| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| ·生物质能源与菌草 | 第10-13页 |
| ·生物质能 | 第10-11页 |
| ·我国生物质能资源 | 第11-13页 |
| ·白腐菌及木质纤维素的降解 | 第13-18页 |
| ·白腐菌对木质素的降解 | 第15-16页 |
| ·白腐菌对纤维素的降解 | 第16-17页 |
| ·白腐菌对半纤维素的降解 | 第17-18页 |
| ·白腐菌木素降解酶的基本特性与作用机理 | 第18-24页 |
| ·木素过氧化物酶(LiP) | 第18-19页 |
| ·锰过氧化物酶(MnP) | 第19页 |
| ·漆酶(Lac) | 第19-24页 |
| ·课题思路提出与设计 | 第24-25页 |
| 2 高效降解菌草的食用菌筛选 | 第25-36页 |
| ·试验材料与方法 | 第25-26页 |
| ·试验菌株 | 第25-26页 |
| ·菌草粉 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·试剂与仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·菌株筛选 | 第26-27页 |
| ·变色圈实验 | 第27页 |
| ·木质素降解试验 | 第27-28页 |
| ·降解率测定及选择性指数(SF)的计算 | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-35页 |
| ·选择性筛选 | 第29页 |
| ·菌落直径和变色圈直径的比值测定(d1/d2) | 第29-30页 |
| ·苯胺兰固体培养基和鞣酸固体培养基的筛选 | 第30-31页 |
| ·木质素降解 | 第31-33页 |
| ·SF指数计算 | 第33-34页 |
| ·相关性检验 | 第34-35页 |
| ·小结与讨论 | 第35-36页 |
| 3 白腐菌对菌草的降解及其漆酶的分离纯化 | 第36-57页 |
| ·试验材料 | 第36-37页 |
| ·试验菌株 | 第36页 |
| ·菌草粉 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·试剂与仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·培养与培养方法 | 第37页 |
| ·酶活测定方法 | 第37-38页 |
| ·傅立叶红外光谱分析(FTIR) | 第38-39页 |
| ·漆酶发酵液的纯化 | 第39页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE和Native PAGE | 第40-41页 |
| ·漆酶酶学性质研究 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-54页 |
| ·木素过氧化物酶的动态变化 | 第43页 |
| ·红外光谱检测表面功能基团变化 | 第43-46页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第46-47页 |
| ·蛋白的凝胶过滤层析 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE鉴定酶的纯度及测定酶的分子量 | 第47-48页 |
| ·Native PAGE分析 | 第48-49页 |
| ·漆酶的酶活性质研究 | 第49-54页 |
| ·小结与讨论 | 第54-57页 |
| 4 纤维素酶(eg/2)和半纤维素酶(xyn2)基因的克隆表达 | 第57-67页 |
| ·试验材料 | 第57-58页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·菌草粉 | 第57-58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·试剂与仪器 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-61页 |
| ·酶活测定方法 | 第58页 |
| ·目的基因的PCR | 第58-59页 |
| ·目的基因的TA克隆 | 第59页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第59页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第59页 |
| ·小量提取重组质粒 | 第59页 |
| ·表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·重组质粒验证 | 第60页 |
| ·大肠杆菌BL21感受态细胞及IPTG诱导 | 第60页 |
| ·蛋白质的纯化、复性 | 第60页 |
| ·SDS-PAGE及酶活测定 | 第60-61页 |
| ·蛋白的表达与处理综纤维素和菌草 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·克隆载体的构建 | 第61-62页 |
| ·表达载体的构建 | 第62页 |
| ·蛋白的表达及酶谱分析 | 第62-64页 |
| ·综纤维素的降解 | 第64-65页 |
| ·小结与讨论 | 第65-67页 |
| 5 总结与展望 | 第67-70页 |
| ·主要研究结果 | 第67-68页 |
| ·展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |