| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-22页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的简介 | 第8-9页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白及其基因 | 第9-10页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因的命名与分类 | 第10-11页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的杀虫机制 | 第11-12页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的结构与功能 | 第12-14页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的一级结构与功能 | 第12-13页 |
| ·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的空间结构与功能 | 第13-14页 |
| ·伴胞晶体的形成 | 第14页 |
| ·杀虫晶体蛋白C端及二硫键的功能 | 第14-15页 |
| ·辅助蛋白对杀虫晶体蛋白基因表达和伴胞晶体形成的影响 | 第15-16页 |
| ·无毒晶体蛋白的存在原因 | 第16页 |
| ·杀虫晶体蛋白的溶解及剪切 | 第16-17页 |
| ·晶体蛋白溶解性与杀虫活性的关系 | 第17-19页 |
| ·目标昆虫对苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的抗性以及防治措施 | 第19-22页 |
| 2 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 3 材料和方法 | 第23-30页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·培养基及生长条件 | 第23页 |
| ·引物以及寡聚脱氧核糖核酸 | 第23页 |
| ·试剂和仪器 | 第23-26页 |
| ·供试昆虫 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·质粒 DNA的少量抽提与纯化 | 第26页 |
| ·DNA片段的回收 | 第26-27页 |
| ·重组 DNA的转化 | 第27页 |
| ·PCR扩增片断的克隆与测序 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌转化子的质粒快检方法 | 第28页 |
| ·PCR扩增 | 第28页 |
| ·SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第28页 |
| ·杀虫晶体蛋白质的定量 | 第28-29页 |
| ·晶体蛋白的溶解性测定 | 第29页 |
| ·生测用晶体蛋白溶液的制备 | 第29页 |
| ·生物测定 | 第29-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-46页 |
| ·出发菌株晶体蛋白的性质 | 第30-32页 |
| ·分别用cry1Ac和cry1C基因编码区的5’端和3’端分别替换cry7Ba1的5’端和3’端构建重组质粒 | 第32-37页 |
| ·重组质粒电转 BMB171后的酶切验证 | 第37页 |
| ·重组基因在苏云金芽胞杆菌无晶体突变株BMB171中表达 | 第37-38页 |
| ·重组菌株晶体的显微镜检测 | 第38-39页 |
| ·重组基因表达的晶体蛋白溶解性 | 第39-41页 |
| ·重组晶体蛋白毒力测定 | 第41-46页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第41-42页 |
| ·重组晶体蛋白毒力测定 | 第42-46页 |
| 5. 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
