白背飞虱对农药敏感度测定及相对敏感种群AChE基因片段克隆研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 1 白背飞虱概述 | 第9-11页 |
| ·白背飞虱形态特征 | 第9-10页 |
| ·白背飞虱生物特征 | 第10-11页 |
| 2 白背飞虱危害 | 第11-12页 |
| ·白背飞虱取食水稻的危害 | 第11页 |
| ·白背飞虱传播病毒的危害 | 第11-12页 |
| 3 白背飞虱药剂防治 | 第12-13页 |
| 4 白背飞虱抗药性产生的机制 | 第13-18页 |
| ·AChE的结构 | 第13-16页 |
| ·AChE与抗性产生的生化机制 | 第16-17页 |
| ·AChE与抗性产生的基因突变机制 | 第17-18页 |
| ·Ace单基因突变与昆虫抗性的产生 | 第17页 |
| ·Ace多基因组合突变与昆虫抗性的产生 | 第17-18页 |
| 5 研究意义 | 第18-20页 |
| ·白背飞虱对主要防治药剂敏感度监测 | 第18页 |
| ·白背飞虱AChE基因克隆 | 第18-20页 |
| 第二章 白背飞虱对农药敏感性的室内毒力实验 | 第20-32页 |
| 1 材料与方法 | 第20-21页 |
| ·主要仪器、材料和试剂 | 第20页 |
| ·白背飞虱室内饲养 | 第20-21页 |
| ·室内饲养白背飞虱条件 | 第20页 |
| ·烧杯饲养法 | 第20页 |
| ·养虫笼饲养法 | 第20-21页 |
| ·白背飞虱对防治药剂的敏感度测定 | 第21页 |
| ·数据处理与分析 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-28页 |
| ·白背飞虱的饲养 | 第21-23页 |
| ·室内饲养白背飞虱的新发现 | 第23页 |
| ·白背飞虱对防治药剂敏感度 | 第23-28页 |
| ·相对敏感种群敏感度 | 第23-24页 |
| ·湖南省不同地区白背飞虱种群对5种药剂敏感度 | 第24-28页 |
| 3 讨论 | 第28-32页 |
| ·室内饲养白背飞虱与其习性和形态分析 | 第28页 |
| ·相对敏感种群的敏感度 | 第28-29页 |
| ·湖南省不同地区白背飞虱种群对农药的敏感度 | 第29-32页 |
| 第三章 白背飞虱AChE基因片段的克隆与分析 | 第32-46页 |
| 1 材料与方法 | 第32-42页 |
| ·白背飞虱种群收集、菌株、质粒 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·总RNA的提取 | 第33-35页 |
| ·Trizol法提取总RNA | 第33页 |
| ·硅粒吸附法提取RNA | 第33-34页 |
| ·试剂盒方法提取昆虫总RNA | 第34-35页 |
| ·RT-PCR反应 | 第35页 |
| ·cDNA的合成 | 第35页 |
| ·PCR反应 | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·PCR产物试剂盒纯化 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的割胶回收 | 第37-38页 |
| ·PCR产物的连接 | 第38页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·RbCl方法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第38页 |
| ·Hanahan方法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第38-39页 |
| ·连接载体转化入大肠杆菌 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的菌落PCR筛选 | 第40页 |
| ·质粒抽提 | 第40-41页 |
| ·重组质粒测序 | 第41-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-44页 |
| ·RT-PCR克隆 | 第42页 |
| ·转化后抗性筛选平板图 | 第42-43页 |
| ·菌落PCR电泳图 | 第43页 |
| ·质粒抽提电泳图 | 第43-44页 |
| ·序列测定与分析 | 第44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 附录A 本论文所用重要缩写词及中文对照 | 第53-55页 |
| 附录B 本实验常用缓冲液及培养基配方 | 第55-58页 |
| 附录C 本实验常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第58-60页 |
| 附录D 克隆的cDNA序列 | 第60-61页 |
| 附录E 褐飞虱乙酰胆碱酯酶基因序列 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
