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微囊藻毒素-LR对草鱼和斑马鱼免疫基因表达及草鱼免疫器官超微结构的影响

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略语表(Abbreviation)第13-15页
第一章 微囊藻毒素及其对鱼类的毒理学影响:综述第15-32页
 1 微囊藻毒素的产生、分布及其毒性机理第15-23页
   ·水体富营养化的形成及影响第15-16页
   ·微囊藻毒素的产生第16-17页
   ·微囊藻毒素的化学结构和理化性质第17-20页
   ·微囊藻毒素在天然水体中的含量及分布第20-21页
   ·微囊藻毒素的检测方法第21-22页
   ·微囊藻毒素的毒性机理第22-23页
 2 微囊藻毒素对鱼类的毒理学影响第23-31页
   ·微囊藻毒素在组织中的积累第23-25页
   ·微囊藻毒素对胚胎孵化的影响第25-26页
   ·微囊藻毒素对鱼类行为和生长的影响第26页
   ·微囊藻毒素对鱼类心律的影响第26-27页
   ·微囊藻毒素对血清生化指标的影响第27页
   ·微囊藻毒素对氧化酶和解毒酶活性的影响第27-29页
   ·微囊藻毒素引起的鱼类组织病理第29-30页
   ·微囊藻毒素的遗传毒性第30页
   ·微囊藻毒素的免疫毒性第30-31页
 3 本研究的目的第31-32页
第二章 微囊藻毒素-LR对草鱼脾脏、头肾和肝脏超微结构的影响第32-53页
 1 前言第32-33页
 2 材料与方法第33-34页
   ·供试材料第33页
   ·实验鱼的处理第33页
   ·电镜样品的制备第33页
   ·DNA凝胶电泳第33-34页
 3 结果第34-49页
   ·脾脏第34-37页
   ·头肾第37-39页
   ·肝脏第39-47页
     ·细胞连接的变化第39-41页
     ·胆汁淤积第41-42页
     ·微囊藻毒素-LR对肝脏线粒体的影响第42-44页
     ·微囊藻毒素-LR对肝脏内质网的影响第44-46页
     ·微囊藻毒素-LR对肝脏其他的影响第46-47页
   ·DNA片段化第47-49页
 4 讨论第49-53页
第三章 微囊藻毒素-LR对草鱼免疫相关基因表达的影响第53-81页
 1 前言第53页
 2 材料与方法第53-59页
   ·实验鱼的处理第53-54页
   ·RNA的提取第54页
   ·RNA样品中DNA的去除第54页
   ·cDNA模板的准备第54-55页
   ·标准曲线的建立第55-57页
     ·引物设计第55-56页
     ·PCR扩增及目的片段的纯化第56页
     ·连接和转化第56页
     ·测序第56-57页
     ·质粒的制备第57页
     ·质粒的稀释第57页
   ·荧光定量PCR第57-58页
   ·统计分析方法第58-59页
 3 结果第59-77页
   ·RNA质量的检测第59-61页
   ·反转录效果的检测第61页
   ·基因的非特异性检测第61-64页
   ·标准曲线的绘制第64-68页
   ·微囊藻毒素-LR对草鱼六个免疫相关基因表达的影响第68-77页
     ·微囊藻毒素-LR对白介素-1β表达的影响第71-72页
     ·微囊藻毒素-LR对肿瘤坏死因子-α表达的影响第72-73页
     ·微囊藻毒素-LR对Ⅰ型干扰素表达的影响第73-74页
     ·微囊藻毒素-LR对长链肽聚糖识别蛋白表达的影响第74-75页
     ·微囊藻毒素-LR对免疫球蛋白M表达的影响第75-76页
     ·微囊藻毒素-LR对主要组织相容性复合体Ⅰ表达的影响第76-77页
 4 讨论第77-81页
   ·白介素-1β第77页
   ·肿瘤坏死因子-α第77-78页
   ·Ⅰ型干扰素第78页
   ·长链肽聚糖识别蛋白第78-79页
   ·免疫球蛋白M第79页
   ·主要组织相容性复合体Ⅰ第79-81页
第四章 利用基因芯片技术对微囊藻毒素-LR处理斑马鱼后肝脏基因表达谱的研究第81-106页
 1 前言第81-82页
 2 材料与方法第82-88页
   ·斑马鱼的处理第82页
   ·RNA的提取第82-83页
   ·样品RNA的荧光标记第83-85页
     ·第一链cDNA的合成第83页
     ·第二链cDNA的合成第83页
     ·双链cDNA的纯化第83-84页
     ·生物素标记cRNA的体外合成第84页
     ·cRNA的纯化第84页
     ·cRNA的定量第84页
     ·cRNA的片段化第84-85页
   ·斑马鱼靶标杂交第85页
   ·斑马鱼阵列的清洗、染色和扫描第85-86页
     ·探针阵列的清洗与染色第85-86页
     ·芯片扫描第86页
   ·数据分析第86页
   ·Pathway分析第86页
   ·荧光定量PCR验证实验第86-88页
 3 结果第88-101页
   ·RNA质量检测结果第88-89页
   ·差异表达基因分析第89-99页
   ·Pathway分析结果第99-100页
   ·荧光定量PCR的验证结果第100-101页
 4 讨论第101-106页
全文小结第106-107页
参考文献第107-137页
附录第137-138页
致谢第138页

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