白体外抗氧化活性的研究第77-94页
 1 材料与方法第78-81页
   ·材料、试剂与仪器第78-79页
     ·实验材料第78页
     ·试剂第78页
     ·仪器设备第78-79页
   ·实验方法第79-81页
     ·各蛋白级分的制备及样品溶液的配制第79页
     ·对羟基自由基的清除作用第79页
     ·对超氧阴离子的清除作用第79页
     ·对双氧水的清除作用第79-80页
     ·对DNA损伤的保护作用第80页
     ·化学发光体系数据处理第80页
     ·对DPPH的清除作用第80页
     ·对小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)生成的影响第80-81页
     ·数据处理第81页
 2 结果与分析第81-92页
   ·各蛋白级分中蛋白质浓度和硒含量比较第81-82页
   ·对羟基自由基的清除作用第82-85页
   ·对超氧阴离子的清除作用第85-86页
   ·对双氧水的清除作用第86-88页
   ·对DNA损伤的保护作用第88-89页
   ·对DPPH的清除作用第89-90页
   ·对小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)生成量的影响第90-91页
   ·富硒大蒜含硒粗蛋白抗氧化活性与其硒含量的相关性分析第91-92页
 3 讨论第92-94页
第六章 富硒大蒜含硒蛋白稳定性与抗氧化活性研究第94-109页
 1 材料与方法第94-97页
   ·材料、试剂与仪器第94-95页
     ·实验材料第94-95页
     ·试剂第95页
     ·仪器设备第95页
   ·实验方法第95-97页
     ·富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性的研究第95-97页
     ·抗氧化活性的变化第97页
     ·数据统计第97页
 2 结果与分析第97-108页
   ·温度对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性的影响第97-99页
   ·pH值对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性的影响第99-101页
   ·中性盐对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性的影响第101-103页
   ·蔗糖对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性的影响第103-104页
   ·金属离子对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性影响第104-106页
   ·变性剂脲对富硒大蒜水溶性含硒蛋白稳定性及抗氧化活性影响第106-108页
 3 讨论第108-109页
第七章 结论第109-112页
参考文献第112-123页
致谢第123页

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