| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1 引言 | 第12-14页 |
| 2 实验材料 | 第14-20页 |
| ·质粒与癌细胞株 | 第14页 |
| ·引物设计 | 第14页 |
| ·抗体 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·仪器设备 | 第15-17页 |
| ·主要试剂及其配置 | 第17-20页 |
| 3 实验方法 | 第20-31页 |
| ·真核表达载体的扩增、提取和鉴定 | 第20-21页 |
| ·扩增 | 第20页 |
| ·质粒的提取 | 第20-21页 |
| ·质粒的鉴定及浓度测定 | 第21页 |
| ·人肺癌A549细胞的培养及细胞转染 | 第21-22页 |
| ·细胞的复苏 | 第21页 |
| ·细胞的消化与传代 | 第21-22页 |
| ·细胞的冻存 | 第22页 |
| ·细胞的转染 | 第22页 |
| ·人pEGFP-4.1N在人肺癌A549细胞中的表达 | 第22-28页 |
| ·RT-PCR方法鉴定pEGFP-4.1N在肺癌细胞A549中mRNA水平的表达 | 第23-25页 |
| ·Western Blot鉴定pEGFP-4.1N在肺癌细胞A549中蛋白水平的表达 | 第25-28页 |
| ·转染4.1N基因对肺癌A549细胞生物学特性的影响 | 第28-30页 |
| ·细胞增殖实验(MTT法) | 第28页 |
| ·细胞粘附实验(cell adhesion assay) | 第28-29页 |
| ·细胞划痕实验(wound healing assay) | 第29页 |
| ·细胞迁移实验 | 第29页 |
| ·细胞侵袭实验(nvasion in vitro assay) | 第29-30页 |
| ·转染4.1N基因对肺癌A549细胞细胞周期的影响 | 第30页 |
| ·统计学方法分析处理数据 | 第30-31页 |
| 4 实验结果 | 第31-42页 |
| ·质粒的提取、鉴定及浓度纯度的测定 | 第31-32页 |
| ·质粒的提取与鉴定 | 第31页 |
| ·质粒浓度纯度的测定 | 第31-32页 |
| ·细胞转染效果 | 第32页 |
| ·真核表达载体pEGFP-4.1N在人肺癌A549细胞中的表达 | 第32-35页 |
| ·RT-PCR方法鉴定真核表达载体pEGFP-4.1N在肺癌细胞A549中mRNA水平的表达的结果 | 第33-34页 |
| ·Western blot鉴定真核表达载体pEGFP-4.1N在肺癌细胞A549中蛋白水平的表达的结果 | 第34-35页 |
| ·转染4.1N基因对肺癌A549细胞生物学特性的影响 | 第35-40页 |
| ·蛋白4.1N对A549细胞增殖的影响 | 第35-36页 |
| ·蛋白4.1N对A549细胞与细胞外基质Fn粘附能力的影响 | 第36-37页 |
| ·蛋白4.1N对A549细胞体外迁移能力的影响 | 第37-39页 |
| ·蛋白4.1N对A549细胞体外侵袭能力的影响 | 第39-40页 |
| ·转染4.1N基因对肺癌A549细胞周期的影响的结果 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-47页 |
| 6 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
| 综述 | 第51-66页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
