摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第13-15页 |
第一章 微囊藻毒素及其对鱼类的毒理学影响:综述 | 第15-32页 |
1 微囊藻毒素的产生、分布及其毒性机理 | 第15-23页 |
·水体富营养化的形成及影响 | 第15-16页 |
·微囊藻毒素的产生 | 第16-17页 |
·微囊藻毒素的化学结构和理化性质 | 第17-20页 |
·微囊藻毒素在天然水体中的含量及分布 | 第20-21页 |
·微囊藻毒素的检测方法 | 第21-22页 |
·微囊藻毒素的毒性机理 | 第22-23页 |
2 微囊藻毒素对鱼类的毒理学影响 | 第23-31页 |
·微囊藻毒素在组织中的积累 | 第23-25页 |
·微囊藻毒素对胚胎孵化的影响 | 第25-26页 |
·微囊藻毒素对鱼类行为和生长的影响 | 第26页 |
·微囊藻毒素对鱼类心律的影响 | 第26-27页 |
·微囊藻毒素对血清生化指标的影响 | 第27页 |
·微囊藻毒素对氧化酶和解毒酶活性的影响 | 第27-29页 |
·微囊藻毒素引起的鱼类组织病理 | 第29-30页 |
·微囊藻毒素的遗传毒性 | 第30页 |
·微囊藻毒素的免疫毒性 | 第30-31页 |
3 本研究的目的 | 第31-32页 |
第二章 微囊藻毒素-LR对草鱼脾脏、头肾和肝脏超微结构的影响 | 第32-53页 |
1 前言 | 第32-33页 |
2 材料与方法 | 第33-34页 |
·供试材料 | 第33页 |
·实验鱼的处理 | 第33页 |
·电镜样品的制备 | 第33页 |
·DNA凝胶电泳 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-49页 |
·脾脏 | 第34-37页 |
·头肾 | 第37-39页 |
·肝脏 | 第39-47页 |
·细胞连接的变化 | 第39-41页 |
·胆汁淤积 | 第41-42页 |
·微囊藻毒素-LR对肝脏线粒体的影响 | 第42-44页 |
·微囊藻毒素-LR对肝脏内质网的影响 | 第44-46页 |
·微囊藻毒素-LR对肝脏其他的影响 | 第46-47页 |
·DNA片段化 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
第三章 微囊藻毒素-LR对草鱼免疫相关基因表达的影响 | 第53-81页 |
1 前言 | 第53页 |
2 材料与方法 | 第53-59页 |
·实验鱼的处理 | 第53-54页 |
·RNA的提取 | 第54页 |
·RNA样品中DNA的去除 | 第54页 |
·cDNA模板的准备 | 第54-55页 |
·标准曲线的建立 | 第55-57页 |
·引物设计 | 第55-56页 |
·PCR扩增及目的片段的纯化 | 第56页 |
·连接和转化 | 第56页 |
·测序 | 第56-57页 |
·质粒的制备 | 第57页 |
·质粒的稀释 | 第57页 |
·荧光定量PCR | 第57-58页 |
·统计分析方法 | 第58-59页 |
3 结果 | 第59-77页 |
·RNA质量的检测 | 第59-61页 |
·反转录效果的检测 | 第61页 |
·基因的非特异性检测 | 第61-64页 |
·标准曲线的绘制 | 第64-68页 |
·微囊藻毒素-LR对草鱼六个免疫相关基因表达的影响 | 第68-77页 |
·微囊藻毒素-LR对白介素-1β表达的影响 | 第71-72页 |
·微囊藻毒素-LR对肿瘤坏死因子-α表达的影响 | 第72-73页 |
·微囊藻毒素-LR对Ⅰ型干扰素表达的影响 | 第73-74页 |
·微囊藻毒素-LR对长链肽聚糖识别蛋白表达的影响 | 第74-75页 |
·微囊藻毒素-LR对免疫球蛋白M表达的影响 | 第75-76页 |
·微囊藻毒素-LR对主要组织相容性复合体Ⅰ表达的影响 | 第76-77页 |
4 讨论 | 第77-81页 |
·白介素-1β | 第77页 |
·肿瘤坏死因子-α | 第77-78页 |
·Ⅰ型干扰素 | 第78页 |
·长链肽聚糖识别蛋白 | 第78-79页 |
·免疫球蛋白M | 第79页 |
·主要组织相容性复合体Ⅰ | 第79-81页 |
第四章 利用基因芯片技术对微囊藻毒素-LR处理斑马鱼后肝脏基因表达谱的研究 | 第81-106页 |
1 前言 | 第81-82页 |
2 材料与方法 | 第82-88页 |
·斑马鱼的处理 | 第82页 |
·RNA的提取 | 第82-83页 |
·样品RNA的荧光标记 | 第83-85页 |
·第一链cDNA的合成 | 第83页 |
·第二链cDNA的合成 | 第83页 |
·双链cDNA的纯化 | 第83-84页 |
·生物素标记cRNA的体外合成 | 第84页 |
·cRNA的纯化 | 第84页 |
·cRNA的定量 | 第84页 |
·cRNA的片段化 | 第84-85页 |
·斑马鱼靶标杂交 | 第85页 |
·斑马鱼阵列的清洗、染色和扫描 | 第85-86页 |
·探针阵列的清洗与染色 | 第85-86页 |
·芯片扫描 | 第86页 |
·数据分析 | 第86页 |
·Pathway分析 | 第86页 |
·荧光定量PCR验证实验 | 第86-88页 |
3 结果 | 第88-101页 |
·RNA质量检测结果 | 第88-89页 |
·差异表达基因分析 | 第89-99页 |
·Pathway分析结果 | 第99-100页 |
·荧光定量PCR的验证结果 | 第100-101页 |
4 讨论 | 第101-106页 |
全文小结 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-137页 |
附录 | 第137-138页 |
致谢 | 第138页 |