第一章 文献综述 | 第1-20页 |
1.1 胶原蛋白概述 | 第8-10页 |
1.2 胶原的氨基酸组成 | 第10-11页 |
1.3 胶原的结构 | 第11-12页 |
1.4 胶原的生物合成 | 第12页 |
1.5 胶原的理化性质 | 第12-15页 |
1.5.1 胶原的两性电解质性质和等电点 | 第12-13页 |
1.5.2 胶原的胶体性质 | 第13-14页 |
1.5.3 与酸、碱的作用 | 第14页 |
1.5.4 与盐的作用 | 第14-15页 |
1.6 胶原蛋白的应用 | 第15-17页 |
1.6.1 医疗应用 | 第15-16页 |
1.6.2 美容、矫形 | 第16-17页 |
1.6.3 硬组织修复 | 第17页 |
1.7 动物体胶原蛋白的局限性及国内外研究现状 | 第17-18页 |
1.8 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
第二章 实验材料与方法 | 第20-27页 |
2.1 菌种 | 第20页 |
2.2 培养基 | 第20-21页 |
2.2.1 平板培养基与种子培养基 | 第20页 |
2.2.2 发酵培养基与补料培养基 | 第20-21页 |
2.3 主要仪器和设备 | 第21页 |
2.4 实验方法 | 第21-22页 |
2.4.1 固体培养 | 第21页 |
2.4.2 一级种子培养 | 第21页 |
2.4.3 二级种子培养 | 第21-22页 |
2.4.4 发酵培养 | 第22页 |
2.5 分析方法 | 第22-27页 |
2.5.1 菌体浓度测定 | 第22页 |
2.5.2 葡萄糖浓度测定 | 第22页 |
2.5.3 蛋白质含量的测定 | 第22-24页 |
2.5.4 质粒稳定性测定 | 第24页 |
2.5.5 类人胶原蛋白的检测 | 第24-27页 |
2.5.5.1 定性测定 | 第24-25页 |
2.5.5.2 定量测定 | 第25-27页 |
第三章 重组类人胶原蛋白基因工程菌发酵工艺研究 | 第27-44页 |
3.1 重组质粒稳定性的研究 | 第27-30页 |
3.1.1 温度对质粒稳定性的影响 | 第28页 |
3.1.2 卡那霉素浓度对质粒稳定性的影响 | 第28-29页 |
3.1.3 传代次数对质粒稳定性的影响 | 第29-30页 |
3.2 摇瓶优化工艺的探讨 | 第30-36页 |
3.2.1 葡萄糖与酵母粉用量之比的选择 | 第30-31页 |
3.2.2 发酵时间的优化 | 第31-32页 |
3.2.3 正交实验 | 第32-36页 |
3.3 发酵罐实验 | 第36-42页 |
3.3.1 搅拌转速对溶氧及发酵的影响 | 第36-39页 |
3.3.2 糖浓度与细胞生长的关系 | 第39-41页 |
3.3.3 类人胶原蛋白的诱导及表达 | 第41-42页 |
3.4 本章小结 | 第42-44页 |
第四章 重组人源型胶原蛋白补料分批发酵过程动力学研究 | 第44-51页 |
4.1 前言 | 第44页 |
4.2 分批发酵阶段 | 第44-47页 |
4.2.1 模型建立 | 第45-46页 |
4.2.2 模型验证 | 第46-47页 |
4.3 补料分批发酵阶段 | 第47-49页 |
4.3.1 模型建立 | 第47-48页 |
4.3.2 近似指数流加培养 | 第48-49页 |
4.4 本章小结 | 第49-51页 |
第五章 重组类人胶原蛋白提取纯化技术研究 | 第51-58页 |
5.1 发酵液的预处理 | 第51页 |
5.2 细胞破碎 | 第51-52页 |
5.3 超滤 | 第52页 |
5.4 分级分离中(NH_4)_2SO_4饱和度的选择 | 第52-53页 |
5.5 提取分离工艺 | 第53-54页 |
5.6 类人胶原蛋白的性质分析 | 第54-58页 |
第六章 对今后工作的几点建议 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |