| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-20页 |
| 符号及缩略语的中英文对照 | 第20-22页 |
| 第一部分 文献综述 | 第22-54页 |
| 第一章 环境胁迫对鱼类生长和生理机能影响的研究进展 | 第22-32页 |
| 1 环境胁迫概念及分类 | 第22页 |
| 2 鱼类在环境胁迫下的生理状态及神经内分泌机制 | 第22-25页 |
| ·鱼类在环境胁迫下的生理状态 | 第22-23页 |
| ·鱼类在环境胁迫下的神经内分泌机制 | 第23-25页 |
| 3 环境胁迫的主要评价指标 | 第25-26页 |
| ·皮质醇 | 第25页 |
| ·葡萄糖和乳酸 | 第25-26页 |
| ·溶菌酶 | 第26页 |
| ·热休克蛋白70 | 第26页 |
| 4 环境胁迫对生长的影响 | 第26-27页 |
| 5 环境胁迫对行为的影响 | 第27页 |
| 6 环境胁迫对内分泌和繁殖的影响 | 第27-28页 |
| 7 环境胁迫对免疫系统的影响 | 第28-32页 |
| ·环境胁迫对免疫组织、器官的影响 | 第29页 |
| ·环境胁迫对免疫细胞的影响 | 第29页 |
| ·环境胁迫对体液免疫因子的影响 | 第29-32页 |
| 第二章 大黄素和维生素C的生理功能及其在水产饲料中的应用 | 第32-42页 |
| 1 大黄素研究概况及其在水产饲料中的应用 | 第32-35页 |
| ·大黄及其有效成分 | 第32页 |
| ·大黄素的结构和理化性质 | 第32-33页 |
| ·大黄素的药理作用 | 第33-35页 |
| ·抗病毒和抑菌消炎作用 | 第33页 |
| ·抗氧化、清除氧自由基及免疫调节作用 | 第33-34页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第34页 |
| ·保护肝脏和抗肝纤维化作用 | 第34页 |
| ·降血脂及对心脑血管病的作用 | 第34页 |
| ·其它方面作用 | 第34-35页 |
| ·大黄素在水产饲料中应用的研究现状及前景 | 第35页 |
| 2 维生素C的研究概况及其在水产饲料中的应用 | 第35-42页 |
| ·Vc的结构和理化性质 | 第35-36页 |
| ·Vc源的种类及其稳定性 | 第36页 |
| ·Vc的生理功能 | 第36-38页 |
| ·Vc与体内的羟化反应 | 第36-37页 |
| ·Vc参与体内的氧化还原反应 | 第37页 |
| ·Vc参与解毒作用 | 第37页 |
| ·Vc参与免疫、抗应激作用 | 第37页 |
| ·Vc的其它功能 | 第37-38页 |
| ·Vc在水产饲料中应用的研究进展 | 第38-42页 |
| ·Vc对水产动物生长发育的影响 | 第38页 |
| ·Vc对水产动物免疫力的影响 | 第38-39页 |
| ·Vc对水产动物抗应激能力的影响 | 第39-40页 |
| ·Vc对水产动物繁殖力的影响 | 第40页 |
| ·展望 | 第40-42页 |
| 第三章 热休克蛋白70的研究进展 | 第42-54页 |
| 1 HSP70家族分类及生物学特性 | 第42-43页 |
| 2 HSP70家族基因特点和蛋白结构 | 第43-45页 |
| ·HSP70家族基因特点 | 第43页 |
| ·HSP70家族分子结构 | 第43-45页 |
| 3 HSP70家族基因转录、翻译及调控 | 第45-47页 |
| ·热休克元件 | 第45页 |
| ·热休克因子 | 第45-46页 |
| ·HSP70s基因的转录激活过程 | 第46-47页 |
| ·转录后水平(翻译水平)的调控 | 第47页 |
| 4 HSP70家族的生物学功能 | 第47-49页 |
| ·分子伴侣功能 | 第47-48页 |
| ·抗氧化作用 | 第48页 |
| ·协同免疫作用 | 第48-49页 |
| ·抗细胞凋亡作用 | 第49页 |
| 5 水生动物HSP70的研究概况 | 第49-52页 |
| 6 HSP70家族研究展望 | 第52-54页 |
| 第二部分 试验研究 | 第54-154页 |
| 第四章 团头鲂两种热休克蛋白70基因克隆与序列分析 | 第54-78页 |
| 1 实验材料 | 第55-56页 |
| ·实验鱼 | 第55页 |
| ·菌株和载体 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·引物设计与合成 | 第56页 |
| 2 实验方法 | 第56-61页 |
| ·团头鲂总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·团头鲂基因组DNA的提取 | 第57-58页 |
| ·团头鲂总RNA反转录合成第一链cDNA | 第58页 |
| ·团头鲂两种热休克蛋白70基因的克隆 | 第58-61页 |
| ·两种HSP70s基因中间片段的获取 | 第58-60页 |
| ·两种HSP70s基因3'端序列的克隆(3'RACE) | 第60页 |
| ·两种HSP70s基因5'端序列的克隆(5'RACE) | 第60-61页 |
| ·Ma-HSC70和Ma-HSP70基因结构分析 | 第61页 |
| ·序列分析 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-74页 |
| ·团头鲂总RNA和基因组DNA的提取 | 第61页 |
| ·团头鲂两种热休克蛋白70 cDNA的全长序列 | 第61-62页 |
| ·团头鲂两种热休克蛋白70基因的结构分析 | 第62-67页 |
| ·团头鲂两种热休克蛋白70核苷酸及相应氨基酸的序列分析 | 第67-68页 |
| ·团头鲂两种热休克蛋白70同源性分析 | 第68-72页 |
| ·团头鲂两种HSP70s的蛋白结构和功能预测 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 5 小结 | 第76-78页 |
| 第五章 大黄素和维生素C对团头鲂生长、生理生化指标以及两种HSP70s mRNA表达的影响 | 第78-92页 |
| 1 材料与方法 | 第80-84页 |
| ·实验鱼种、添加剂及日粮 | 第80页 |
| ·饲养管理 | 第80页 |
| ·采样与处理 | 第80-81页 |
| ·测定指标与方法 | 第81-84页 |
| ·生长与形体指标 | 第81-82页 |
| ·肌肉成分分析 | 第82页 |
| ·血液生化指标的测定 | 第82页 |
| ·肝脏抗氧化指标的测定 | 第82页 |
| ·肝脏两种热休克蛋白70mRNA表达水平的测定 | 第82-84页 |
| ·数据统计与分析 | 第84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-87页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂生长性能的影响 | 第84-85页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肌肉成分的影响 | 第85页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血液生化指标的影响 | 第85-86页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第86页 |
| ·荧光定量PCR扩增效率的分析 | 第86-87页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第87页 |
| 3 讨论 | 第87-91页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂生长性能的影响 | 第87-88页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血液生化指标的影响 | 第88-90页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第90页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第90-91页 |
| 4 小结 | 第91-92页 |
| 第六章 大黄素和维生素C对团头鲂在拥挤胁迫下生化指标及两种HSP70s mRNA表达的影响 | 第92-108页 |
| 1 材料与方法 | 第93-94页 |
| ·实验鱼种、添加剂及日粮 | 第93页 |
| ·饲养管理 | 第93页 |
| ·拥挤胁迫试验 | 第93页 |
| ·采样与处理 | 第93页 |
| ·测定指标与方法 | 第93-94页 |
| ·数据统计与分析 | 第94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-102页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清皮质醇和葡萄糖水平的影响 | 第94-95页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 | 第95-96页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清总蛋白、溶菌酶和碱性磷酸酶水平的影响 | 第96-97页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清甘油三酯和胆固醇含量的影响 | 第97-99页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第99-100页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂在拥挤胁迫下的保护作用 | 第100-101页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第101-102页 |
| 3 讨论 | 第102-106页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清皮质醇和葡萄糖水平的影响 | 第102页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 | 第102-103页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清总蛋白、溶菌酶和碱性磷酸酶水平的影响 | 第103-104页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清甘油三酯和胆固醇含量的影响 | 第104页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第104-105页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂在拥挤胁迫下的保护作用 | 第105页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第105-106页 |
| 4 小结 | 第106-108页 |
| 第七章 大黄素和维生素C对团头鲂在高温应激下生化指标及两种HSP70s mRNA表达的影响 | 第108-124页 |
| 1 材料与方法 | 第109-110页 |
| ·实验鱼种、添加剂及日粮 | 第109页 |
| ·饲养管理 | 第109页 |
| ·高温应激试验 | 第109页 |
| ·采样与处理 | 第109页 |
| ·测定指标与方法 | 第109-110页 |
| ·数据统计与分析 | 第110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-118页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清皮质醇和葡萄糖水平的影响 | 第110-111页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 | 第111-112页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清总蛋白、溶菌酶和碱性磷酸酶水平的影响 | 第112-113页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清甘油三酯和胆固醇含量的影响 | 第113-115页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第115-116页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂在高温应激下累积死亡率的影响 | 第116-117页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第117-118页 |
| 3 讨论 | 第118-123页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清皮质醇和葡萄糖水平的影响 | 第118页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 | 第118-119页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清总蛋白、溶菌酶和碱性磷酸酶水平的影响 | 第119-120页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清甘油三酯和胆固醇含量的影响 | 第120页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第120-121页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂在高温应激下的保护作用 | 第121-122页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第122-123页 |
| 4 小结 | 第123-124页 |
| 第八章 大黄素和维生素C对团头鲂感染嗜水气单胞菌后的生化指标及两种HSP70s mRNA表达的影响 | 第124-140页 |
| 1 材料与方法 | 第125-126页 |
| ·实验鱼种、添加剂及日粮 | 第125页 |
| ·饲养管理 | 第125页 |
| ·攻毒试验 | 第125页 |
| ·攻毒试验Ⅰ | 第125页 |
| ·攻毒试验Ⅱ | 第125页 |
| ·采样与处理 | 第125-126页 |
| ·测定指标与方法 | 第126页 |
| ·数据统计与分析 | 第126页 |
| 2 结果与分析 | 第126-134页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂感染嗜水气单胞菌后发病和累积死亡率的影响 | 第126-127页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清皮质醇和葡萄糖水平的影响 | 第127-128页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 | 第128-129页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清总蛋白、溶菌酶和碱性磷酸酶水平的影响 | 第129-131页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清甘油三酯和胆固醇含量的影响 | 第131-132页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第132-133页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏两种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第133-134页 |
| 3 讨论 | 第134-139页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂感染嗜水气单胞菌后的保护作用 | 第134-135页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂血清非特异性免疫指标的影响 | 第135-136页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏抗氧化指标的影响 | 第136-137页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂抗应激能力的影响 | 第137-138页 |
| ·大黄素和Vc对团头鲂肝脏西种HSP70s mRNA表达水平的影响 | 第138-139页 |
| 4 小结 | 第139-140页 |
| 第九章 团头鲂两种热休克蛋白70的原核表达、纯化及鉴定 | 第140-154页 |
| 1 材料与方法 | 第141-146页 |
| ·材料 | 第141-142页 |
| ·Ma-HSC70和Ma-HSP70基因编码区的PCR扩增 | 第142-143页 |
| ·重组质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70的构建及鉴定 | 第143-144页 |
| ·重组质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70的原核表达及鉴定 | 第144-145页 |
| ·温度和时间对Ma-HSC70和Ma-HSP70融合蛋白诱导表达形式的影响 | 第145页 |
| ·Ma-HSC70和Ma-HSP70融合蛋白的优化表达、纯化及鉴定 | 第145-146页 |
| 2 结果与分析 | 第146-152页 |
| ·Ma-HSC70和Ma-HSP70基因编码区的PCR扩增 | 第146页 |
| ·重组质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70的构建及鉴定 | 第146-147页 |
| ·重组质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70的原核表达及鉴定 | 第147-148页 |
| ·温度和时间对Ma-HSC70和Ma-HSP70融合蛋白表达形式的影响 | 第148-151页 |
| ·Ma-HSC70和Ma-HSP70融合蛋白的优化表达、纯化及鉴定 | 第151-152页 |
| 3 讨论 | 第152-153页 |
| 4 小结 | 第153-154页 |
| 全文结论 | 第154-156页 |
| 本研究的创新点 | 第156-158页 |
| 参考文献 | 第158-180页 |
| 附录一 常用试剂配制一览表 | 第180-184页 |
| 附录二 载体图谱及序列 | 第184-186页 |
| 致谢 | 第186-188页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第188页 |
